双平板法筛选溶栓因子产生菌及其鉴定

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1、生物工程粮油食品科技第21卷2013年第5期双平板法筛选溶栓因子产生菌及其鉴定111123夏宇,卢笑莹,杨益波,冯伟栋,宋茹,韦荣编(1.浙江海洋学院东海科学技术学院,浙江舟山316000;2.浙江海洋学院食品与医药学院,浙江舟山316000;3.浙江海洋学院海洋科学与技术学院,浙江舟山316000)摘要:采用酪蛋白平板初筛和纤维蛋白原平板复筛法从发酵食品中筛选出一株溶栓菌株SJ1206,菌落边缘为完整的圆形、表面隆起、呈乳白色,是一株革兰氏阳性细菌,可以产生芽胞。此外,生理生化反应结果表明该菌能利用麦芽糖和葡萄糖,精氨酸、赖氨酸、尿素和七叶苷反应均为阳性。16Sr

2、DNA序列比对分析结果表明该菌与苏云金芽胞杆菌有同源性,属于芽胞杆菌属。关键词:溶栓因子;筛选;芽胞杆菌中图分类号:Q93-331文献标识码:A文章编号:1007-7561(2013)05-0098-03Screeningofthrombolyticstrainsbydouble-platemethodandtheidentification111123XIAYu,LUXiao-ying,YANGYi-bo,FENGWei-dong,SONGRu,WEIRong-bian(1.CollegeofDonghaiScienceandTechnology,Zhejiang

3、OceanUniversity,ZhoushanZhejiang316000;2.CollegeofFoodandPharmacy,ZhejiangOceanUniversity,ZhoushanZhejiang316000;3.CollegeofMarineScienceandTechnology,ZhejiangOceanUniversity,ZhoushanZhejiang316000)Abstract:AthrombolyticstrainSJ1206wasscreenedandidentifiedfromfermentedfoodbycaseinplate

4、screeningpreliminarilyandfibrinogenplaterescreeningsecondarily.Resultsshowedthecolonycharacter-isticsofthescreenedstrainwereroundwithintegrityborder,bulgedsurfaceandivory-whiteincolor.ThestrainwasclassedintoGrampositivestrainwithsporestructure.Inaddition,theresultsofphysiolog-icalandbi

5、ochemicalreactiondisplayedthatthestraincouldutilizemaltoseandglucose,andshowedpositivereactionswitharginine,lysine,ureaandesculin,respectively.Furthermore,theresultsof16SrDNAsequenceanalysisindicatedthatthestrainhadhomologywithBacillusthuringiensis.Therefore,thescreenedstrainshouldbelo

6、ngtobacillus.Keywords:thrombolyticfactor;screening;bacillus随着人们生活水平的提高、生活方式的改变,以不适合大批量筛选目标菌。只有采用价格低,且有及膳食中高脂肪、高蛋白的过量摄取和老龄化社会效的筛选模式才适合溶栓菌的大范围筛选和分离。的到来,血栓性疾病己超过癌症和糖尿病成为影响李宝库曾采用酪蛋白平板初筛和纤维蛋白原平板复[1]我国居民健康的第一大健康杀手。通过微生物筛法从220份试样中筛选得到两株高产纤溶酶产生发酵法制备的溶栓物质安全性高,且无毒副作用,早菌,然后进行发酵条件优化,进一步提高产物的溶栓[7]在

7、1987年日本学者Sumi就报道了从纳豆中提取纳活性。本研究采用酪蛋白初筛和改进的纤维蛋[2]豆激酶用于血栓疾病的辅助治疗及预防。之后白原平板复筛法分离溶栓因子产生菌,并对其进行人们从不同地区的发酵制品中又陆续发现了微生物分类和鉴定,旨在为日后溶栓因子大规模制备奠定源纤溶酶,而关于筛选溶栓因子产生菌的研究也日基础。[3-6]益受到重视。纤溶菌的筛选常规方法是采用纤1材料与方法维蛋白原平板或试管法,但是纤维蛋白原价格昂贵,1.1主要试剂收稿日期:2013-01-05纤维蛋白原(98mg/支)、凝血酶和尿激酶,购基金项目:浙江省大学生科技创新活动计划(新苗人才计划,

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