泡桐体细胞胚胎发生及植株再生研究

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1、河南农业大学硕士学位论文泡桐体细胞胚胎发生及植株再生研究姓名：马新业申请学位级别：硕士专业：森林培育指导教师：范国强;黎明20030601致谢本论文是在导师范国强教授和黎明副教授的悉心指导下完成的。从论文选题、方案设计到论文结构和语言的修缮，无不倾注着两位导师的心血和汗水。两位导师渊博的学识、精益求精的治学态度、扎实的工作作风、高度的敬业精神和谦虚礼让的高尚品格，给了我很多启示和教诲。三年来，两位导师无私地传授给我学科知识和实验技能，极大地改进了我的思想方法和丰富了我的社会经验，生活和经济等各方面也给了我无微不至的关怀和支持。所有

2、这一切我将铭记终生，在此我谨致以我最衷心的感谢!我要感谢森林培育学科导师组老tJ币,ff]，林学园艺学院老师们多年来对我的辛勤培养，感谢研究生处、校省级重点学科实验室老师们三年来对我的帮助和指导。我要感谢学姐翟晓巧博士，由于她辛苦的前期工作才使该研究课题得以在短期内顺利进行；感谢学姐贺窑青、冯志敏，学弟李锋，学妹杨晓娟及实验室其他人员，是他们的大力协助才使我圆满完成实验任务；感谢室友，是他们真挚的友谊伴我度过三年美好时光。我要感谢亲人，他们的爱是我勇往直前的不竭动力。在此论文完成之际，再一次衷心感谢所有关心、支持、帮助我的领导、老

3、师、同学、朋友和亲人!!马新业2003，06于郑州摘要泡桐是一种深受广大群众喜爱的速生用材树种，具有生长快、材质优良等特点，但其丛枝病和大冠低干等问题长期以来一直困扰着泡桐的进一步发展。随着现代科学技术的兴起，基因工程和细胞工程为解决泡桐的这些问题提供了有效的方法和途径。离体植株再生研究是植物现代科学技术具体运用的重要基础。在植株再生的两种方式中，体细胞胚胎发生方式具有更大的优越性，它不仅可以作为细胞分化、形态发生等问题研究的理想体系，而且也是人工种子研制等的必要条件。泡桐体细胞胚胎发生及植株再生体系的建立将为开展泡桐基因工程和细

4、胞工程研究和培育泡桐新品种等工作奠定基础。本文通过对兰考泡桐、白花泡桐和毛泡桐无菌苗叶片和茎段体细胞胚胎发生及植株再生的研究，得出如下结果：I．三种泡桐不同外植体细胞胚胎性愈伤组织的最适培养基分别为：兰考泡桐叶片为MS+O．3NAA+8BA，茎段为MS+O．3NAA+IIBA；白花泡桐叶片为MS+O．3NAA+8BA，茎段为MS+O．3NAA+14BA；毛泡桐叶片和茎段都是MS+O．3NAA+17BA。2．作为白花泡桐和毛泡桐杂交种的兰考泡桐在叶片和茎段胚性愈伤组织诱导条件敏感性等方面分别与毛泡桐叶片、白花泡桐茎段具有相似性；在体

5、细胞胚胎发生规律等方面存在一定的差异。3．不同种泡桐体细胞胚胎发生经历早期原胚、球形胚、心形胚和鱼雷胚等阶段最终达到成熟子叶胚。在实验条件下，泡桐体细胞胚胎发生以间接方式为主，其胚性愈伤诱导、各阶段体细胞胚胎发生以至体细胞胚胎成熟和正常转换均在同一培养基同一培养条件下出现。关键词：泡桐愈伤组织体细胞胚胎发生再生植株{文献综述1．1植物体细胞胚胎发生概况与意义20世纪初，德国Haberlandt所作植物细胞全能性的科学预言为随后兴起的檬物组织培养技术奠定了理论基础。关于离体细胞全能性的表达方式，在很长一段辩阗滤人们郝谈为器密发生是其

6、唯一静途径。1958年，Steward等和Reinert同时在胡萝卜根组织单细胞=褥=浮培养中发现某然体细胞能转变为形态和发育过程都与合子胚相似的体细胞胚骀(即钵缨您胚胎)，并豳此彤残了再生擅株。随着压来愈采愈多其他植物组织培养研究中类龟鬟现象的发现，人们开始逐渐谈识劐俸细簏胚胎发生是植物离体培养再生植株的又一基本途径。体细胞胚胎发生是在离体条件下植物体细胞通过与合子胚类似的发育途径形姨耨个体鲍过程，与器官发生捆魄，体缨跑涯骀发生具有数量多、速度快、结构完整、荐生率高等优点。体细胞胚胎超源予菲合子细胞，烧组织器官和细胞培养的产物，

7、媳有胚根、胚轴、胚芽的完整两极燃结构，与外植体的维管无组织联系，既不同于自然界中的鼓合窝纛融合疆，也不嗣予缀织培养孛的不怒芽秘不定摄。作为20毽纪后期植物组织培养中的一个重大发现和突破，体细胞胚胎在缀多领域中具有广泛的应用。(1)为植物细胞分化、全能性表达过襁及其机理等理论问题磺究提供了理想的实验体系(郭仲琛等，1990)；(2)为人工释子磷裁及其应建提供了必要条锌(李鲣庆，t990)；(3)为辩覆资源保存和生物多样性保护问题提供了新的谂径；(4)为基因工程和细胞工程操作及新品种培育奠定了基础；(5)为原生质游离及其植株再生奠等怒

8、了基础(王吉之镰，1998)。此外，体细胞胚胎发生技术还在病毒脱除、体缨麓融合秘不阚倍往植撩诱警培募等诸多方嚣均有广阔的应用前景。研究植物体细胞胚胎发生不仅具有重大的理论意义，而且具有重大的实践价值。迄今为止，对体细胞胚胎的研究也全部是围绕这两个方