安卡红曲霉产色素与糖化酶的研究

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1、山东农业大学硕士学位论文安卡红曲霉产色素与糖化酶的研究姓名：刘兆玺申请学位级别：硕士专业：发育生物学指导教师：杜金华;张宪省20070602关于学位论文原创性和使用授权的声明本人所呈交的学位论文，是在导师指导下，独立进行科学研究所取得的成果。对在论文研究期间给予指导、帮助和做出重要贡献的个人或集体，均在文中明确说明。本声明的法律责任由本人承担。本人完全了解L【j东农业大学有关保留和使用学位论文的规定，同意学校保留和按要求向国家有关部门或机构送交论文纸质本和电子版，允许论文被查阅和借阅。本人授权山东农业大学可以将本学

2、位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或其他复制手段保存论文和汇编本学位论文。保密论文在解密后应遵守此规定。论文作者签名：童地堡红导师签名：斟日期：山东农业大学硕士学位论文摘要本文对安卡红曲霉93ll(Monascusanka9311)液态发酵产色素及糖化酶的培养条件进行优化，研究了碳源、氮源、装液量、种龄、接种量等因素对色素积累及糖化酶活力的影响。通过正交实验确定了最佳培养条件。研究了光照、温度、pH值对红曲色素稳定性的影响，优化了桔霉素HPLC检测条件，测定了红曲发酵液中桔霉素含量。主

3、要研究结果如下：1安卡红曲霉931l发酵液最大吸收峰为495nln和425nnl，所产水溶性色素含量比醇溶性色素高。通过单因素以及正交实验，确定安卡红曲霉931l的最佳培养条件为温度32℃，种龄5d，初始pH值5．75。以产色素最佳水平组合A2BIC2D3(甘油10％，蛋白胨1．5％，接种量6％，装液量85mL)发酵时，发酵液色价为263．5U／mL：以产酶最佳水平组合AlBlC3D2(甘油9％，蛋白胨1．5％，接种量7％，装液量75mL)发酵时，发酵液糖化酶活达到409．6U／mL；以正交实验(同时以色价和糖化酶

4、活为观测值)的最佳水平组合A2BlC2D2(甘油10％，蛋白胨1．5％，接种量6％，装液量75mL)发酵时，发酵液色价达260．3U／mL，糖化酶活为404．0U／mL。2红曲色素稳定性受光照、温度、pH值等因素的影响。太阳光下照射10d色素保存率仅为20．8％，室内自然光下10d色素保存率为86．5％，室温下闭光保存10d色素保存率为97．O％：温度对红曲色素稳定性影响不大，但随着加热时阃的延长，色素稳定性会逐渐降低，40℃、60℃、80℃三个处理温度经过12h，其保存率分别为95．0％、92．O％、90．7％；

5、红曲色素在pH值5-9之『日J稳定性较强。3桔霉素高效液相测定的色谱条件为：色谱柱，ShimadzuVP。ODSC18(5岫，150mm×4．6mm)；流动相，纯甲醇；pH值2．5；荧光检测器，检测波长为沁x=33lnl-n，km=500nnl；柱温30℃；流速0．8mL／min；进样量lO儿。优化色谱条件下绘制了标准曲线，低浓度杯准样品的质量浓度与峰面积的线性关系良好，R2=0．9999，标准桔霉素HPLC的最低检测质量浓度为0．02mg／L。4高效液相分析发现，安卡红曲霉9311的发酵液中未检出桔霉素。关键词：

6、红曲霉；红曲色素；色价；糖化酶；稳定性；桔霉素安卡红曲霉产色素与糖化酶的研究AbstractInthispaper,parametersaffectingredpigmentandglueoamylaseproductioninMonascusanka93llwereoptimizedundersubmergedcultivation．Theeffectsofcarbonsources，nitrogensources，liquidvolume，andinoculumonaccumulationofMonascusp

7、igmentandglucoamylaseactivitywerestudied．neoptimumcultivationparameterswereobtainedbyorthogonaiexperiment；andthestabilityofthepigmentaffectedbylight,temperatureandpHvaluewereinvestigated．AlsotheoptimumcitrininHPLCdetectionconditionsandeitrinincontentintheMonas

8、cusfermentionliquidwerestudied．Themainresearchresultswereasfollows：1UsingUV-2450spectrophotometer，thebiggestabsorptionpeakwavelengthofMonascusanka9311fermentationliquidwere495nmand