柑橘类病毒CVd-Ⅲ的检测及鉴定

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1、植物病理学报ACTAPHYTOPATHOLOGICASINICA39(2)：207-211(2009)柑橘类病毒CVd一Ⅲ的检测及鉴定马先锋，李芳，-，胡春华。，韩健，戴素明，曾柏全，邓子牛(湖南农业大学园艺园林学院，长沙410128；。国家柑橘改良中心长沙分中心，长沙410128；。广东农业科学院果树研究所，广州510640；湖南农业科学院园艺研究所，长沙410125；中南林业科技大学生命科学院，长沙410004)Detectionandldentificationofcitrusviroid一111MAXian．feng，LIFang，HUChun-hua3，HA

2、NJian，DAISu．ming’，ZENGBai-quan，DENGZi—niu’(HorticultureandLandscapeCollege，HunanAg—riculturalUniversity，Changsha410128，China；。NationalCenterforCitrusImprovement—Changsha，Changsha410128，China；。InstituteofFruitTreeResearch，GuangdongAcademyofAgriculturalScience，Guangzhou510640，China；Instit

3、uteofHorti-cultureHunanAcademyofAgriculturalScience，Changsha410125，China；CoUegeofLifeScience，CentralSouthForestryUniversity，Changsha410004，China)Abstract：TotalRNAwasisolatedfromphloemofyoungshootsandretro-transcfiptedtocDNAbyRT-PCR(ReverseTranscriptasePolymeraseChainReaction)withspecifi

4、cprimerpairofCVd—HI(citrusviroid—HI)，theresultsofmoleculardetectionindicatedthattheCVd一111specificbands，about300bp，weredetectedin27ofthe49samplescollectedfromdiferentcountiesinHunanProvinceandlsamplepresentedbyCataniaUni-versity．AlltheamplifiedcDNAfragmentswereclonedandsequences，sequenc

5、eanalysiscomparedwiththereportedCVd·111sequencesinGenBankshowedthat：sequencesof21sampleswerethesameandcompletelyidenticalwithCVd-llIb(AF184147)；however，thesequencesoftheother6samplesandpresentedsamplewerediversifiedfromtl1ereportedCVd一11IsequencesinGenBank．Keywords：citrus；viroid；CVd—I!I

6、；RT—PCR；sequenceanalysis文章编号：0412-0914(2009)02-0207-05类病毒是迄今为止已知的能引起植物病害的橘类病毒CVd—IV(CitrusviriodIV)和柑橘类病毒最小致病因子，为单链环状RNA，大小为246～475CVd—os(Citrusviriodos)。有的类病毒又可分为nt，不编码任何蛋白，但是，类病毒利用其特殊的结多个亚型，如柑橘类病毒CVd．111分为多个序列亚构能在寄主编码蛋白内自行复制H。1998年，型：CVd．IIIa、CVd一11Ib、CVd．11Ib(Australia)、CVd—Flores等报道

7、了20多种不同的类病毒类型，其nlC和CVd．11Id，它们的区别主要是中央保守区和中柑橘类病毒可分为6大类：柑橘裂皮病类病毒可变区的序列碱基差异，这些差异对指示植物矮化CEVd(Citrusexocortisviriod)，柑橘类病毒CVd—I及引起病害症状的影响尚不清楚。多数类病毒会(CitrusviriodI，又名Citrusbentleafviroid)，柑引起寄主植物病害，但有些类病毒，如CVd．III部分橘类病毒CVd．Ⅱ(Citrusviriod1I，又名Hopstunt亚型虽减少树势生长但不引起特殊的病害症viroid)，柑橘类病毒C