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时间:2019-05-24
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1、!"卷!期微生物学报!("!):"$&’"$(#$$"年%月!日!"#$%&"’()&(*(+&"$,&-&"$!)*+*,-#$$"!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!几种酶活抑制剂对红曲霉色素合成的影响朱雷,常慧萍,唐欣昀",李坤阳,曹媛媛(安徽农业大学生命科学学院合肥#1$$1&)摘要:红曲色素是天然安全的色素和防腐剂,根据代谢数据库选择了&种代谢途径关键酶的抑制剂,在基本培养基中考察这些抑制剂对红曲霉生长和合成色素的影响。甲羟戊酸合成途径的抑
2、制剂邻氨基苯甲酸和1,!6二羟苯甲酸对红曲霉生长和色素生物合成都没有影响;莽草酸途径关键酶氨基苯甲酸合成酶的抑制剂三甲胺不抑制红曲霉的生长和色素的合成。在不影响红曲霉生长的浓度范围内,聚酮途径中!6酮酯酰6)GH合成酶的专性抑制剂碘乙酰胺($I7<3、合成;酶活抑制剂;聚酮途径中图分类号:M(17文献标识码:)文章编号:$$$06$((#$$")$!6$"$&6$!红曲霉(NC>9,A*,)是重要的用于传统食品加工的微生微生物菌种保藏中心购得。[0’7]物,在中国及东南亚地区已有上千年的历史;红曲霉的!"!"#试剂和仪器:三甲胺、邻氨基苯甲酸、1,!6二羟苯甲发酵产物红曲是天然安全的色素和防腐剂,在酿酒、食品、食酸、碘乙酰胺、咪唑、#,!6二硝基氟苯均购自北京原平皓生物用色素、中药等方面得到广泛应用。红曲色素是红曲霉的次技术公司合肥分公司。3R60%$$,OA紫外可见分光光度计(4、北生代谢产物,由黄色及红色等多种色素组成,红曲色素稳定京普析通用仪器公司)测定)*值。液体振荡培养采用QS6[&]性好,是具有防腐、保健、药用作用的主要成份。目前国内#$0$.恒温摇瓶柜(太仓科教仪器厂)。外的研究都集中在优化培养基提高色素产量、选育高产菌株!"!"$培养基:"麦芽汁琼脂斜面培养基:每升含葡萄糖以及红曲霉产生的其它代谢产物等方面,虽然已经揭示了红0$+,酵母膏1+,麦芽浸膏1+,蛋白胨7+,琼脂#$+,OQ&I!,["]曲色素的化学结构,属)E9OF=5C>4类有机物,但尚没有关于0$$TH9灭菌#$<=>;#种子培养基5、:种子培养基成分与斜面培[%,(]其生物合成代谢途径的研究;由于不了解红曲色素合成养基相同,不加琼脂;7$$;$基本培养基:每升含葡萄糖#$+,蛋白胨7+,酵母膏发酵代谢调控。7+,.Q#HU!0+,N+VU!·"Q#U$I7+,G9G5#$I0+,OQ&I!,#7$。[0$][00,0#]物,NCCP等用核磁共振和质谱相结合的方法证明红!"#6、酶活抑制剂的选择曲霉色素之一NC>9AC5=>.由#个聚酮体链构成,通过对G6[01,0!]参考.;HHW9-9X9,4和2P4>Y9W9-9X9,4的代谢途径选Q、G6$键形成的研究表明NC>9AC5=>.合成与脂肪酸合成十择各类酶活抑制剂三甲胺、邻氨基苯甲酸、1,!6二羟苯甲酸、分相似;因此他们推测NC>9AC5=>.是通过与脂肪酸合成途径碘乙酰胺、咪唑、#,!6二硝基氟苯。十分相似的聚酮体途径合成,这为代谢途径的研究提供了线!"$抑制色素合成方法索。本研究将采用酶活抑制剂来探讨红曲色素的生物合成用0$7、基上洗下红曲霉途径,为红曲色素合成机理的研究和高产菌株的选育工作提孢子,每瓶种子培养基接种7回转摇床上避光培养1Y;在每瓶基本培养液中加入1振荡避光!材料和方法培养。用1Y菌龄的菌液作为种子,按0L的比例接种到新鲜!"!材料基本培养基中,无菌加入各种不同浓度的抑制剂,每种处理1!"!"!菌种:红曲霉菌株N7$1!(!"#$%&’%$#($)从中国工业次重复,1$Z、0#$PJ<=>振荡避光培养;定时取样测定抑制剂基金项目8、:安徽省自然基金项目(#$$&./0"12)"通讯作者。345:%&677067"%&0#(;89::%&677067"%&%11;;6<9=5:-9>+:=>?*>@#0A>BAC<作者简介:朱雷(0(%
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4、北生代谢产物,由黄色及红色等多种色素组成,红曲色素稳定京普析通用仪器公司)测定)*值。液体振荡培养采用QS6[&]性好,是具有防腐、保健、药用作用的主要成份。目前国内#$0$.恒温摇瓶柜(太仓科教仪器厂)。外的研究都集中在优化培养基提高色素产量、选育高产菌株!"!"$培养基:"麦芽汁琼脂斜面培养基:每升含葡萄糖以及红曲霉产生的其它代谢产物等方面,虽然已经揭示了红0$+,酵母膏1+,麦芽浸膏1+,蛋白胨7+,琼脂#$+,OQ&I!,["]曲色素的化学结构,属)E9OF=5C>4类有机物,但尚没有关于0$$TH9灭菌#$<=>;#种子培养基
5、:种子培养基成分与斜面培[%,(]其生物合成代谢途径的研究;由于不了解红曲色素合成养基相同,不加琼脂;7$$;$基本培养基:每升含葡萄糖#$+,蛋白胨7+,酵母膏发酵代谢调控。7+,.Q#HU!0+,N+VU!·"Q#U$I7+,G9G5#$I0+,OQ&I!,#7$。[0$][00,0#]物,NCCP等用核磁共振和质谱相结合的方法证明红!"#
6、酶活抑制剂的选择曲霉色素之一NC>9AC5=>.由#个聚酮体链构成,通过对G6[01,0!]参考.;HHW9-9X9,4和2P4>Y9W9-9X9,4的代谢途径选Q、G6$键形成的研究表明NC>9AC5=>.合成与脂肪酸合成十择各类酶活抑制剂三甲胺、邻氨基苯甲酸、1,!6二羟苯甲酸、分相似;因此他们推测NC>9AC5=>.是通过与脂肪酸合成途径碘乙酰胺、咪唑、#,!6二硝基氟苯。十分相似的聚酮体途径合成,这为代谢途径的研究提供了线!"$抑制色素合成方法索。本研究将采用酶活抑制剂来探讨红曲色素的生物合成用0$7、基上洗下红曲霉途径,为红曲色素合成机理的研究和高产菌株的选育工作提孢子,每瓶种子培养基接种7回转摇床上避光培养1Y;在每瓶基本培养液中加入1振荡避光!材料和方法培养。用1Y菌龄的菌液作为种子,按0L的比例接种到新鲜!"!材料基本培养基中,无菌加入各种不同浓度的抑制剂,每种处理1!"!"!菌种:红曲霉菌株N7$1!(!"#$%&’%$#($)从中国工业次重复,1$Z、0#$PJ<=>振荡避光培养;定时取样测定抑制剂基金项目8、:安徽省自然基金项目(#$$&./0"12)"通讯作者。345:%&677067"%&0#(;89::%&677067"%&%11;;6<9=5:-9>+:=>?*>@#0A>BAC<作者简介:朱雷(0(%
7、基上洗下红曲霉途径,为红曲色素合成机理的研究和高产菌株的选育工作提孢子,每瓶种子培养基接种7回转摇床上避光培养1Y;在每瓶基本培养液中加入1振荡避光!材料和方法培养。用1Y菌龄的菌液作为种子,按0L的比例接种到新鲜!"!材料基本培养基中,无菌加入各种不同浓度的抑制剂,每种处理1!"!"!菌种:红曲霉菌株N7$1!(!"#$%&’%$#($)从中国工业次重复,1$Z、0#$PJ<=>振荡避光培养;定时取样测定抑制剂基金项目
8、:安徽省自然基金项目(#$$&./0"12)"通讯作者。345:%&677067"%&0#(;89::%&677067"%&%11;;6<9=5:-9>+:=>?*>@#0A>BAC<作者简介:朱雷(0(%
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