大花萱草‘奶油卷＇花蕾愈伤组织诱导和植株再生

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1、应用技术OhinascienceandTeChnOlOgyReview●I大花萱草‘奶油卷'花蕾愈伤组织诱导和植株再生①何月秋胡仲义胡银莉(宁波城市职业技术学院溪门校区浙江宁波315502)[摘要]以大花萱草“奶油卷”花蕾为外植体材料，MS为基本培养基添加不同浓度BA和NAA，诱导其愈伤组织的形成和不定芽的分化，并建立其再生体系。MS+BA1．5mg／L+NAA0．2mg／L是大花萱草“奶油卷”愈伤组织较佳的诱导培养基；MS+BAI．5mg／L+NAA0．1mg／L是较好不定芽的分化与增殖培养基：而I／2MS+IBA0．5m

2、g／L则是组培苗较适合的生根培养基。生根小苗移栽至灭菌的基质(泥炭土：蛭石=l：1)经过一定时间的炼苗成活可达到96％，移栽到大田后均可成活。[关键词]大花萱草“奶油卷”花蕾愈伤组织植株再生中图分类号：Q949．742．2文献标识码：A文章编号：1009914X(2009)32—029902大花萤草“奶油卷”系百合科萱草属多年生草本植物，是从萱草中杂交愈伤组织诱导：MS+BA0．5mg／L+NAA0．2mg／L；MS+BAI．Omg／L+NAAO．2mg／选育出的优良多倍体宿根花卉新品种，也是大花萱草中唯一重瓣品种。其株L：

3、MS+BAI．5m【g／L+NAAO．2mg／L：MS+BA2．0mg／L+NAA0．2mg／L。高30~40cm，叶绿色，花金黄色，花朵硕大，直径可达8～10cm，每株可着花6～不定芽诱导和增殖：MS+BAO．5mg／L+NAA0．1mg／L：MS+BAI．Omg／L+NAAO．1mg／8朵，花期6月中旬～8月中旬。该品种具有抗寒、抗旱、抗病虫害、耐L：MS+BA1．5mg／L+NAAO．1mg／L。盐碱、花期长和绿色期长等特点，是理想的观花赏叶的地被植物和优良的园根的诱导：I／2MS+IBA0．2mg／L：1／2Ms+I

4、BAO．5mg／L：I／2MS+IBAI．Omg／L。林绿化新材料(1)。但其结实率低，种子繁殖变异大，而目前采用的分株繁殖，以上培养基蔗糖浓度为3％，琼脂浓度为0．5％，pH为6．2～6．4。不仅需要大片的土地和栽培母体，而且繁殖系数低、周期长，一般一个植株每13培养室的环境要求年仅可繁殖34株，难以满足市场需求。采用组织培养方法可以大大的提高培养室温度25±2℃、光强l500～2O00Lx、光照14h／d。繁殖系数，而且可以打破季节限制。程霖衍等(1)、(2)分别以花梗、花托为2结果与分析外植体对大花萱草“奶油卷”进行组

5、织培养的研究，本文则以花蕾为材料，2．1升汞不同处理时间对花蕾灭菌效果的影响诱导其愈伤组织和不定芽的形成，摸索出一套建立大花萱草“奶油卷”高效由(表一)可以看出，升汞处理不同时问对外植体灭菌效果有较大的影响。再生体系，为该植物的工厂化育苗提供技术参数。升汞处理时间越短，外植体污染率越高，升汞处理时间在lmin时，其污染率有1材料及方法85％：升汞处理13min时，污染率明显下降，只有25％。不过实验中观察到随着升1．1无菌材料的准备汞处理时间的延长，外植体的枯死数量明显升高。升汞处理13min时污染率虽选用宁波江东绿城园林绿

6、化有限公司从国外引进的大花萱草“奶油卷”明显下降但外植体枯死严重，综合考虑升汞处理10min为最适宜的灭菌时间。新品种，于6～8月份盛花期晴天采取未开放的小花蕾。用自来水冲洗，放入22愈伤组织的诱导及不定芽的分化烧杯然后再加入数滴洗洁精摇晃浸泡约1小时，用清水洗净。在超净工作台在诱导培养基上培养15d后，外植体开始增厚、膨大并有愈伤组织形用75％酒精表面浸泡30s，0．1％升汞消毒不同，同时要不断地摇晃外植体，再用成。外植体在不同诱导培养基上所形成愈伤组织的时问和生长情况各不相同无菌水冲洗4～5次。切去花蕾的顶部至露出子房为

7、止，然后对半切开，接种(如表2)。在2、3、4号培养基上，15d就有愈伤组织出现，而在1号培养在诱导培养基上。基上直到20d才出现愈伤组织。培养40d后，1、2、4号培养基上的外植体1．2培养基的设计诱导率不到50％，3号培养基诱导率达到60％。愈伤组织在分化过程中，除能形实验中参照部分大花萤草组培资料”-“15)*“，以Ms为基本培养基附加成分化苗以外，在3号培养基上还会发生芽旁长芽的现象，有的在芽基部分化不同浓度的BA、NAA、IAA，设计大花萱草“奶油卷”各个阶段的培养基：出根成为完整的植株。表1升汞不同处理时间对花蕾

8、灭菌效果的影响表3不同激素组合对不定芽分化和增殖的影响TablelThesterileeffectofHgcl2varioustreatmenttimeonTable3TheeffectofvariOUShormonecombinationoiltheflowerbudsadventiti