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时间:2019-05-15
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1、上海交通大学硕士学位论文基于微生物固态发酵豆粕转化大豆异黄酮的研究硕士研究生:杨守凤学号:1111509059导师:徐建雄教授申请学位:农学硕士学科:畜牧学所在单位:农业与生物学院答辩日期:2014年1月授予学位单位:上海交通大学万方数据万方数据DissertationSubmittedtoShanghaiJiaoTongUniversityfortheDegreeofMasterStudyofBiotransformationofSoybeanIsoflavoneBasedonMicrobialSolid-stateFermentationCa
2、ndidate:ShoufengYangStudentID:1111509059Supervisor:Prof.JianxiongXuAcademicDegreeAppliedfor:MasterofAgraringenieurSpeciality:ZootechnyAffiliation:SchoolofAgricultureandBiologyDateofDefence:Jan,2014Degree-Conferring-Institution:ShanghaiJiaoTongUniversity万方数据万方数据万方数据万方数据万方数据万方数
3、据上海交通大学硕士学位论文基于微生物固态发酵豆粕转化大豆异黄酮的研究摘要本研究选用植物乳酸杆菌ATCC8014、EM菌和枯草芽孢杆菌ATCC6633作为发酵菌种对豆粕进行微生物固态厌氧发酵,检测发酵产品中糖苷型和苷元型大豆异黄酮含量,筛选出最优发酵菌种并优化发酵工艺参数。研究发酵工艺对发酵豆粕的抗氧化活性及饲料品质的影响,发酵产品同时具有了营养价值和保健性双重特性,这为发酵饲料的进一步生产和研发提供了理论支持。本文第一部分旨在确定最优发酵菌种。选用EM菌、植物乳酸杆菌和枯草芽孢杆菌,单菌种及不同比例混合三种菌种发酵豆粕饲料。结果显示:在6%接种量
4、、35%发酵水分、30℃恒温发酵7d后,三种微生物单独发酵后大豆异黄酮的活性比组合发酵高,其中枯草芽孢杆菌ATCC6633和EM菌单独发酵得到的大豆异黄酮活性最高,明显优于其它处理组,其苷元含量所占比例分别为52.13%和64.56%,且重复性、稳定性较好,干物质回收率较高。为了进一步从枯草芽孢杆菌ATCC6633和EM菌中筛选确定最优发酵菌种,用两种菌株分别单独及混合发酵豆粕。发酵产物经HPLC检测后可知,在4-40mg/L的浓度范围,染料木素、染料木苷、大豆苷元和大豆苷有良好的线性关系,采用EM菌种发酵7d后苷元转化效第I页万方数据上海交通大
5、学硕士学位论文率最高,苷元含量在大豆异黄酮总量中比率可达54.18%。因此,选用EM菌为最终发酵菌种。第二部分通过正交设计试验,选用EM菌种为固态发酵菌种,优化发酵工艺参数。选用豆粕粉碎粒度(目)、发酵温度(℃),接种量(%),5水分含量(%)和培养时间(day)作为处理因子,建立L16(4)正交试验,最终确定了EM菌发酵豆粕的最佳工艺参数。结果表明,在发酵温度40℃,35%的水分含量,7%的接种量,培养12d和豆粕粉碎粒度40目时,大豆异黄酮的苷元转化率最高,苷元含量在大豆异黄酮总量中的比率达85.30%。第三部分研究发酵工艺参数对发酵豆粕饲用
6、品质的影响。在第二部分研究的基础上,检测大豆异黄酮转化率较高的处理组的微生物总数、乳酸菌、乳酸含量、抗氧化活性、蛋白含量和pH值等。结果表明,经EM菌发酵后,豆粕中乳酸含量为8.62±0.57g/kg、蛋白质含量为45.54±3.98%、DPPH清除能力为76.13±2.37%,相对于未发酵豆粕均有较大地提高,说明采用本实验方法,不仅可以提高大豆异黄酮的活性,还可以保证饲料的其他优良品质。研究证明,高活性异黄酮发酵豆粕同时具备了营养价值和保健性双重特质,且发酵所需设备技术简单、能耗低、原料无需灭菌、生产过程无废水和残渣残留,为饲料的高效利用和安全
7、优质畜产品生产提供了方法,具有良好的市场发展前景。第II页万方数据上海交通大学硕士学位论文关键词:EM菌;大豆异黄酮;转化率;豆粕;饲料品质第III页万方数据上海交通大学硕士学位论文第IV页万方数据上海交通大学硕士学位论文StudyofBiotransformationofSoybeanIsoflavoneBasedonMicrobialSolid-stateFermentationABSTRACTInthisstudy,BacillussubtilisATCC6633,EMstrains,andLactobacillusplanetariumA
8、TCC8014wasemployedtoscreentheoptimalstrainsforthetransformationofthe
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