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时间:2018-04-16
《红姜花体细胞胚胎发生及植株再生的研究》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在学术论文-天天文库。
1、园艺学报2014,41(10):2139–2146http://www.ahs.ac.cnActaHorticulturaeSinicaE-mail:yuanyixuebao@126.com红姜花体细胞胚胎发生及植株再生的研究*涂红艳,肖望,邓崇会(广东第二师范学院生物系,广州510303)摘要:以红姜花(Hedychiumcoccineum)的花丝和花药为外植体,通过体细胞胚胎发生途径建立-1-1-1-1了植株再生体系。结果表明:外植体在MS+4mg·L2,4-D+4mg·LNAA+1mg·L6-BA+30g·L-1-1蔗糖+7g·L
2、琼脂的培养基上经过120d诱导出愈伤组织,愈伤组织在MS+1mg·L2,4-D+0.25-1-1-1-1mg·LNAA+0.25mg·L6-BA+30g·L蔗糖+7g·L琼脂的培养基上经过继代筛选,获得浅黄色-1-1松散易碎的胚性愈伤组织。胚性愈伤组织在MS无机盐+B5维生素+100mg·L谷氨酰胺+230mg·L-1-1-1-1脯氨酸+100mg·L麦芽提取物+0.02mg·LNAA+0.02mg·LTDZ+0.5~1.0mg·L2,4-D+45-1g·L蔗糖的培养基中通过3个月的悬浮培养,可得到均质稳定的胚性细胞悬浮系(ECS)。胚
3、性悬浮细胞-1-1-1在SH无机盐+B5维生素+100mg·L谷氨酰胺+230mg·L脯氨酸+100mg·L麦芽提取物+0.25-1-1-1-1mg·LNAA+0~0.20mg·LTDZ+45g·L蔗糖+7g·L琼脂的体胚诱导培养基中培养10d,可见-1到白色半透明体胚发生,20d后体胚发育成熟。当TDZ浓度为0.15mg·L时,体胚诱导率高达4500-1-1个·mLPCVECS(PCV:细胞密实体积)。在SH无机盐+B5维生素+0.20mg·LIAA+0.25~1.0-1-1-1mg·L6-BA+30g·L蔗糖+7g·L琼脂的体胚萌发
4、培养基上,体胚萌发率高达100%。将萌发的体胚-1转移到1/2MS+1g·L活性炭成苗培养基中,进一步发育成正常的再生植株,植株室外栽培成活率达90%。关键词:红姜花;胚性细胞悬浮系;体细胞胚胎发生;植株再生中图分类号:S682文献标志码:A文章编号:0513-353X(2014)10-2139-08SomaticEmbryogenesisandPlantRegenerationofHedychiumcoccineum*TUHong-yan,XIAOWang,andDENGChong-hui(DepartmentofBiology,Gu
5、angdongUniversityofEducation,Guangzhou510303,China)Abstract:AreproducibleprotocolforsomaticembryogenesiswasestablishedfortheornamentalgingerHedychiumcoccineumusingfilamentsandanthers.Afterculturefor120days,calluswasinduced-1-1-1onMurashigeandSkoog(MS)mediumsupplementedwi
6、th4mg·L2,4-D,4mg·LNAA,1mg·L-1-1-16-BA,30g·Lsucroseand7g·Lagar,proliferatedonMSmediumcontaining1mg·L2,4-D,0.25-1-1-1-1mg·LNAA,0.25mg·L6-BA,30g·Lsucroseand7g·Lagar.Lightyellowandfriableembryogeniccalluswasobtained.EmbryogeniccalliweresuspendedinliquidmediumcontainingMS-1-1
7、-1basalsalts,B5vitamins,100mg·Lglutamine,230mg·Lproline,100mg·Lmaltextract,0.02收稿日期:2014–04–01;修回日期:2014–08–11基金项目:广东省自然科学基金博士启动项目(10451030301004286);2013年广东省高等院校学科与专业建设专项资金项目(2013KJCX0137);广州市科技计划项目(2014J4100151)*通信作者Authorforcorrespondence(E-mail:xiaowang@gdei.edu.cn)2
8、140园艺学报41卷-1-1-1-1mg·LNAA,0.02mg·LTDZ,0.5–1.0mg·L2,4-Dand45g·Lsucrose.After3monthsculture,ahomogeneousa
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