关节炎丸对大鼠佐剂性关节炎治疗作用的实验研究

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1、从本学科出发,应着重选对国民经济具有一定实用价值和理论意义的课题。课题具有先进性,便于研究生提出新见解,特别是博士生必须有创新性的成果关节炎丸对大鼠佐剂性关节炎治疗作用的实验研究【摘要】目的:探讨关节炎丸治疗类风湿性关节炎的作用机制。方法:制作实验性关节炎大鼠(AdjuvantArthritis,AA)动物模型,观察关节炎丸对大鼠血浆TNFα及IL1β影响,并与雷公藤阳性对照组进行比较。结果:关节炎丸抑制炎症组织中TNFα及IL1β优于雷公藤组。结论:关节炎丸通过影响炎症介质的释放而产生抗炎镇痛和抗风湿作用。【关键词】关节炎丸;类风

2、湿性关节炎;佐剂类风湿性关节炎(rheumatoidarthritis,RA)是一种以关节滑膜炎症为特征的慢性全身性自身免疫性疾病,它具有表现复杂、反复发作、缠绵难愈,致残率高的特点,为临床疑难杂病之一。导师牟慧琴教授近十年来一直从事于张仲景经典著作《金匮要略》教学与内科临床,主攻疑难杂证,在风湿病、类风湿疾病、老年性腰腿病、面瘫、哮喘病、神经官能症、妇女更年期疾病、眩晕病、萎缩性胃炎等方面都有较为深刻的认识,尤其在诊治类风湿性关节炎方面积累了丰富的经验并颇具特色,导师通过对临床经验的总结研制出便于RA患者服用并可巩固疗效的中成药“关节炎丸

3、”,在临床中疗效显著。经初步药效学研究课题份量和难易程度要恰当,博士生能在二年内作出结果,硕士生能在一年内作出结果,特别是对实验条件等要有恰当的估计。从本学科出发,应着重选对国民经济具有一定实用价值和理论意义的课题。课题具有先进性,便于研究生提出新见解,特别是博士生必须有创新性的成果表明,关节炎丸对实验性佐剂性关节炎有明显的抗炎镇痛作用,为进一步探讨关节炎丸治疗RA的作用机理,我们用Wistar大鼠制作AA模型,观察关节炎丸抗风湿的作用机理,现将实验资料报告如下:1材料与方法实验动物与分组Wistar大鼠50只,雌雄各半,年龄为45-50d

4、,体重(200±20)g,购于甘肃中医学院动物科研实验中心(实验动物质量合格证编号和实验动物使用许可证号:SCXK(H)XX-0006-),动物饲料:由上海斯莱克实验动物有限责任公司提供。50只大鼠雌雄分开,于实验前驯养1周后,按体重编号,随机分为5组(每组雌雄各半):正常对照组(正常组n=10);模型对照组(模型组,n=10);关节炎丸高剂量治疗组(GJYWH组,n=10);关节炎丸低剂量治疗组(GJYWL组,n=10);雷公藤治疗组(雷公藤组,n=10)。药品与试剂关节炎丸由制附片、制川乌、细辛、党参、黄芪、桂枝、白芍、甘草等配伍组成,

5、其中制附片、制川乌、细辛应先煎30min后再把其余药放入一起水煎、过滤并加热浓缩致相应浓度。雷公藤片剂由湖南协力药业有限公司生产(批号:Z430XX8,国药准字),给药时临时研粉调制,将5mg的雷公藤片研末再加入50ml的水配成溶液。完全福氏佐剂(CFA)购于Sigma公司;TNFα试剂盒由北京科美东雅生物技术有限公司提供(生产批号:XX0725),IL1β由北京华英生物技术研究所提供。AA大鼠模型制备与检测方法课题份量和难易程度要恰当,博士生能在二年内作出结果,硕士生能在一年内作出结果,特别是对实验条件等要有恰当的估计。从本学科出发,

6、应着重选对国民经济具有一定实用价值和理论意义的课题。课题具有先进性,便于研究生提出新见解,特别是博士生必须有创新性的成果在实验第一天进行造模:用75%酒精对除正常对照组外大鼠右足跖进行消毒,将/只,注射于大鼠右足跖皮下(于后肢足跖皮内注射的量能明显提高AA大鼠造模的成功率,较以前文献报道的注射量,背部多点注射法等有较大的改进[1])。正常对照组大鼠则注射生理盐水/只。各组动物最后一次灌胃后,禁食不禁水24h后全部处死取材。血清标本的制备:股动脉采血5ml,37℃水中静置,以3000转/min,离心15min,取上清液放入尖底试管中,置于4℃

7、冰箱内保存,送兰州解放军总院药物研究所待测TNFα及IL1β。给药方法给药第3d起开始定时灌胃给药,每日1次,根据人和动物间按体表面积折算的等效剂量比值,关节炎丸浓煎液GJYWH组每次3ml/只,GJYWL组每次/只,灌胃前将药液静置到室温,摇匀给药;雷公藤多甙片溶液研制后给予每次2ml/只,摇匀给药;正常组、模型组给予等量生理盐水。统计学处理对所有符合实验方案要求的数据均输入计算机,用统计软件处理,实验数据以均数±标准差(±s)表示,根据方差齐性采用单因素方差分析(OneWayANOVN)P<有统计学意义。结果各组大鼠血清IL1

8、β、TNFα含量的比较(见表1)注:与空白组比较#P<;与模型组比较△P<。课题份量和难易程度要恰当,博士生能在二年内作出结果,硕士生能在一年内作出结果,特别是对实验条件等要有

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