农杆菌介导转基因植物T-DNA的整合方式

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1、HEREDITAS(Beijing)2011年12月,33(12):1327―1334ISSN0253-9772www.chinagene.cn综述DOI:10.3724/SP.J.1005.2011.01327农杆菌介导转基因植物T-DNA的整合方式杨琳,付凤玲,李晚忱四川农业大学玉米所,成都611130摘要:农杆菌介导的遗传转化已被广泛应用于植物转基因研究。作为外源基因的载体,农杆菌T-DNA片段在植物基因组中的整合方式,不仅影响外源基因的整合效率及稳定性,还会影响外源基因的表达特性。文章就农杆菌介导的T-DNA整合的两种主要模式、规律及相关研究手段进行综述,为农杆菌介导的转基因及T-DN

2、A插入突变等相关研究提供借鉴。关键词:农杆菌;T-DNA;侧翼序列;整合;转基因T-DNAintegrationpatternsintransgenicplantsmediatedbyAgrobacteriumtumefaciensYANGLin,FUFeng-Ling,LIWan-ChenMaizeResearchInstitute,SichuanAgriculturalUniversity,Chengdu611130,ChinaAbstract:ThegenetictransformationmediatedbyAgrobacteriumtumefacienshasbeenwidelyap

3、pliedtoresearchoftransgenicplants.Asthevectoroftheexoticgenes,theintegrationpatternsofT-DNAfragmentsaffectsnotonlytransfor-mationefficiencyandstability,butalsoexpressionpropertiesofthetransgenes.Thisreviewsummariesthetwomajorpat-ternsandtherulesofT-DNAintegrationinAgrobacterim-mediatedtransformation

4、,rulesofT-DNAmediatedbyAgrobac-teriumtumefaciens,aswellasresearchtoolsforflankingsequenceamplification.ItisattemptedtoprovidereferencesforresearchesontransformationandT-DNAintegrationmutationmediatedbyAgrobacteriumtumefaciens.Keywords:Agrobacteriumtumefaciens;transferDNA;flankingsequence;integration

5、;transgene目前有关植物转基因的方法主要分为两大类,有基因组DNA和质粒DNA,依农杆菌的不同,质粒一类是无转化载体引导的DNA的直接转化,另一类分别有Ti质粒和Ri质粒,其上都有一段T-DNA。农杆是农杆菌介导的转化,其中后者由于操作简单、转菌细胞侵染植物伤口后,可将T-DNA插入到植化效率高、插入片段稳定性好、转基因拷贝数低而物基因组中,从而实现外源基因向植物细胞的转[1,2]成为转基因策略中的首选方法。农杆菌细胞中含移与整合,最后通过植物细胞和植物组织培养可收稿日期:2011−03−30;修回日期:2011−07−25基金项目:国家科技重大专项(编号:2009CB118400)和

6、国家自然科学基金项目(编号:30971795,31071433)资助作者简介:杨琳,硕士研究生,专业方向:生化与分子生物学。E-mail:myyanglin1986@21cn.com通讯作者:李晚忱,博士,教授,研究方向:玉米遗传育种与生物技术。E-mail:aumdyms@sicau.edu.cn网络出版时间:2011-10-188:50:47URL:http://www.cnki.net/kcms/detail/11.1913.R.20111018.0850.002.html1328HEREDITAS(Beijing)2011第33卷[2~4]再生出转基因植株。T-DNA通过异常重组实现口

7、修复模型”(Single-strandedgaprepair,SSGR)和“双整合进入植物基因组中,它常伴随宿主细胞基因链断裂修复模型”(Double-strandedbreakingrepair,[5]组重排。这种基因组的重排包括植物基因组整合DSBR)。位点的删除和重复,T-DNA序列的删除和重复,以在“SSGR模型”中(图1),单链T-DNA的3′端有[4~7]及染色体上的易位和倒位。染色体

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