楸树体外植株再生及其同源四倍体诱导的研究.docx

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1、楸树体外植株再生及其同源四倍体诱导的研究楸树是我国珍贵树种,具有用材和观赏等多种用途。广泛种植楸树不仅有助于改善我国的生态环境,而且对木材短缺的现状具有缓解功能,对林产品加工产业的发展具有重要的经济意义。随着现代生物技术的迅速发展,多倍体育种已经成为林木种质资源创新的新途径,为楸树在多倍体育种方面奠定了基础。试验以楸树种子为实验材料,采用完全随机试验方法,建立了楸树体外植株再生体系,利用秋水仙素通过多种方法对楸树种子进行诱导获得四倍体楸树。研究结论如下。1、以楸树植株叶片、茎段为试验材料,对楸树的体外植株再生条件进行了研究：研

2、究表明茎段为最佳外植体,楸树茎段愈伤组织诱导最适培养基为MS+0.3IBAmg·L-1+7BAmg·L-1,楸树茎段愈伤组织芽诱导最适培养基为MS+0.3mg·L-1IBA+5mg·L-1BA。顶芽丛生诱导最适培养基MS+0.1mg·L-1NAA+12mg·L-1BA,根诱导最适培养基1/2MS+0.5mg.L-1NAA。2、采用种子在含秋水仙素的固体培养基中诱导楸树四倍体,秋水仙素浓度40mg·L-1时四倍体诱导率达到最高为10%,嵌合体率达到最高为81.7%。秋水仙素浓度对种子在含秋水仙素的固体培养基中诱导四倍体产生极显著

3、的作用。3、滴定法诱导楸树四倍体时,秋水仙素浓度40-300mg·L-17个浓度组合处理中.5个浓度组合中出现嵌合体,除40mg·L-1未诱导出嵌合体植株,其它浓度组合均出现嵌合体植株,嵌合体率范围为25-45%。未检测出四倍体植株。不同秋水仙素处理时间浸泡法诱导楸树四倍体时,秋水仙素浓度0-120mg·L-1处理中,共设13个浓度,65个组合。52个浓度组合中出现嵌合体,嵌合体率范围从1.7-58.3%。未检测出四倍体植株。相同秋水仙素处理时间浸泡法诱导楸树四倍体时,秋水仙素浓度0-120mg·L-1处理中,共设13个浓度,

4、52个处理组合。48个浓度组合中出现嵌合体植株。嵌合体率范围从23.3-60%。未检测出四倍体植株。滴定法诱导和种子浸泡法均未诱导出四倍体植株。4、利用流式细胞仪测定叶片单细胞DNA含量表明,四倍体植株叶片单细胞DNA含量为其二倍体的2倍。5、四倍体楸树植株与对应的二倍体植株相比,叶片增大、增厚,叶片颜色较深,叶片锯齿明显较密：叶片气孔器增大,密度减小。