细胞因子对人早孕滋养层细胞与卵巢癌细胞系HO8910侵袭性影响的比较研究

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1、英文缩略词表英文缩写英文全称中文全称bpBSACD44vcDNA(：K7DABDM匝MdNTPEBE}CMEDTAEGFELISAFNGAPDHHepesILKAIlMMPmRNApfL^1PBSRNaseRT_PCRbasepair碱基对bovineseillinalbumin牛血清白蛋白splicingvariantofCD44complementarydeoxyribonucleicacideytokeratin7diaminobenzidineDulbeeco’smodifiedeagle’smed

2、iumdeoxyribonucleosidetriphosphateethidiumbromideextracellularmatrixethylenediaminetetra-aceticacidepidermalgrowthfactorenzyme—linkedimmunoadsordentassayfibroneefinglyceraldehydephosphatedehydrogenaseN-2-hydroxyethlpiperazine-N-2一etharessulfonicacidhaterle

3、ukinkangAilmatrixmetalloproteinasemessengerribonueleicacidhumanmetastasis-associatedprotein1pbosphasebuffersalineribonucleascl≈verscu-flJisc啦tionpolymerasechainreactionT111monecrosisfactorCD44拼接变异体互补脱氧核糖核酸细胞角蛋白7二氨基联苯胺杜氏改良培养基脱氧核糖核苷三磷酸溴乙锭细胞外基质乙二胺四乙酸表皮生长因子酶联免

4、疫吸附试验纤维结合素磷酸甘油醛脱氢酶N-2+羟乙基哌嗪-N，2．乙磺酸白介素肿瘤转移抑制基因基质金属蛋白酶信使核糖核酸肿瘤转移相关基因磷酸盐缓冲液核糖核酸酶逆转录聚合酶链反应肿瘤坏死因子Tristrishydroxymethyl-aminomethane三羟甲基氨基甲烷I细胞因子对人早孕滋养层细胞与卵巢癌细胞系HO-8910侵袭性影响的比较研究中文摘要目的在体外培养原代人早孕滋养层细胞及卵巢癌细胞系HO一8910细胞的基础上，观察4种外源性细胞因子对人早孕滋养层细胞及HO一8910细胞的效应，比较细胞因子对

5、两种细胞在基因表达水平、蛋白表达水平以及细胞水平侵袭能力的影响。方法早孕绒毛组织取自(6～8周)自愿人工流产的健康早孕妇女，由南方医院妇产科提供。采用绒毛组织贴块培养法进行原代早孕滋养层细胞的培养，并鉴定和纯化原代早孕滋养层细胞。培养卵巢癌细胞系HO．8910细胞。分别以EGF、TNF一Ⅱ、IL．1d、IL．10刺激培养细胞48小时，用RT-PCR检测各侵袭相关基因MMP一2、MMP．9、MTAl、KAllmRNA的表达，细胞ELISA法检测蛋白MMP一2和CD44v6的表达，利用Matrigel膜侵入培养

6、系统，采用染色和显微镜下细胞计数的方法，对穿透Matrigel膜的细胞进行定量分析，记录各项检测指标的数据，经统计学分析，比较两种细胞在体外侵袭性的异同。结果：1．体外观察到人早孕滋养层细胞表达MTAl和KAllmRNA，以及CD44v6。2．EGF促进两种细胞MMP．2、MMP一9mRNA的表达，并呈浓度依赖性；TNF—d显著提高两种细胞MMP一2mRNA的表达，仅对细胞系HO．8910细胞的MMP．9mRNA有促进作用，且随浓度的升高而减弱；IL—n、IL一10抑制滋养层细胞MMP．2mRNA的表达，促

7、进HO．8910细胞MMP．2、MMP．9mRNA的表达；除EGF促进滋养层细胞KAllmRNA的表达外，其余细胞因子抑制MTAl、KAllmRNA的表达。3．EGF、TNF一Ⅱ促进早孕滋养层细胞表达MMP一2及CD44v6，IL．1d、IL-10则抑制其表达；EGF促进HO．8910细胞表达MMP．2，IL一10抑制其表达MMP一2，EGF、TNF一Ⅱ、IL一1n增加该细胞系CD44v6表达。4．正常培养条件下，原代早孕滋养层细胞穿透Matrigel膜的细胞数显著多于卵巢癌细胞系HO-8910细胞。TNF

8、．Ⅱ对两种细胞穿透Matrigel膜数量的影响与浓度呈负相关。EGF促进HO一8910细胞对Matrigel膜的穿透，并呈浓度依赖性。结论：1．人早孕滋养层细胞表达MTAl和KAllmRNA以及CD44v6，提示它们可能与滋养层细胞的侵袭调节有关，进一步说明滋养层细胞的侵袭行为与肿瘤细胞的相似性。2．EGF、TNF．Ⅱ、IL—lⅡ、IL—10对人早孕滋养层细胞及卵巢癌细胞系HO一8910细胞的侵袭调控效应存在差异