枯草芽孢杆菌固态发酵豆粕工艺研究-论文.pdf

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1、科技动态枯草芽孢杆菌固态发酵豆粕工艺研究许云贺苏玉虹田玉民张莉力辽宁医学院摘要研究对枯草芽孢杆菌XZ35固态发酵豆粕工艺进行优化，单因素试验和正交试验结果表明，各因素对蛋白水解影响的主次顺序为发酵时间>发酵温度>料水比。在实验室阶段的最佳发酵条件为采用粒度为2．0mm的原料豆粕，添加2％的小麦麸作为碳源，料水比1：0．8，接种量为1O％，发酵温度40℃，发酵时间3d。在该最佳工艺条件下发酵的产品指标检测结果为在原料豆粕粗蛋白含量为45．84％及水分为8．8％时，发酵后粗蛋白含量为57．34％，水分为6．8％，肽含量为

2、22．3％。关键词发酵豆粕枯草芽孢杆菌发酵条件中图分类号：S816．6文献标志码：B文章编号：1002—2813(2013)02—0085—03豆粕中存在多种抗营养因子，大部分抗营养因NaOH调pH至8(7—9)，4000r／rain离心5min，子耐热性差，加热可以除去，但是大豆抗原蛋白是留取上清液，然后用盐酸调pH至4．5(4．5—一种热稳定性好的抗营养因子，其过敏反应可以引4．8)，弃去上清，留取沉淀，调pH至7．2～7．4，起仔猪腹泻。目前微生物发酵法是去除这种抗营养加葡萄糖2．5、NaC10．2和牛肉膏3g

3、，加H0定容因子的主要方法之一。至l000mL，115cC灭菌20rain。研究以能够降解大豆抗原蛋白的菌株枯草芽孢豆粕固态培养基的制备：豆粕在粉碎机中粉碎杆菌XZ35发酵豆粕，对枯草芽孢杆菌XZ35固态发1rain，用筛子筛选出2．0～3．2mITl的豆粕，加入酵豆粕工艺进行了优化，通过单因素试验和正交试1％碳源和不同料水比的自来水，pH自然，分装至验确定对蛋白水解影响的主次因素，并研究该菌株300mL罐头瓶中。固态发酵豆粕的最佳工艺。1．2方法1材料与方法1．2．1枯草芽孢杆菌的活化及种子培养液的制备1．1试验材

4、料将斜面保藏的枯草芽孢杆菌XZ35接种至10mL1．1．1菌种的豆粕种子培养液中，37℃培养24h，将其按8％枯草芽孢杆菌XZ35由辽宁医学院食品微生物接种量接人装有100mL种子培养液的三角瓶中，实验室自行筛选获得。37℃培养24h。1．1．2豆粕1．2．2单因素试验优化发酵条件购自锦州某饲料厂的普通大豆预榨浸出粕。发酵时间与温度优化：将种子培养液按照10％1．1．3培养基接种量接入含有1％葡萄糖及料水比1：1的豆粕固豆粕种子液体培养基：豆粕在粉碎机中粉碎态培养基中，分别在30、40和50℃3个温度水平1min，过

5、60目筛，然后称取30g豆粕粉以料水比下发酵1、2、3和4d，发酵结束后，60℃摊开烘1：10进行混合，在组织捣碎机中捣碎5min，用干24h，然后测定发酵豆粕的水解度。豆粕固态培养基中碳源与料水比的优化：分别在豆粕培养基中添加葡萄糖、玉米面和小麦麸作为收稿日期：2012—11一O8基金项目：辽宁医学院校企合作横向课题豆粕培养基的碳源，培养基的料水比分别为1：l、通信作者：苏玉虹1：0．8和1：0．6，然后将种子培养液按照10％接种饲料研究1-'7-~EI)RES~；AR(?HNO03，20l385科技动态量接入豆粕

6、固态培养基中，37℃下发酵2d，发酵在50℃下发酵效果普遍不好，所以发酵温度应在结束后，6O℃摊开烘干24h，然后测定发酵豆粕的30～5OcC，而且在此温度范围内，发酵第2天其水水解度。解度就可超过20％，综合发酵生产实践(发酵时接种量的优化：将种子培养液分别按照10％、间过长失重率增加)其发酵时间应在1～3d。2O％和30％接种量接入含有1％葡萄糖及料水比表2发酵时间与温度对蛋白水解度的影响为1：1的豆粕固态培养基中，37℃下发酵2d，发酵结束后，60cC摊开烘干24h，然后测定发酵豆粕的水解度。1．2．3正交试验

7、优化发酵条件根据单因素试验结果，选择发酵时间、温度和料水比3个因素，每因素设3个水平进行正交试验，采用L(3)正交表设计试验，见表1。表1L(3)正交试验2．2碳源与料水比对蛋白水解度的影响分别在豆粕培养基中添加葡萄糖、玉米面和小1．2．4大豆蛋白水解度的具体测定方法麦麸作为豆粕培养基的碳源，在37℃下发酵48h，甲醛法，即用0．1mol／L的NaOH溶液滴定水测定发酵豆粕的水解度。从表3可见：在料水比为解液到pH为8．2，加入10mL37％的甲醛溶液，1：1的情况下添加的碳源以葡萄糖效果最好，水解再用0．1mol／

8、L的NaOH滴定到pH为8．2。记录加度为22．98％，其次为小麦麸，水解度为21．56％；入甲醛后把溶液滴定到pH为8．2所耗碱量。同时在料水比为1：0．8的条件下，碳源也是以小麦麸效用蒸馏水代替样品水解液重复上述步骤，作为空白果最好，其次为葡萄糖，所以选择以小麦麸作为碳对照。源，该条件下料水比为1：0．8为最好，水解度为水解度=(样品的耗碱