欢迎来到天天文库
浏览记录
ID:26191745
大小:52.50 KB
页数:6页
时间:2018-11-25
《海藻糖对液态低温保存血小板保护作用的实验研究 》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在工程资料-天天文库。
1、海藻糖对液态低温保存血小板保护作用的实验研究崔云,刘璐,黄成垠,尹其华,黄鹰〔摘要〕 目的:研究海藻糖对液态低温(4℃)保存血小板的保护作用。方法:采集兔心脏血,按常规方法制备浓缩血小板(CP),在CP中加入不同浓度的海藻糖,4℃储存,用51Cr铬酸钠进行标记后自体回输入兔体内,于回输后1、24、48、72h抽取兔耳动脉血,测定放射性计数率,计算24、48、72h血小板存活率,同时设常温对照组及单纯4℃储存的低温对照组进行比较。结果:加入不同浓度海藻糖各储存组的血小板寿命明显长于低温对照组,并且随着海藻糖浓度的增加而延长。结论:海藻糖可延长4℃液态保存血小板的寿命,对血小板具有保
2、护作用。 〔关键词〕海藻糖;血小板;液态;储存;4℃;51铬 Abstract:ObjectiveTostudytheprotectionoftrehaloseforliquidrabbitplateletsstoredat4℃tracedby51Cr.MethodsCardiacbloodadeintoconcentratedplatelet(CP).CPperatureandloperature+differentdoseoftrehalosefor24h.Plateletsperature.Andorethan50mg・ml-1.ConclusionTrehalose,p
3、rotectingplatelets,canprolongthelifespanofliquidplateletsstoredatloperature. Keyl心脏血,与1.5mlACD抗凝剂混匀,1000r・min-1离心10min;取上层血浆至另一离心管中,再以3000r・min-1离心20min(22℃);之后将上层血浆移至另一试管中备用,下层血小板中加备用自体血浆1ml,使血小板悬浮。 1.2.2储存CP 第1组(常温对照组):将以上制备的CP置于22℃水浴锅中温浴24h;第2组(低温对照组):将以上制备的CP置于4℃冰箱储存24h;第3~8组:CP中依次加入浓度为
4、20、30、40、50、60及70mg・ml-1的海藻糖1ml,混匀,37℃水浴锅中温浴后于4℃冰箱储存24h。 1.2.3标记血小板取出储存的CP,于室温(22℃)下以3000r・min-1离心20min,弃上清,加生理盐水1ml,使血小板悬浮,然后加入1.11MBqNa251CrO4,37℃水浴锅中温浴45min,其间振荡数次;之后再以3000r・min-1离心20min,弃上清,加备用自体血浆1ml,使血小板悬浮〔2〕。 1.2.4血小板回输 将以上标记好的1ml血小板通过兔耳缘静脉自体回输入兔体内,于回输后1、24、48、72h抽取1ml兔耳动脉血,测定放射性计数率,
5、并以1h时血液的放射性计数率作为100%,计算24、48、72h血小板存活率。 1.2.5Na251CrO4放射性计数率与标准活度换算 根据公式A=lg-1(lgC-b),将测量所得的动物器官组织样本的γ计数率值换算成动物器官组织样本的放射性摄取(ID%・g-1)。 1.3统计学处理 所得数据以±s表示,采用t检验进行统计分析。 2结果 4℃储存的低温对照组血小板各时间段的存活率非常低,24h存活率只有(6.38±2.88)%,72h时只有(3.86±1.06)%,说明4℃储存的血小板输入体内后寿命很短。加入不同浓度海藻糖4℃24h储存各组(第3~8组)各时间段血小板存
6、活率明显高于4℃储存的低温对照组(P<0.05),并且随着海藻糖浓度的增加,各时间段存活率也增加,当浓度达到50mg・ml-1时,24、48及72h存活率分别达到(59.16±2.05)%、(51.95±2.81)%及(40.44±2.43)%,并且超过此浓度,各时间段存活率不再增加,即50mg・ml-1海藻糖组与60、70mg・ml-1海藻糖组无明显差异。见表1。 表1不同储存条件下血小板的存活率(略) 3讨论 研究表明,低温下血小板的生理学性质及形态会发生改变,使其被活化、损伤,寿命缩短〔1,3〕。当它们置于低温下时,形态会从正常的铁饼状变成圆球状,周边形成许多伪足,同时
7、伴有血小板胞浆内的钙离子明显增加,微管解聚,肌动蛋白增加5倍以上。此外,血小板4℃低温保存24h以上会出现а颗粒的聚集和释放,类似于血小板正常生理激活过程,之后血小板几乎失去活性。胞浆内钙离子的迅速增加及骨架肌动蛋白的集结装配,不仅使血小板形态发生异常改变,还可以使其膜发生脂相转移,导致侧向分离,使细胞膜通透性增加,一些离子通过离子通道不受控制而进入细胞内,最终结果是出现蛋白变性和水肿、自由基过度产生、细胞骨架改变等现象,使血小板容易被激活。膜侧向分离可形成许多小的集
此文档下载收益归作者所有