雷公藤多甙对佐剂性关节炎大鼠l5 drg内sp、

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1、雷公藤多甙对佐剂性关节炎大鼠L5DRG内SP、【摘要】ObjectiveToexploretheeffectsofpolyglycosidesofTripterygiumethodsAdjuvantArthritisratsberandpercentageofSP、CGRPpositiveneuronsamongtotalneuronsinbilateralDRG(L5).ResultsSP、CGRPexpressioninneuronsofL5DRGinbilateralsideinTⅡpreventivegroupandtherapeuticgroup

2、decreasedapparentlyasparedodelgroup.ConclusionTⅡmayplayapreventiveandtherapeuticrolebydecreasingtheexpressionofSPandCGRPinL5dorsalrootganglion.【关键词】polyglcosidesofTripterygiumatoidarthritis，RA）是一种常见的自身免疫性疾病，多种细胞因子和炎症介质参与了RA发病，引起滑膜细胞增生、致炎、软骨破坏、关节畸形；此外，神经递质也参与了上述病变过程并且与疼痛传导有关。类风湿关节炎

3、滑膜腔中有多种神经递质：如P物质（substanceP，SP）、降钙素基因相关肽（Calcitoniongenerelatedpeptide，CGRP）、神经肽Y(NeuropeptideY，NPY)。SP、CGRP等神经递质主要在脊神经节的初级感觉神经元胞体内合成，当关节炎发生时，其合成也发生相应变化。这些神经递质释放到关节腔后，能够与相应受体结合，引起关节内环境改变，介导神经源性炎症反应。中药雷公藤多甙（polyglycosidesoftripterygiumofa公司产品）0.2ml，不给药物治疗；C组（TⅡ预防组，TⅡ为湖南株州制药三厂产品）造模方

4、法同模型组，造模后第7天开始灌胃给予TⅡ，用药剂量以大鼠体表面积换算公式计算，即1/d，TⅡ30mg·kg-１/次，共7天；D组（TⅡ治疗组）造模方法同模型组，造模后第19天开始灌胃给予TⅡ，1/d，TⅡ30mg·kg-1/次，共7天。2.2灌注和取材造模28d灌注固定后取材，取双侧L5DRG后固定12h，分别经50%、60%、70%、80%、90%、95%、100%梯度酒精脱水各30min，入氯仿Ⅰ、氯仿Ⅱ各透明30min，石蜡包埋后用石蜡切片机连续切片，片厚7μm，各组每例L5DRG等距离间隔取片，取片2组,每组5纵带（每带3张），分别用SP、CGRP

5、抗体进行免疫组织化学染色。2.3免疫组织化学染色用SP法做L5DRGSP、CGRP免疫组化染色。2.4免疫组化对照实验空白对照：用0.05mol/LPBS代替一抗，其余步骤不变。置换实验：用正常羊血清代替一抗，其余步骤不变。2.5免疫组化阳性细胞计数显微镜下观察SP、CGRP免疫阳性细胞在L5DRG的分布情况，计数每例动物每张切片上所有可见细胞核的阳性细胞和阴性细胞数。求出5例动物阳性细胞均数作为该组动物SP、CGRP的阳性细胞数,5例动物阳性细胞和阴性细胞之和的均数作为该组动物L5DRG细胞总数，分别计算出SP、CGRP阳性细胞占细胞总数的百分比。2.6

6、统计学处理数据均采用均数±标准差（x±s）表示。应用SPSS11.0forwindows统计软件包，组间比较用单因素方差分析。凡Ｐ＜0.05，结果有统计学意义。3结果3.1TⅡ对大鼠L5背根神经节内SP表达的影响免疫组织化学结果显示SP主要存在于L5背根神经节内中、小型神经元，大神经元不表达。佐剂性关节炎形成后，模型组大鼠与正常组大鼠比较，L5背根神经节内SP表达明显上调；TⅡ预防组和治疗组与模型组比较，L5背根神经节内SP表达明显表1各组大鼠L5背根神经节内SP表达的变化降低，与正常组无显著差异（见表1）。经统计学分析，正常组大鼠双侧DRG中SP阳性细胞

7、的百分率基本相等(见表1)。模型组大鼠造模侧和非造模侧阳性细胞的百分率较正常组明显增高（P＜0.05），双侧无明显差异。TⅡ预防组和治疗组造模侧和非造模侧阳性细胞的百分率与正常组比较无显著性差异，与模型组比较显著降低（P＜0.05）。3.2TⅡ对大鼠L5背根神经节内CGRP表达的影响免疫组织化学结果显示CGRP存在于大鼠背根节内的大、中、小型神经元中。佐剂性关节炎形成后，模型组大鼠与正常组大鼠比较，L5背根神经节内CGRP表达明显上调；TⅡ预防组和治疗组与模型组比较，L5背根神经节内CGRP表达明显降低，与正常组无显著差异（见表2）。表2各组大鼠L5背根神

8、经节内CGRP表达的变化经统计学分析，正常组大鼠双侧DRG中CGR