苦参碱在大鼠同种异体角膜移植手术中对CD4_+CD25_+调节性T细胞的影响

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1、分类号８５７．６单位代码：１０１８３：Ｓ研究生学号：２０１６８５４０１７密级：公开＿吉林大学硕士学位论文专业学位（）苦参碱在大鼠同种异体角膜移植手术中对ＣＤ４＋ＣＤ２５＋调节性Ｔ细胞的影响＋＋ＴｈｅｅｆｆｅｃｔｏｆｍａｔｒｉｎｅｏｎＣＤ４ＣＤ２５ｒｅｇｕｌａｔｏｒｙＴｃｅｌｌｓｏｒｎｃｏｒｎｅａｌａｌｌｏｇｒａｆｔｉｎｒａｔｓ作者姓名：汪飞类别：兽医硕士领域（方向）：临床兽医指导教师：谢光洪教授培养单位：动物医学学院２０１８年６月本研究由国家重点专项分题（3G017A15620

2、1）资助。Thestudywasfundedbythenationalkeysubitem(3G017A156201).苦参碱在大鼠同种异体角膜移植手术中对CD4+CD25+调节性T细胞的影响TheeffectofmatrineonCD4+CD25+regulatoryTcellsincornealallograftinrats作者姓名：汪飞领域（方向）：临床兽医指导教师：谢光洪教授类别：兽医硕士答辩日期：2018年6月4日未经本论文作者的书面授权，依法收存和保管本论文书面版本、电子版本的任何单位和个人，均不得对本论文的全部或部分内容进行任何形式的复制

3、、修改、发行、出租、改编等有碍作者著作权的商业性使用（但纯学术性使用不在此限）。否则，应承担侵权的法律责任。吉林大学硕士学位论文原创性声明？本人郑重声明．所呈交学位论文，是本人在指导教师的指导下，独立进行研宄工作所取得的成果。除文中己经注明引用的内容外，本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的作品成果。对本文的研宄做出重要贡献的个人和集体，均已在文中以明确方式标明。本人完全意识到本声明的法律结果由本人承担。学位论文作者签名：日期：年ｆ月ｙ日中文摘要苦参碱在大鼠同种异体角膜移植手术中对CD4+CD25+调节性T

4、细胞的影响在角膜移植手术中，受体能够识别进入其体内的“非己”器官并产生免疫排斥反应，移植后的排斥反应是造成角膜移植失败的主要原因。如今，对免疫排斥反应的研究已经成为角膜移植的一个重要方向。目前临床上常用的免疫抑制药物不仅价格昂贵而且毒性大，对机体有着不良反应。由豆科植物苦参的干燥根、植株、果实经有机溶剂提取制成的苦参碱对移植后的急性排斥反应在一定程度上具有免疫抑制的作用，同时苦参碱廉价易得而且毒副作用小，苦参碱的药用价值越来越得到大家的研究。本实验将通过苦参碱对大鼠角膜移植手术后的免疫排斥反应进行研究，探讨苦参碱作为免疫抑制剂作用对CD4+CD25+调节性T细

5、胞的作用机制。本实验以Wistar大鼠作为研究对象，并建立大鼠角膜移植模型，通过对移植后的大鼠给予不同浓度的MT来研究实验大鼠体内CD4+CD25+调节性T细胞的变化。将大鼠随机分为对照组与实验组，在大鼠角膜移植模型建立成功后，对照组腹腔注射生理盐水，实验组分别注射5mg/kgMT、10mg/kgMT、15mg/kgMT和10mg/kg的环孢素A，连续给药7天。根据角膜免疫排斥反应的评分标准，判断角膜移植后植片的生长情况。术后7天采集对照组和实验组大鼠的外周血和脾脏进行流式细胞仪检测。在术后的第7d收集对照组和实验组大鼠的外周血进行酶联免疫吸附试验(ELISA

6、)。对移植后的植片观察可以发现，实验组角膜植片的浑浊程度、水肿程度和新生血管指数比对照组都要低。流式细胞术检测结果中发现，在术后7天外周血和脾脏中实验组5mg/kgMT大鼠中的CD4+CD25+调节性T细胞的含量比对照组要高。同时通过对大鼠外周血的检测可以发现，实验组的IL-10和TGF-β1的水平比对照组要高。结果可以表明，在角膜移植模型建立后腹腔注射一定浓度的苦参碱能够提I高大鼠体内的CD4+CD25+调节性T细胞的含量，并提高体内IL-10和TGF-β1的含量。一定浓度的苦参碱能够抑制移植后机体的免疫排斥反应。关键词：穿透性角膜移植；CD4+CD25+调

7、节性T细胞；苦参碱；大鼠IIAbstractTheeffectofmatrineonCD4+CD25+regulatoryTcellsincornealallograftinratsIncornealtransplantation,thereceptorcanidentifythe"nonself"organsthatenterthebodyandproduceimmunerejection.Therejectionaftertransplantationisthemainreasonforthefailureofcornealtransplantation.

8、Nowadays,thestudyof