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1、第24卷第4期食品与生物技术学报Vol.24No.42005年7月JournalofFoodScienceandBiotechnologyJul.2005文章编号:16731689(2005)04002204海藻糖对脂质膜保护作用的荧光分析胥传来,姚惠源(江南大学食品学院,江苏无锡214036)摘要:以蛋黄卵磷脂(EPC)为模型,通过反映磷脂头部基团运动情况的荧光各向异性的变化,研究海藻糖对蛋黄卵磷脂(EPC)脂质膜的保护作用,并对其机理进行探讨.试验表明:荧光各向异性A值曲线随温度变化呈抛物线形状.关键词:蛋
2、黄卵磷脂;海藻糖;荧光各向异性中图分类号:Q533文献标识码:AFluorescenceAnalysisoftheLiposomesMembraneundertheProtectionofTrehaloseXUChuanlai,YAOHuiyuan(SchoolofFoodScienceandTechnology,SouthernYangtzeUniversity,Wuxi214036,China)Abstract:Inthisreport,withEPCasamodel,theprotectiveeffectoftrehaloseontheEPC
3、liposomesmembranewasstudiedbythevarietyoffluorescenceanisotrophy,thatshowedthemovementoftheliposomesheadgroups.Themechanismoftheirinteractionwasalsoexplored.Theresultindicatedthatthecurveoftemperaturedependenceoffluorescenceanisotrophydisplayedaparabolicshape.Keywords:EPC;trehalo
4、se;fluorescenceanisotrophy海藻糖(Trehalose)是一种稳定的非还原性二至产生膜融合,海藻糖或其它糖类(甘露糖,葡萄糖糖,它由两个葡萄糖分子通过,1,1半缩醛羟基等)由于拥有许多羟基,则能够替代水和磷脂头部结合而成.海藻糖的理化性质十分稳定,不能使斐发生氢键结合,从而取代失去的结合水,维持着膜[1]林试剂还原,也不能被糖苷酶水解.表面水化状态.海藻糖能稳定脂质体的结构,在[2]生物膜表面结合水的存在对膜的稳定及完整干燥状态下亦保持其结构的完整性,这便于脂质有着重要作用.正常的情况下,膜表面都存在大量体的贮存,
5、包装和运输,有利于脂质体在制药工业的结合水,例如PC脂质体,通常每一磷脂头部都结上的应用.合10~15个水分子.结合水的存在使膜表面能降研究证明:冻干保护剂海藻糖对磷脂脂双层有低,但一旦失去结合水,膜结构将发生一系列变化,保护作用,它可以降低磷脂主相变温度,抑制膜脂[3,4]出现诸如磷脂相变温度升高,磷脂侧向相分离,膜侧相分离和膜融合.但采用荧光各向异性法研脂缺陷及形成非双层相等,从而使膜通透性增高乃究海藻糖对脂质膜保护作用,国内外文献报道极收稿日期:20040428;修回日期:20040620.基金项目:中央级科研院所基础性专项资金项
6、目(2001DEA20022)资助课题.作者简介:胥传来(1965),男,江苏盐城人,副教授,工学博士.第4期胥传来等:海藻糖对脂质膜保护作用的荧光分析23少.作者首先研究了冷冻干燥对PST(PorcinesomI∀为起、检偏器光轴方向与样品杯长轴方向平行时atotropin)脂质体包封率的影响,对冻干保护剂进的荧光强度,I#为起偏器光轴方向与样品杯长轴方行了优化选择;其次以蛋黄卵磷脂(EPC)为模型,通向平行,检偏器光轴方向与样品杯长轴方向垂直时[6]过反映磷脂头部基团运动情况的荧光探剂的荧光的荧光强度.各向异性的变化来研究海藻糖对蛋黄卵磷脂(
7、EPC)2结果与讨论脂质膜的保护作用,并对其机理进行探讨.2.1不同冻干保护剂的选用1材料与方法冷冻干燥法是目前制备储存脂质体的最佳方1.1试剂与仪器法.但在冷冻过程形成的冰晶使脂质体聚集融合,蛋黄卵磷脂:生化试剂,上海华东师范大学化而且在冷冻和解冻过程,膜内外冰晶形成速度不同工厂产品;胆固醇:分析纯,上海生物化学试剂厂产引起渗透压差,造成脂质体裂解,所以在冷冻干燥[7]品;十八胺:分析纯,fluka公司产品;乙醚:分析纯,过程中,应加入冷冻保护剂(CPA)以减少破坏.上海生物化学试剂厂产品;荧光标记磷脂酰胆碱以解决PST脂质体制备过程和储存中的
8、物理稳定(RhPC):美国Alabaster公司产品;鱼精蛋白:华性和渗漏问题