同种异体脂肪组织提取液对大鼠创面愈合的影响

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1、同种异体脂肪组织提取液对大鼠创面愈合的影响　　［关键词］脂肪组织;组织提取物;皮肤损伤;伤口愈合　　［ABSTRACT］ObjectiveToexploretheeffectsofhomologousadiposetissueextractsonlydividedintothreegroups，namelyadiposetissueextracts-treatedgroup，PBScontrolgroup，andblankcontrolgroup.Full-thicknessadeonthebackoftherats（tentonceaday.es，asarkeresofinjur

2、iesintheextracts-treatedgroupisgreoreobviouslyintheextracts-treatedgroupthanthoseinthetologousadiposetissueextractscanacceleratevelocityandimprovethequalityofol/L磷酸盐缓冲液（PBS，pH7.2）进行10倍稀释，冰浴匀浆。在4℃条件下，以3000r/min的转速离心10min，吸取上清液，微孔滤膜过滤除菌，分装-20℃冻存。　　1.2制备全层皮肤缺损创面L/kg体质量。大鼠麻醉后，背部剃毛，用体积分数0.75的乙醇常规消毒

3、。用直径18mm的环钻在大鼠脊柱两侧各压出1个圆形印迹（2.54cm2），外科手术剪刀沿压痕剪去全层皮肤（达深筋膜），即每只大鼠背部各制成2个圆形全层皮肤缺损创面，止血备用。　　1.3实验动物分组将上述18只大鼠随机分成3组。脂肪组织提取液组:致伤后创面给予0.2mL同种异体脂肪组织提取液;基质对照组:致伤后创面给予灭菌的PBS0.2mL;空白对照组:致伤后创面不给予任何制剂。　　1.4给药方法将同种异体脂肪组织提取液和PBS分别吸入1mL无菌注射器内，每个创面滴注0.2mL，并涂布均匀。贴敷单层油纱布，然后用4层无菌纱布覆盖，胶布固定。大鼠均单笼喂养，自由进食饮水，同种异体脂肪组

4、织提取液和PBS分别每天给予1次，至伤后14d结束。　　　　1.5评价指标及方法①大体观察:直接观察大鼠创面大小、形状、肉芽组织生长、创缘新生表皮移行等情况。②创面面积:伤后0、3、7和14d用无菌透明载玻片覆盖创面，用记号笔沿创面边缘描绘出创面，再用平整厚度均匀的透明塑料膜复制并剪下该创面图样，以万分之一电子分析天平（德国，SartorusA120S）测定透明塑料膜图样的质量，并换算成相应创面的面积（首先测定透明塑料膜单位面积的质量，mg/cm2）［4］。③伤腔容积:伤后0、3和7d向伤腔内滴注无菌生理盐水，记录滴至伤腔液面与创缘皮肤平行时的液量（mL）［4］。④组织学检查:伤后

5、7、14d取各组创面组织，进行组织学检查。伤后7d注射致死剂量的速眠新处死大鼠9只，余者14d处死。切取整个创面，包括5mm无损伤的正常皮肤，切至筋膜，标本放入100g/L甲醛溶液中固定。固定后从创面中心部位切开，取其中一半常规脱水、透明、石蜡包埋、切片，行苏木精-伊红（H-E）染色。用光学显微镜观察创面肉芽组织生成和新生表皮生长情况。　　　　1.6统计学分析用SPSS11.0统计软件对数据进行统计学处理，创面面积和伤腔容积均以x±s表示，组间比较采用方差分析。　　　　2结果　　2.1大体观察伤后3d各组创面比致伤当天略有缩小，呈椭圆形。伤腔均稍微变浅，肉芽组织增生均不明显。脂肪组

6、织提取液组创面新鲜、易出血，创缘无新生表皮生长。两个对照组创面略显苍白、不易出血，也未见明显肉芽组织生长和新生表皮长出。伤后7d，各组创面明显缩小，呈不规则椭圆形。以脂肪组织提取液组创面缩小更为明显，肉芽组织明显增多，伤腔已被肉芽组织填平，少数创面肉芽组织略高于创面，创缘新生表皮生长较明显;两个对照组肉芽组织和表皮生长较少，部分创面仍存在一定伤腔。到伤后14d各组创面进一步缩小，脂肪组织提取液组创面多呈椭圆形，两个对照组多呈长条形。脂肪组织提取液组创面肉芽组织基本与创面持平，表皮继续增生逐渐覆盖整个创面，两个对照组则有部分残留创面未愈。　　表2伤后不同时间各组创面伤腔容积（略）　　

7、与空白对照组、基质对照组比较，F=8.67，*q=4.29、5.71，P<0.05　　2.4组织学检查切片经H-E染色后，镜下可见，伤后7d各组创面肉芽组织均有不同程度的生长和白细胞浸润，创缘有新生表皮生成。脂肪组织提取液组创面肉芽组织增加较多，毛细血管和成纤维细胞更明显，创缘新生表皮生长明显增多。基质对照组和空白对照组创面成纤维细胞和毛细血管较少，肉芽组织较薄，创缘仅有较少的新生表皮移行生长。伤后14d脂肪组织提取液组创面肉芽组织逐渐成熟，毛细血管减少，纤维细