超声耦合亚临界水提取螺旋藻活性多肽及降血糖活性研究

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1、７乂｜ＳｏｕｔｈＣｈｉｎａＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙ硕士学位论文超声耦合亚临界水提取螺旋藻活性多肽及降血糖活性研究作者姓名胡双飞学科专业制糖工程指导教师张学武教授一所在学院食品科学与工程论文提交日期２０１８年４月Utrasound-assistedsubcriticalwaterextractionofpeptidesfromSpirulinaplatensisandtheirhypoglycemicactivitiesADi

2、ssertationSubmittedfortheDegreeofMasterCandidate：HuShuangfeiSupervisor：Prof.ZhangXuewuSouthChinaUniversityofTechnologyGuangzhou,China分类号：TQ941学校代号：10561学号：201520120104华南理工大学硕士学位论文超声耦合亚临界水提取螺旋藻活性多肽及降血糖活性研究作者姓名：胡双飞指导教师姓名、职称：张学武教授申请学位级别：工学硕士学科专业名称：制糖工程研究方向：糖生物技

3、术与安全论文提交日期：2018年4月20日论文答辩日期：2018年月日学位授予单位：华南理工大学学位授予日期：2018年月日答辩委员会成员：主席：蔡俊鹏委员：张学武、魏东、陈谷、范晓丹华南理工大学学位论文原创性声明本人郑重声明：所呈交的论文是本人在导师的指导下独立进行研宄所取得的研宄成果。除了文中特别加以标注引用的内容外，本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写的成果作品。对本文的研宄做出重要贡献的个人和集体，均己在文中以明确方式标明。本人完全意识到本声明的法律后果由本人承担。一

4、＞沱年作者签名：日期：６月日７学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，艮研宄生在校攻读学位期间论文工作的知识产权单位属华南理工大学。学校有权保存并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许学位论文被查阅（除在保密期内的保密论文外）；学校可以公布学位论文的全部或部分内容，可以允许采用影印、缩印或其它复制手段保存、汇编学位论文一。本人电子文档的内容和纸质论文的内容相致。本学位论文属于：□保密，（校保密委员会审定为涉密学位时间：年月日

5、）＿＿＿于年日解密后适用本授权书。＿＿月＿＿０不保密，同意在校园网上发布，供校内师生和与学校有共享协议的单位浏览；同意将本人学位论文提交中国学术期刊（光盘版）电子杂志社全文出版和编入ＣＮＫＩ《中国知识资源总库》，传播学位论文的全部或部分内容。“”，（请在以上相应方框内打Ｖ）作者签名：日期：＇指导教师签名Ｊ７ＶＸ－Ａ日期：作者联系电话：２电子邮箱：Ｖ联系地址（含邮编摘要螺旋藻具有丰富的营养与药用价值，国内外对螺旋藻与螺旋藻蛋白的生物活性如抗氧化、抗菌

6、、抗肿瘤等进行了广泛的研究，本文对其多肽的降血糖活性进行了研究，进一步拓展了螺旋藻的应用价值。本文以螺旋藻粉为原料，采用超声耦合亚临界水法提取螺旋藻粗蛋白/多肽，与反复冻融和超声均质联用法获得的螺旋藻粗蛋白/多肽进行了对比。系统研究了温度、超声功率、压力、时间等因素对提取率的影响规律，并建立了响应面数学模型。通过测定不同提取温度下获得的螺旋藻粗蛋白/多肽的抗氧化与降血糖活性，筛选得到活性较好的组分，利用分析型HPLC对其分子量进行测定，通过制备型HPLC对其进行分离纯化，采用质谱技术得到多肽序列，结合Pepti

7、deRanker与pepATTRACT对获得的多肽进行生物活性的预测，筛选出综合排名前三的肽序列进行合成并验证其降血糖活性。本文的主要研究成果如下：1）对亚临界水提取设备中的提取釜结构进行改进，增加了原料与亚临界水的接触面积，蛋白/多肽提取率由10.30%显著提高至40.20%(p＜0.01)；四个因素对提取率的影响主次顺序为：温度>超声功率>提取时间>压力。建立的响应面数学模型，以提取率为响应值，以温度、超声功率、时间为因子，得出提取蛋白/多肽的最佳条件为：温度153℃，超声功率221W，提取时间64min，

8、压力10MPa，经验证实验得蛋白/多肽提取率为74.02%。而反复冻融与超声均质联用法蛋白/多肽质提取率为45.76%。由此可见，超声耦合亚临界水法更优。2）采用ABTS、DPPH、羟基自由基清除率法评价螺旋藻粗蛋白/多肽的抗氧化能力。结果表明：通过超声耦合亚临界水提取获得的螺旋藻蛋白/多肽在0~10mg/mL的实验剂量范围内均具有较强的抗氧化活性，且明显大于超声均质与反复冻融联用提取