广藿香愈伤组织诱导和分化再生植株的研究

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1、广藿香愈伤组织诱导和分化再生植株的研究作者:林小桦,贺红,吴立蓉,张燕玲,刘星【摘要】  【目的】开展广藿香愈伤组织的诱导及分化再生植株的研究,建立高效的组织培养再生系统。【方法】以广藿香叶片、带节茎、不带节茎及根尖为材料进行离体培养,筛选影响愈伤组织诱导、增殖及分化的因素。【结果】6苄氨基嘌呤(BA)或N苯基N123噻二唑5脲(TDZ)与α萘乙酸(NAA)配合有利于愈伤组织的诱导,BA的适宜浓度为02~05mg/L;4种外植体中,带节茎及不带节茎较易诱导出愈伤组织。BA和NAA配合使用能较好地促进愈伤组织的增殖;培养30d的愈伤组织较60d的具有更强的增

2、殖和分化能力。BA有利于愈伤组织的分化;叶片诱导的愈伤组织分化能力较强。【结论】建立了高效的广藿香愈伤组织诱导及分化再生植株的离体再生体系。【关键词】广藿香/生长和发育;离体培养;愈伤组织Abstract:ObjectiveCallusinductionandplantletsregenerationofPogostemoncablin(Blanco)Benth.arestudiedtoestablishahighefficiencyregenerationsystemfortissueleafsegments,nodularstemsegments,stemsegmentsan

3、droottipsfromPogostemoncablin(Blanco)Benth.wereculturedinvitro.Thefactorswhichaffecttheinduction,multiplicationanddifferentiationofcalluswerestudied.ResultsBenzylaminopurine(BA)orthidiazuron(TDZ)combinedwithαnaphthylaceticacid(NAA)washelpfultoinducecallus.TheoptimalconcentrationsofBAwere02~0

4、5mg/L.Nodularstemsegmentsandstemsegmentswerethemostsuitableexplantsforcallusinduction.ThemediumcontainingBAandNAApromotedthemultiplicationofcallus.Themultiplicationrateanddifferentiationrateof0daycallusweremuchhigherthanthoseof0daycallus.BAwashelpfultoinducecallusdifferentiation.Thecallusfr

5、omleafsegmentsexertedahigherdifferentiationrate.ConclusionAhighefficiencyregenerationsystemofcallusinductionandplantregenerationfromPogostemoncablin(Blanco)beenestablished.Keywords:POGOSTEMONCABLIN(BLANCO)BENTH./growth&development;INVITROCULTURE;CALLUS广藿香[Pogostemoncablin(Blanco)Benth.]为唇形科刺

6、蕊草属植物,以干燥地上部分入药,其性辛、微温。具有芳香化湿,开胃止呕,发表解暑的功效[1]。广藿香为广东道地药材,“十大广药”之一,是多种著名中成药“藿香正气丸”、“藿胆丸”等以及现代中药制剂“抗病毒口服液”的主要原料。广藿香原产于菲律宾、马来西亚等国,最早自宋代引入我国,栽培历史悠久。广藿香生产中面临青枯病的危害,该病由青枯菌侵染所致,为典型的维管束病害[2~3]。在我国产区栽培的广藿香,罕见开花结实[4],长期以来,生产上采用扦插繁殖,病原体通过无性繁殖传递,且逐代积累,危害越来越严重,迫切需要进行抗病品种的选育。近年来,基因转移及人工诱变等改良药用植物农艺性状的技术,为广藿香

7、抗病育种提供了可能,而要开展相关的研究,首先要建立高效的组织培养再生系统。本文以广藿香多种外植体为材料,筛选影响广藿香愈伤组织诱导、增殖及分化的多种因素,以期建立高效的愈伤组织诱导及分化再生植株的离体再生系统,为遗传转化及人工诱变育种奠定基础,现报道如下。1材料和方法11材料试验材料采自广州中医药大学药圃,选择生长健壮、无病虫害的广藿香单株,取其顶芽、带节茎及叶片;经蒸馏水冲洗干净后,用体积分数为70%乙醇浸泡30s,转入1g/L的HgCl2溶液浸泡消毒10min,

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