小檗碱对人大网膜前脂肪细胞增殖与分化的影响

《小檗碱对人大网膜前脂肪细胞增殖与分化的影响》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。

1、山西医科大学硕士学位论文小檗碱对人大网膜前脂肪细胞增殖与分化的影响姓名：阴津华申请学位级别：硕士专业：内分泌与代谢病学指导教师：杨静;董进20050526小檗碱对人大网膜前脂肪细胞增殖与分化的影响摘要目的：1、原代培养人大网膜前脂肪细胞并进行鉴定。2、观察离体状态下人大网膜前脂肪细胞增殖和分化的过程。3、研究小檗碱对人大网膜前脂肪细胞增殖与分化的影响。方法：1、原代分离培养人大网膜前脂肪细胞t选择择期开腹手术病人，无全身代谢及内分泌疾病，无服用干预糖及脂肪代谢的药物史。年龄小于50岁，体重指数小于25。取无菌条件下新鲜切除的人大网膜脂肪组织，剔除肉眼可见的结缔组织与血管

2、，充分剪碎的脂肪组织用I型胶原酶消化。消化后的絮状液筛网过滤，滤液离心后弃上清，加入基础培养基制成细胞悬液，细胞计数接种。2、原代培养的人前脂肪细胞增殖过程的观察：101／cm2接种原代人前脂肪细胞。DMEM—FIe．培养液+10％小牛血清+lO万IU／ml青链霉素溶液配制人前脂肪细胞基础培养液。用MTT法观察其生艮状况和增殖过程，绘制出生长曲线。3、原代培养的人前脂肪细胞分化过程的观察：101／cm2接种原代人前脂肪细胞。DMEM—F12+5％小牛血清+10万Iu／m1青链霉素溶液+胰岛素0．5uM+地塞米松0．2uM+IBMXO．5mM+甲状腺素0．2riM配制人前

3、脂肪细胞分化培养液。观察前脂肪细胞分化过程中的形态学改变，并用油红0染色抽提法测定细胞内脂肪含量，绘制油红0的时间一OD值曲线，并对未分化的细胞和被油红0染成红色的细胞照相。4、小檗碱对人前脂肪细胞增殖和分化的影响：小檗碱分．另,J／Jn入基础和分化培养基配制成0．11．1mol／1、lIJ．mol／1、10umol／1三个不同浓度的干预液。分别在其增殖与分化的两个阶段，观察不同时问段小檗碱对细胞增殖分化的影响。以四甲基偶氮唑盐(MTT)方法检测人前脂肪细胞增殖的变化，以油红0染色检测人前脂肪细胞分化的变化。5、统计学处理：结果用i±s描述，采用SAS8．2软件和SPS

4、Sl1．5软件处理相关数据。P

5、应有其特点，小檗碱可能具有潜在的减肥、降脂作用。本研究加深了对小檗碱在体的降血糖及改善胰岛素抵抗机制的理解，最终为提高临床应用小檗碱治疗肥胖2型DM患者及增加胰岛素敏感性的疗效提供线索。关键词：小檗碱，前脂肪细胞，细胞分化，细胞增殖Il西医科大学顿士学位论文EffectsofberberineonhumanomentalpreadipocytesproliferationanddifferentiationAbstractObjective：Toculturehumanomentalpreadipocytesprimarilyandinvestigatetheproli

6、ferationanddifferentiationprocessesinvitroforbetterunderstandingthepropertiesofhyperplasiaandhypertrophyofhumanadiposetissues．Tostudytheeffectsofberberineonhumanomentalprcadipocytesproliferationanddifferentiation．Methods：1、Cellcultureofhumanpreadipocytes．Omentaladiposetissuebiopsieswereo

7、btainedfrompatientsundergoingelectiveopen-abdominalsurgery．Noneofthepatientshaddiabetesorseveresystemicillnessorhadanyrecentweightchange．Nonewastakingmedicationsknowntoaffectadiposetissuemassormetabolism．Ageofpatientswasbelow50，andbodymassindexwasbelow25．Adipocytetissuewa