广藿香愈伤组织诱导和分化再生植株的研究

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1、广藿香愈伤组织诱导和分化再生植株的研究作者：林小桦，贺红，吴立蓉，张燕玲，刘星【摘要】　　【目的】开展广藿香愈伤组织的诱导及分化再生植株的研究，建立高效的组织培养再生系统。【方法】以广藿香叶片、带节茎、不带节茎及根尖为材料进行离体培养，筛选影响愈伤组织诱导、增殖及分化的因素。【结果】6苄氨基嘌呤(BA)或N苯基N123噻二唑5脲(TDZ)与α萘乙酸(NAA)配合有利于愈伤组织的诱导，BA的适宜浓度为02～05mg/L；4种外植体中，带节茎及不带节茎较易诱导出愈伤组织。BA和NAA配合使用能较好地促进愈伤组织的增殖；培养30d的愈伤组织较60d的具有更强的增殖

2、和分化能力。BA有利于愈伤组织的分化；叶片诱导的愈伤组织分化能力较强。【结论】建立了高效的广藿香愈伤组织诱导及分化再生植株的离体再生体系。【关键词】广藿香/生长和发育；离体培养；愈伤组织　　Abstract:ObjectiveCallusinductionandplantletsregenerationofPogostemoncablin(Blanco)Benth.arestudiedtoestablishahighefficiencyregenerationsystemfortissueculture.MethodsTheleafsegments,nodularstemsegme

3、nts,stemsegmentsandroottipsfromPogostemoncablin(Blanco)Benth.ultiplicationanddifferentiationofcallusinopurine(BA)orthidiazuron(TDZ)binedalconcentrationsofBAg/L.Nodularstemsegmentsandstemsegmentsostsuitableexplantsforcallusinduction.ThemediumcontainingBAandNAApromotedthemultiplicationofcallus.Th

4、emultiplicationrateanddifferentiationrateof30daycallusuchhigherthanthoseof60daycallus.BAleafsegmentsexertedahigherdifferentiationrate.ConclusionAhighefficiencyregenerationsystemofcallusinductionandplantregenerationfromPogostemoncablin(Blanco)Benth.hasbeenestablished.　　Keyp;development;INVIT

5、ROCULTURE;CALLUS　　广藿香［Pogostemoncablin(Blanco)Benth.］为唇形科刺蕊草属植物，以干燥地上部分入药，其性辛、微温。具有芳香化湿，开胃止呕，发表解暑的功效［1］。广藿香为广东道地药材，“十大广药”之一，是多种著名中成药“藿香正气丸”、“藿胆丸”等以及现代中药制剂“抗病毒口服液”的主要原料。广藿香原产于菲律宾、马来西亚等国，最早自宋代引入我国，栽培历史悠久。广藿香生产中面临青枯病的危害，该病由青枯菌（RalstoniaSolanacearum）侵染所致，为典型的维管束病害［2~3］。在我国产区栽培的广藿香，罕见开花结实［4］，长期以来，生产

6、上采用扦插繁殖，病原体通过无性繁殖传递，且逐代积累，危害越来越严重，迫切需要进行抗病品种的选育。近年来，基因转移及人工诱变等改良药用植物农艺性状的技术，为广藿香抗病育种提供了可能，而要开展相关的研究，首先要建立高效的组织培养再生系统。本文以广藿香多种外植体为材料，筛选影响广藿香愈伤组织诱导、增殖及分化的多种因素，以期建立高效的愈伤组织诱导及分化再生植株的离体再生系统，为遗传转化及人工诱变育种奠定基础，现报道如下。　　1材料和方法　　11材料试验　　材料采自广州中医药大学药圃，选择生长健壮、无病虫害的广藿香单株，取其顶芽、带节茎及叶片；经蒸馏水冲洗干净后，用体积分数为70%乙醇浸泡3

7、0s，转入1g/L的HgCl2溶液浸泡消毒10min，再用无菌水漂洗5～8次，把残留HgCl2漂洗干净，接种于MurashgeandTucker（MT）+02mg/L6苄氨基嘌呤(BA)培养基上，诱导丛芽的生成，待丛芽长出后将其移至MT培养基中培养，试管苗长至5～7cm时即可作材料使用。　　12方法　　121外植体培养　　取广藿香试管苗的叶片、带节茎、不带节茎及根尖为外植体进行培养。外植体在培养基中的放置方式为：叶片及根尖平放，带节茎及不带节茎为