rhepo对卵巢癌ho8910细胞表面tfr表达与细胞增殖的影响

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1、山西医科大学硕士学位论文rhEPo对卵巢癌Ho．8910细胞表面Tm表达及细胞增殖的影响摘要一、重组人促红细胞生成素(rhEPo)对卵巢癌HO．8910细胞表面转铁蛋白受体(T瓜)表达的影响目的：通过检测卵巢癌HO．8910细胞表面的与细胞增殖有关的TfR(CD71)在rhEPO干预前后的表达情况，来探讨rhEPO对肿瘤细胞增殖的影响，从而为临床应用rhEPO治疗肿瘤相关性贫血提供一定的实验依据。方法：HO一8910细胞在复苏后用RMPI．1640培养基加10％胎牛血清在37℃，5％C02环境下常规培养，稳定传代2

2、d后备用。随机取6瓶瓶底壁长满细胞的培养瓶，分别加入含有浓度为50、100、200U／mL的rhEPO的培养基继续培养，作为实验组；同时以2瓶没有加rhEPO的HO．8910细胞作为对照组。分别于48h和72h，收集各瓶细胞，用RT-PCR法检测经不同浓度的rhEPO处理后的和未经rhEPO处理的HO．8910细胞表面的T侬mRNA表达情况。结果：1)两处理因素(dlEPO和时间)的主效应均有统计学意义(P

3、mL组TtRmRNA表达水平较对照组明显降低(O．8784-0．016VS1．1284-0．017，P<0．01)，100U／mL组较对照组也降低(O．9544-0．047VS1．1284-0．017，P<0．01)，200U／钮L组较对照组略降低(1．029士0．041VS1．128士0．017，P<0．01)，不同浓度的各实验组之间没有统计学差异；72h时，50U／mL组TfRmR．NA表达水平较对照组明显降低(1．443-b0．047VS2．1274-0．034，P<0．01)，100I胁I，组较对照组也明显

4、降低(1．446士0．034VS2．1274-0．034，P<0．01)，200I7／mI，组较对照组同样明显降低(1．4304-0．016vs2．1274-0．034，P<0．01)，不同浓度的各实验组之间的差异没有统计学意义。不同作用时间段比较：同一浓度的rhEPO作用72h后，TfRmRNA的表达较48h时有所升高。结论i卵巢癌HO．8910细胞表面有T依的表达，并且经高浓度的rhEPO处理48h和72h后，TfR的表达均较对照组有所减少，但同一时间点各实验组之间的差异没有统计学意义。这一结论提示了rhEPO

5、不仅不会促进卵巢癌HO．8910细胞的生长，反而通过减少TfR的表达直接或间接抑制了卵巢癌HO．8910细胞的生长、增殖。山西医科大学硕士学位论文二、rhEPO对卵巢癌Ho．8910细胞周期的影响目的：通过检测rhEPO干预前后卵巢癌HO．8910细胞的细胞周期情况，来探讨rhEPO对肿瘤细胞增殖的影响，评价其在肿瘤相关性贫血中的治疗价值。方法：仍以HO．8910细胞作为研究对象，常规培养、稳定传代2d后随机取6瓶瓶底壁长满细胞的培养瓶，加入含有浓度分别为50、100、200U／mL的rhEPO的培养基继续培养，作

6、为实验组。同时以2瓶没有加rhEPO的HO．8910细胞作为对照组。分别于48h和72h后，用离心沉淀法收集各培养瓶中的细胞，按照流式细胞仪检测细胞周期专用试剂盒的操作说明，送流式细胞仪进行细胞周期的测定。结果；1)两处理因素(rhEPO和时间)的主效应均有统计学意义(P<0．01)，二者之间存在交互作用(P<0．01)。2)各组不同时间S期细胞百分率(％)：48h时，50U／mL组S期细胞百分率较对照组明显降低(28．21士0．09VS32．42士O．14，P<0．01)，100U／mL组较对照组也明显降低(28

7、．19-a：0．08VS32．42士0．14，P<0．01)，200U／mL组较对照组同样也降低(28．244-0．09VS32．42=t：0．14，P<0．01)，不同浓度的各实验组之间没有统计学意义；72h时，50U／mL组较对照组明显降低(31。58士0。09VS33．99-J：0．07，P<0．01)，100U／mL组较对照组也明显降低(31．65士0．07VS33．99士0．07，P<0．01)，200U／h止组较对照组同样明显降低(31．59士0．42VS33．99士0．07，P<0．01)，不同浓度的

8、各实验组之间的差异没有统计学意义。不同作用时间段比较：同一浓度的rhEPO作用72h后，S期细胞百分率较48h时有所升高。结论：卵巢癌HO．8910细胞经高浓度的rhEPO处理后，无论48h还是72h，各实验组的S期细胞百分率较对照组明显降低，但同一时间点各实验组之间的差异没有统计学意义。这进一步证实了rhEPO不仅不会促进卵巢癌HO．8910细胞的生长，反