肝移植急性排斥大鼠肠道双歧杆菌种群结构变化特征的研究

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1、⑨论文作者签名：』赵盈盘卜指导教师签名：c2丝二!!兰论文评阅人1：扬益太主任医垣浙江太堂附属筮二医院评阅人2：黄建苤圭任医垣浙江太堂醴属簋二医睦评阅人3：施维登教授浙江生医药太堂隘属堑堡医院评阅人4：评阅人5：答辩委员会主席：奎兰娟院士浙江太堂附属簋二医院委员1：粱住蝰童鱼医短逝江太堂隘属签二医院委员2：张圭数授浙江省医堂盘堂院委员3：委员4：委员5：浙江大学研究生学位论蒯陛声明㈣Y24212㈣57本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不

2、包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得逝至三盘堂或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。学位论姗虢甚叶柳期一7多年z月≯日学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解逝姿盘堂有权保留并向国家有关部门或机构送交本论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅。本人授权逝婆盘鲎可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索和传播，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。(保密的学位论文在解密后适用本授权书)学位论文

3、作者虢害畸签字日期：h7多年乡月2日一L月×。＼D，乙海．jMr山名期签日师字导签本研究受以下项目资助国家重点基础研究发展计划(973计划)NationalBasicResearchProgramofChina肠道微生态与感染的基础研究(项目编号：2007CB513000)浙江大学硕士学位论文致谢致谢首先衷心感谢我的导师阮冰教授，在我的研究生学习过程中，从论文课题的设计、试验方案的构思、实验工作的实施到论文的撰写与修改，每一个环节都倾注着恩师的汗水和心血。阮老师治学严谨，学识渊博，思想深邃，为我营造了一种良好的科研氛

4、围。同时又宽厚正直、乐观豁达、以身立行，其严以律己、宽以待人的崇高风范，让我终身受益。借此机会向导师表示我最衷心的感谢和诚挚的祝福!衷心感谢李兰娟院士，感谢李老师给我们创造了优越的研究条件和研究平台，同时李老师严谨的治学态度、不断创新进取的精神、富有远见的学术眼光及忘我的工作态度都将成为我今后学习和生活的榜样。衷心感谢我的师姐解奕瑞，我的实验技术是在她的直接指导和影响下习得，感谢她对本实验倾注的大量心血，由于她成功造模后留下来的大量珍贵标本，才使我顺利完成课题的研究，感谢她对我的帮助与鼓励。同时感谢我的师兄罗专波、邓

5、敏，师姐刘霞在实验上给予的大力帮助。衷心感谢传染病诊治重点实验室平台的魏泽庆老师、沈萍老师、王保红老师、杨介钻老师、陈云波老师、鲁海峰老师、秦楠老师、吕龙贤老师、郑培文老师等在我的课题实施过程中的无私的帮助与支持。衷心感谢2010级浙一内科班的各位同学，感谢和你们一起奋斗的经历。最后，衷心感谢我的家人和朋友，感谢你们在我求学道路上给我最真挚的关怀、鼓励、支持和理解。浙江大学硕士学位论文中文摘要肝移植急性排斥大鼠肠道双歧杆菌种群结构变化特征的研究浙江大学医学院10级硕士研究生导师内科学(传染病)李政锋阮冰教授中文摘要目

6、的利用变性梯度凝胶电泳(DGGE)及荧光定量PCR等方法对肝移植急性排斥及相关干预(抗生素、益生菌)大鼠肠道双歧杆菌种群结构变化及其多样性特征进行研究，以期发现与肝移植急性排斥反应相关的双歧杆菌菌种。方法将纯系雄性Lewis大鼠24只和BN大鼠42只按如下分组：(1)假手术组(n=6)：正常BN大鼠，只打开腹腔便缝合；(2)同基因肝移植组(n=6)：供、受体各6只，均采用BN大鼠；(3)异基因肝移植组(n=6)：Lewis大鼠6只为供体，BN大鼠6只为受体；(4)抗生素组(n=6)：异基因肝移植(Lewis．BN)+

7、2ml庆大霉素灌胃(4万单位)；(5)益生菌组(n=6)：异基因肝移植(Lewis．BN)+2ml益生菌培菲康(长双歧杆菌、嗜酸乳杆菌、粪链球菌三联活菌胶囊，2．O×10^8CFU／m1)灌胃。上述大鼠肝移植利用改良的Kamada二套袖法，从而构建肝移植排斥反应大鼠模型，分别于术前1天、术后1周和术后2周的采集粪便标本，2周后处死大鼠采集肝脏组织及腔静脉血用于分析肝脏病理改变、肝功能水平及血浆内毒素水平，并利用巢式PCR．DGGE、RT-PCR等分子生物学实验技¨浙江大学硕士学位论文中文摘要结果术分析不同时间段肠道双

8、歧杆菌种群结构变化。(1)DGGE图谱显示：术前1天，除益生菌组外，各组双歧杆菌多样性无显著性差异；益生菌组多样性相比异基因组多样性下降(P<0．05)。术后1周，和对照组、同基因组相比，异基因组双歧杆菌多样性下降(P<0．05)；相比异基因组，抗生素组多样性升高(P<0．05)，益生菌组多样性下降(P<0．05)。术后2周，对照组、同基因组和