实验室环境及人体体表微生物的检测

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1、实验室环境及人体体表微生物的检测(李玲艳张海满薛汝峰解制怡申传斌等)摘要:高校越来越重视对学生实践能力的培养,学生在实验室的时间和机会越来越多。然而微生物实验室不同于其他学科实验室,所面对的是一个个活的生物,而且具有不同程度的感染性。本实验项目的意义在于使学生从感官上认识自身周围存在的微生物,掌握微生物的分离、接种技术。对实验中富集的微生物采取灭菌处理,做到微生物实验室安全管理工作标准化和规范化。关键词:实验室;微生物;计数1材料与方法1.1实验材料1.1.1材料原料:马铃薯(市购)琼脂;NaOH(分析纯)天津市凯通化学试剂有限公司;牛

2、肉浸膏天津市英博生化试剂有限公司;蛋白胨天津市凯通化学试剂有限公司;蔗糖(分析纯)上海国药集团化学试剂有限公司1.1.2主要仪器设备和试剂1.1.2.1主要仪器设备高压蒸汽灭菌锅、超净工作台、电子天平、恒温培养箱、电热恒温鼓风干燥箱、霉菌培养箱、超声波清洗器、移液器、震荡培养箱、体视显微镜等。培养基平板,无菌水,灭菌棉签(装在试管内),接种环,试管架,酒精灯,酒精瓶,记号笔,废物缸,牙签等。1.1.2.2试剂碘液、二甲苯、95%乙醇、香柏油、美蓝、结晶紫、石炭酸复红、番红、孔雀绿、棉蓝等1.1.3分离计数培养基马铃薯培养基(PDA)配比

3、为:马铃薯200g、蔗糖20g、琼脂20g、水1000ml。牛肉膏蛋白胨培养基配比为:牛肉膏3g、蛋白胨10g、NaCl5g、琼脂20g、水1000ml。1.1.4本实验分别进行了以下几方面的研究:实验室门、实验室窗微生物检测;学生自身微生物检测(手,头发、皮肤、唾液等);室内空气中微生物的检测;富集微生物的处理。1.1.4.1运用垂直落下法测空气中微生物浓度。将装有牛肉膏蛋白胨培养基的平皿敞口放于空气中放置1小时,然后将其放于恒温培养箱中培养24-72小时并计数。1.1.4.2稀释平板培养计数法。将桌面上4平方厘米左右面积用灭菌棉签涂

4、抹后运用稀释平板涂布法接种在牛肉膏蛋白胨培养基中,并于37℃下在恒温培养箱中培养24-72小时并计数。门以及人体表面微生物计数也采取这种方法。1.1.4.3菌落形态初步判断法。1.1.4.4显微观察形态和结构,分类鉴定。1.1.4.5将富集得到的微生物平板放于水中煮沸处理30min,以杀灭其中的微生物。2结果与分析2.1各实验室微生物检测147实验室:敞口平皿在空气中放置1小时后平均分布细菌73个。实验室门:1平方厘米面积平均分布细菌2000个。实验台:1平方厘米面积平均分布细菌1540个。149实验室:敞口平皿在空气中放置1小时后平均

5、分布细菌70个。实验室门:1平方厘米面积平均分布细菌2058个。实验台:1平方厘米面积平均分布细菌2710个。151实验室:敞口平皿在空气中放置1小时后平均分布细菌93个。实验室门:1平方厘米面积平均分布细菌2006个。实验台:1平方厘米面积平均分布细菌3050个。140实验室:敞口平皿在空气中放置1小时内细菌:21个。实验室门:1平方厘米面积平均分布细菌1891个。试验台:1平方厘米面积平均分布细菌2440个。人体表面微生物检测手指表面1平方厘米面积平均分布细菌554个。手心表面1平方厘米面积平均分布细菌203个。手背表面1平方厘米面

6、积平均分布细菌681个。衣袖口表面1平方厘米面积平均分布细菌761个。每根头发表面(长约10cm)平均分布细菌141个。每毫升唾液平均分布细菌67400个。以下是拍摄的部分照片:3讨论从实验结果可以看出,实验室环境及人体体表微生物种类多样,数量普遍较多。学校越来越重视对学生实践能力的培养,学生在实验室的时间和机会越来越多。实验室中微生物虽然危害程度较低,但缺乏基本的防范意识,大量接触也会有感染的危险。有必要让广大同学了解并非所有的微生物都是有害的,对有害微生物加强防范意识,对实验中富集的微生物采取灭菌处理,做到微生物实验室安全管理工作标

7、准化和规范化,同时加强学生对微生物实验无菌操作的认识,合理处理实验材料,确保实验结果的准确性,同时为师生营造一个绿色的实验环境,尽可能减少污染。参考文献:(1)鞠晓红.高等院校病原微生物实验室管理与安全防护.中国病原生物学杂志,2007,2(4)317-318.(2)卢艳玲,靳会娟.实验室感染及安全防护.新医学学刊,2008,5(8):1342-1343.(3)陈柳军.多种形式开展微生物实验室室内质量控制工作.实用医技杂志,2008,15(1):116-117.(4)杨更发,林军明.微生物实验室质量控制的研究.预防医学情报杂志,2001

8、,17(1):47-49.(5)王燕玲,彭辉.浅谈微生物无菌操作技术.中国质量技术监督,2008,8:70.(6)刘秀明.微生物实验室内部CFU值的质量控制探讨.现代预防医学,2008,35(11):215

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