四倍体泡桐诱导及其体外植株再生的研究

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1、河南农业大学学位论文独创性声明、使用授权及知识产权归属承诺书学位论学位文题目四倍体泡桐诱导及其体外植株再生的研究硕士级别学生学科导师姓名曹艳春森林培育范国强专业姓名学位论文否如需保密，解密时间年月日是否保密独创性声明本人呈交论文是在导师指导下进行的研究工作及取得研究成果，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包括为获得河南农业大学或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料，指导教师对此进行了审定。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中做了明确的说明，并表示了谢意。研究生签名：曹争磕谢导师签名：‘f缓，≮}侈日期：j一年胡Io

2、日日期艺旃名自／口日学位论文使用授权及知识产权归属承诺本人完全了解河南农业大学关于保存、使用学位论文的规定，即学生必须按照学校要求提交学位论文的印刷本和电子版本；学校有权保存提交论文的印刷本和电子版本，并提供目录检索和阅览服务，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。本人同意河南农业大学可以用不同方式在不同媒体上发表、传播学位论文的全部或部分内容。本人完全了解<河南农业大学知识产权保护办法》的有关规定，在毕业离开河南农业大学后，就在校期间从事的科研工作发表的所有论文，第一署名单位为河南农业大学，试验材料、原始数据、申报的专利等知识产权均归河南农业大学所有，否则，承担相

3、应的法律责任。注：保密学位论文在解密后适用于本授权书．研究生签名漕}碡导师签名粥学院领导签名：Et期：辨6J目loEt日期a—：律∥月／‘扫日期：年月日致谢本论文是在导师范国强教授悉心指导下完成的。从论文的选题、试验设计到论文的最后完成，都倾注了导师的大量心血。范老师精深博学的学识修养、求实严谨的科研精神、勤奋认真地工作态度，引导我踏上科学的探索之旅，培养我养成求真、严谨的工作习惯，将使我终身受益。三年来，导师在我学业上严格要求和悉心指导，生活上给予无微不至的关怀和照顾。值论文完成之际，谨向导师致以最诚挚的谢意!衷心感谢蒋建平、冯建灿、刘震、茹广欣等诸位老师三年来对我的帮助和教诲。

4、衷心感谢黎明老师，黎老师在试验过程中给予了我热情帮助和技术指导。感谢研究生处的各位老师。衷心感谢在试验、学习和生活中给予我诸多帮助的河南省林业科学研究院的翟晓巧副研究员，朋友赵振利，同学张胜、史俊华、李国勇、毕琼嫒、韩艳英、刘广武、陈晨，学弟胡文远、曾辉、祝宝玉、靳飞、刘国志、贾峰，学妹张变莉、魏真真，室友刘桂珍、和爱玲、田春丽、赵珂、杨宵。感谢在本科、研究生期间给予我的关心、帮助和支持的林学园艺学院的老师和各位同学。衷心感谢我的家人和朋友，他们的关心、支持、理解、鼓励、爱护和帮助是我战胜一切困难的精神支柱!最后，再次深深地感谢所有关心、支持和帮助我的领导、老师、同学和朋友们!曹艳

5、春2006年6月于郑州摘要泡桐是一种深受我国广大劳动人民喜爱的速生用材和绿化树种，但是，泡桐生产中一直存在丛枝病发生严重和低干大冠等问题。近年来，虽说科技工作者利用常规育种方法培育了多个泡桐新品种，但这些问题始终未得到解决。因此，必须开辟新的研究途径。本试验以毛泡橱、兰考泡桐和白花泡桐无菌苗为试验材料，利用秋水仙素结合组织培养方法诱导获得了三种泡桐的四倍体植株，并建立了三种四倍体泡桐体外再生体系，为培育泡桐新品种奠定了基础。通过大量的研究工作得到：(1)利用液体浸泡，固体培养和双层培养三种方法诱导获得毛泡桐、兰考泡桐和白花泡桐的四倍体植株，通过比较其诱导率，选出双层培养法是诱导四倍

6、体泡桐的最佳方法，叶片是诱导四倍体泡桐最适宜的外植体。(2)组合AIB3D3(秋水仙素5mg·L-l+处理72h+预培养12d)、组合A281D3(秋水仙素lOnag·L．1+处理24h+预培养12d)，组合A383D!(秋水仙素20mg·L-l+处理72h+预培养0d)和组合A383I)3(秋水仙素20mg·L．1+处理72h+预培养12d)为利用叶片诱导四倍体泡桐的最适宜组合。(3)细胞染色体鉴定表明，三种泡桐的变异植株根尖细胞染色体条数(211=4X=80)均为原各自二倍体(2n=2x=40)的2倍；利用流式细胞仪测定叶片单细胞DNA含量表明，变异植株叶片单细胞DNA含量为其

7、二倍体的2倍。(4)三种四倍体泡桐植株与对应的二倍体植株相比，叶片增大、增厚，叶色加深；叶片气孔器增大，气孔器密度减小；叶绿素含量增加，POD活性降低。(5)建立了四倍体毛泡桐、四倍体兰考泡桐和四倍体白花泡桐的体外植株再生体系。毛泡桐、兰考泡桐，白花泡桐的四倍体植株叶片愈伤组织诱导、芽诱导和根诱导的最适培养基分别为Ms+0．3nag·L‘1NAA+14nag·L“BA、MS+0．3nag·L‘1NAA+8nag·L—BA、MS+0．1mg·L‘1NAA+10nag·L