毕业论文--嘉峪关黑蛋巢菌发酵培养及代谢产物的研究

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1、目录第一章前言1第一节嘉峪关黑蛋巢菌的研究概况1第二节分离纯化技术21.2.1硅胶柱层析21.2.2凝胶柱层析21.2.3反相柱层析31.2.4薄层色谱(TLC)3第三节结构研究主要技术31.3.1质谱31.3.2核磁共振波谱41.3.3紫外可见吸收光谱41.3.4红外光谱4第四节研究背景、目的和意义、方法和路线41.4.1选题背景41.4.2研究目的和意义51.4.3研究路线和方法5第二章嘉峪关黑蛋巢菌的活化及液体发酵培养6第一节菌种的活化62.1.1实验仪器与实验试剂材料62.1.2菌种的活化

2、6第二节嘉峪关黑蛋巢菌的扩大培养62.2.1实验试剂、材料和实验仪器62.2.2培养基配置62.2.3扩大培养6第三节嘉峪关黑蛋巢菌的发酵培养72.3.1实验试剂、仪器72.3.2培养基的配置72.3.3灭菌72.3.4接种72.3.5静置发酵8第三章嘉峪关黑蛋巢菌有效成分的提取分离9第一节实验材料、试剂、仪器93.1.1实验材料93.1.2实验试剂93.1.3实验器材9第二节嘉峪关黑蛋巢菌化学成分的提取93.2.1过滤93.2.2发酵液提取93.2.3菌丝体提取103.2.4蒸发浓缩103.2.

3、5萃取103.2.6二次旋蒸10第三节嘉峪关黑蛋巢菌有效成分的分离纯化103.3.1实验材料、试剂及仪器103.3.2乙酸乙酯部分的分离纯化11第四章结构鉴定154.1实验材料、仪器154.2结构鉴定结果15第五章实验结论17致谢18参考文献19摘要黑蛋巢菌是鸟巢菌中最大的一个种,它们通常生长在腐烂的木材或木材碎片上,或者牛粪和马粪里,在世界各地都能发现。在甘肃发现了一种新的黑蛋巢菌名为嘉峪关黑蛋巢菌,本实验对嘉峪关黑蛋巢菌的次生代谢产物进行的研究。以天然产物化学作为研究基础,主要使用微生物的发酵

4、技术、分离纯化技术和结构分析鉴定技术对嘉峪关黑蛋巢菌的次生代谢产物进行研究。将活化扩大培养后的嘉峪关黑蛋巢菌菌丝体用燕麦培养基进行大规模培养,培养得到足够的菌丝体和菌液,利用大孔吸附树脂柱对菌液中的有效成分进行提取,收集到的有效成分再利用硅胶柱、凝胶柱、反相柱进行分离纯化,并利用薄层层析技术检测分离效果。分离得到的纯化合物利用质谱、核磁等设备进行结构鉴定,可以根据打出的谱图确定化合物结构,然后利用scifinder画出化合物结构找到其名称,最后从嘉峪关黑蛋巢菌中分离出一种物质,物质的名称是Ergo

5、sta-5,8(14),22-trien-7-one,3-hydroxy-(3β,22E)。关键词:嘉峪关黑蛋巢菌;代谢产物;发酵培养;结构鉴定IIABSTRACTCyathusarethelargestspeciesofbird'snest,whichareusuallygrownonrottingwood,woodfragments,cowdungorhorsemanure.AllovertheworldcanfoundCyathus.InGansu,anewtypeofCyathuswasf

6、ound,namedJiayuguanCyathus.StudyonmetabolitesofJiayuguanCyathus.Basedontheresearchofnaturalproductchemistry,thesecondarymetabolitesofJiayuguanCyathuswerestudiedbyusingmicrobialfermentationtechnology,separationandpurificationtechnology,structuralanalys

7、isandidentificationtechnology.ThemyceliumofJiayuguanCyathuswasculturedandculturedinoatmedium.Themyceliaandfunguswereculturedandtheactiveingredientsinthefunguswereextractedbymacroporousadsorptionresincolumn.Theactiveingredientswerecollectedandpurifiedb

8、ysilicagelcolumn,gelcolumnandreversephasecolumn,andtheseparationeffectwasdetectedbythinlayerchromatography.Thepurecompoundscanbeidentifiedbymassspectrometry,NMRandotherdevices.Thestructureofthecompoundscanbedeterminedaccordingtothespectra.Fina

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