鹅细小病毒中国分离株HG582的回顾性研究

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1、新疆农业大学硕士学位论文鹅细小病毒中国分离株HG5/82的回顾性研究姓名：李桂霞申请学位级别：硕士专业：预防兽医学指导教师：孔宪刚;冉多良20040501摘要小鹅瘟GoslingPlagueGPa是由细小病毒科细小病毒属中的鹅细小病毒GooseParvovirusGPV引起的一种烈性传染病主要发生于1月龄内雏鹅和雏番鸭以急性肠炎及肝肾心等实质脏器炎症为特征该病病程短传染性强死亡率高在欧洲亚洲等许多国家相继都有发生给水禽养殖造成了巨大的经济损失本实验旨在研究1982年一株鹅细小病毒流行株基因的分子生物学特征并与国内外分离株相应基因进行分析比较为进一步研究1982年流行株HG5/82

2、和国内外流行株间的基因遗传变化规律GPV的基因功能及病毒分子致病机理提供了一定的分子基础1用鹅胚分离到鹅细小病毒测定了第五代病毒尿囊液HG5/82对12日龄鹅-5.92胚的ELD50为10/0.1ml雏鹅接种试验表明该病毒对12日龄雏鹅的致病性较弱用套式PCR检测雏鹅肛拭子病毒的体外排放情况发现三个试验组在接种病毒后120天均可检测到病毒PCR产物序列与GPV参考毒株B的相应序列同源性达93.6%2提取病毒DNA根据国外已发表的GPV基因序列设计并合成引物用聚合酶链式反应技术扩增得到GPV中国分离株HG5/82的非结构基因与结构基因片段大小分别约为1.9kb2.2kb的片段将该片

3、段分别进行克隆及序列测定并与GPV国内外部分已发表的毒株及番鸭细小病毒的对应序列比较结果表明我国地方分离株与国内外鹅细小病毒相比NS基因和VP基因均表现出较高的同源性并且具有共同的分子特征结构基因VP3间变异较小这是目前GPV只有一个血清型的分子基础为基因工程苗的研制提供了可行性HG5/82与番鸭细小病毒FM株相应序列比较发现与细小病毒其它成员相比两者具有较近的亲源关系但这种同源性明显低于鹅细小病毒之间的同源性关键词鹅细小病毒分离鉴定生物学特性NS基因VP基因分子特征RetrospectivestudyofagooseparvovirusstainHG5/82whichwasis

4、olatedinChinaLiGui-xia(preventativeveterinary)SurpervisedbyKongXian-gang,RanDuo-liangandLiuSheng-wangprofessorsAbstractGooseparvovirus(GPV)infectionisahighlyfataldiseaseofgoslingsandMuscovyducklingsunder1monthold.ThecausativeagentofthediseasehasbeenclassifiedasamemberoftheParvovirusgenusofthe

5、Parvoviridae,gooseparvovirus.Thediseaseischaracterizedbyacuteenteritisandhighmortality.TheoutbreakofGPVhasbeenreportedinmanycountriesincludingEuropeandChina,whichresultheavyeconomiclosses.Thisstudyistoresearchthemolecularcharacteristicsofthevirusthatpopularin1982.Mean-while,theNSandVPgenewere

6、comparedwithotherstrains.Thisstudyoffersagoodbaseforfurtherinvestigationsthatincludinggenomefunction,mutationregulationofgenomeandpathogenyofthevirusetal.1.AfieldstrainofGPVwasisolatedsuccessfullyfromgooseembryosinthisstudy.WedetectedtheELD50ofthefifthpassagevirus(HG5/82)to12-day-oldgooseembr

7、yoswas10-5.92/0.1ml.NotypicalclinicalsignswereobservedafterinoculationofGPV-HG5/82strain.WedetectedtheGPVintheanalswaboftheinoculatedgoslingwithnested-PCRandsequencingtheproductofPCR.ThenucleotideidentityofthePCRproductbetweenHG5/82andGPVstra