renca条件培养基转化的调节性t细胞对小鼠同种免疫的影响

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1、第31卷第2期中山大学学报(医学科学版)V01．31No．22010年3月JOURNALOFSUNYAT—SENUNIVERSITY(MEDICALSCIENCES)Mar．2010Renca条件培养基转化的调节性T细胞对小鼠同种免疫的影响滕立臣。，刘龙山，苏亚娟，袁小鹏，李军，付倩，陈思阳，，王长希(1．中山大学附属第一医院器官移植科，广东广州510080；2．南方医科大学附属南方医院检验系，广东广州510015：3．中山大学附属第一医院麻醉科．广东广州510080)摘要：【目的】探讨小鼠肾癌细胞株Renca来源的条件培养基能否诱导CD4CD25一T细胞转化为

2、具有免疫抑制效能的CD4CD25Foxp3T细胞。【方法】培养Renca提取上清获得条件培养基，将条件培养基与普通培养液按不同比例混合培养小鼠CD4CD25一T细胞7d，以流式细胞仪检测CD4+CD25T细胞和Foxp3细胞的比例；再次分选CD4+CD25+T细胞检测其抑制细胞增殖的能力，体内过继性输入观察对移植物存活时间、局部排斥反应和迟发性超敏反应的影响。【结果】与对照组相比，混合培养基显著增加培养体系中CD4+CD25+Foxp3+T细胞的比例(P<0．05)，在一定范围内(≤75％)呈比例依赖关系；随转化性CD4CD25T细胞比例增加效应T细胞增殖能力减

3、弱；体内输注显著延长移植物的存活时间(P<0．05)，达(29．6±1．4)d，组织学观察显示能明显抑制局部排斥反应。【结论】Renca条件培养基能诱导CD4+CD25一细胞转化为CD4CD25Foxp3T细胞，被转化细胞在体内和体外均能发挥免疫抑制作用。关键词：条件培养基；转化；调节性T细胞；免疫抑制中图分类号：R617文献标志码：A文章编号：1672—3554(2010)02．0242—07EfectofConvertedRegulatoryTCellswithlncaConditionedMediaonSuppressiveProfileofAllo-im

4、munityinMiceTENGLi-chen，LIULong—shan，SUYa-juan，YUANXiao—peng，LIJun，FUQian，CHENSi-yang．WANGChang—xi(1．TheOrganTransplantationDepartment，TheFirstAfiliatedHospital，SunYat—senUniversity，Guangzhou510080，China；2．DepartmentofLaboratoryMedicine，NanfangHospital，NanfangMedicalUniversity，Guangz

5、hou510015，China；3．DepartmentofAesthiology，TheFirstAffiliatedHospital，SunYat—senUniversity，Guangzhou510080，China)Abstract：【Objective】ThisstudywasdesignedtoinvestigatecapabilityoftheconditionedmediathatoriginatedfromRencacellstoconvertCD4CD25一TcellsintoCD4CD25Tcells，whichcanexertimmuno

6、suppressiveefectonefectorTcellsinvitroandinvivo．【Methods】Thecommonmediaweremixedwiththeconditionedmediaatdiferentratios，andfreshenrichedCD4CD25一TcellswithMACSwereculturedinmixedmediafor7days．Atend—pointofculture，thecellswerecollectedanddetectedphenotypesinfloweytometer．Moreover，wedet

7、ectedimmunosuppressiveefectofconvertedCD4CD25TcellsonefectorTcellsproliferationinone—waymixedlymphocytesreactionbyusingCCK一8，andweobservedsurvivaltimeandhistologyofgrafts．Thedelayedtypehypersensitivitywasdetermined14daysaftertransplantation．【Results】ThemixedmediacouldincreaseratioofC

8、D4CD25Foxp3T