高良姜提取物的降血糖活性.pdf

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1、第5卷第2期热带生物学报V01．5No．22014年6月JoURNALoFTRoPICALBIoL0GYJun．2014文章编号：1674—7054(2014)02—0179—03高良姜提取物的降血糖活性王辉，翟红莉，梅文莉，易博，蔡彩虹，曾艳波，董文化，戴好富(1．中国热带农业科学院热带生物技术研究所／农业部热带作物生物学与遗传资源利用重点实验室／海南省黎药资源天然产物研究与利用重点实验室，海南海El571101；2．中国人民解放军第一八七医院，海南海口571159)摘要：利用一葡萄糖苷酶抑制活性筛选对海南产高良姜的不同提取部

2、位及其主要化学成分进行降血糖活性测试。结果表明，高良姜的根茎、花、果实和茎叶的乙醇提取物及其主要成分高良姜素、山奈素、异鼠李素和槲皮素对一葡萄糖苷酶的抑制活性显著高于阳性对照药阿卡波糖。关键词：高良姜；提取物；降血糖活性；or一葡萄糖苷酶中图分类号：R285．5文献标志码：A高良姜(AlpiniaofficinarumHance)的干燥根茎是重要的南药，是卫生部1998年公布的既是食品又是药品的一种天然植物，是开发新型保健品和功能性食品的重要原料。据2010版《中国药典》记载，其功能主治为“温胃止呕，散寒止痛。用于脘腹冷痛，胃寒

3、呕吐，暖气吞酸J。由于高良姜的用途广泛J，近年来，在广东、广西和海南等地均有大面积种植，其中，广东徐闻的种植面积约4466hm，产品占全国90％以上。高良姜传统以其干燥根茎入药，在采收过程中，高良姜的花、果实和茎叶自然枯萎或作为废弃物被抛至田间地头，处理麻烦，而且容易将姜瘟等病害传播给下一茬高良姜。目前，从食品中寻找降血糖成分成为如今降糖产品开发的热点。为此，笔者建立了基于葡萄糖苷酶的降血糖模型，对高良姜及其废弃物进行活性筛选，旨在为解决高良姜的废弃物问题，同时，为高良姜型降血糖药物或保健食品的开发提供理论依据。1材料与方法1．

4、1植物材料高良姜不同部位样品于2013年7月采白海南省海口市高良姜种植基地，共计4个批次，样品编号依次为A～D(见表1)。样品材料由中国热带农业科学院热带生物技术研究所代正福副研究员鉴定为姜科山姜属良姜亚属高良姜(AlpiniaofficinarumHance)，凭证标本(HK201307Ge，HK201307Ha，HK201307Go和HK201307Ye)存放于中国热带农业科学院热带生物技术研究所。1．2药品和试剂药品：阿卡波糖(拜糖平，购买自拜耳医药公司，生产批号：BJ12559)，O／一葡萄糖苷酶(EC3．2．1．20，

5、东京TLC公司，批号为MG101)，对硝基苯一一葡萄糖苷(pNPG，购买自sigma公司)；试剂：磷酸钾、无水乙醇、二甲基亚砜、氯化钠(NaC1)和碳酸钠(NaCO)均为分析纯，国药集团化学试剂公司生产)；高良姜素、山奈素、异鼠李素和槲皮素对照品购买自中国药品生物制品检定所。收稿日期：2013—03—25基金项目：海南省重大科技专项(ZDZX2013008—4)；海南省中药现代化专项资金(2011ZY002，2012ZY008)作者简介：王辉(1981一)，女，博士，副研究员．E—mail：wanghui@itbb．org．ca

6、通信作者：戴好富(1974一)，男，博士，研究员．研究方向：天然产物化学．E-mail：daihaofu@itbb．org．on热带生物学报2014拄表1高良姜样品来源Tab．1SourcesofAlpiniaofficinarumsamples1．3实验方法1．3．1供试品的制备高良姜根茎、花、果实各取5g，粉碎后乙醇超声提取3次(每次20min)，将提取液离心去沉淀后，取上清液，50℃以下浓缩为浸膏，冷冻干燥，溶于甲醇，并稀释为不同质量浓度的溶液。精密称取高良姜素、山奈素、异鼠李素和槲皮素适量，溶于甲醇或DMSO，并稀释为不

7、同质量浓度的溶液。1．3．2建立测定体外一葡萄糖苷酶抑制活性体系本测试在紫外分光光度计上进行，反应体系参照贤景春等的方法并进行优化，优化后为：0．1mmo

8、·L的磷酸钾缓冲液(pH6．8)0．5mL，再加入10mg·L～一葡萄糖苷酶100L，0．5mL样品溶液，混匀，37℃恒温15min后，加入2．5mmol·L～pNPG0．5mL，混匀后37℃恒温15min，最后加入1mL0．2mol·L的NaCO溶液终止反应，于405nm波长下测OD值，重复3次，取平均值。以阿卡波糖为阳性对照，分别检测不同浓度的高良姜提取物及主要成分对OL

9、一葡萄糖苷酶的抑制活性，计算其，c。值。酶活性抑制率：二×100％，A空白式中，A空白：不加待测样品，只加入待测样品的溶剂，进行反应后的吸光值；A样品：加入待测样品反应后的吸光值；A背景：只加待测样品反应后的吸光值。2结果与讨论高良姜根茎、花、果实和地上茎叶4个