慢性hbv患者感染肠道双歧杆菌种群结构改变的研究

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1、浙江大学硕士学位论文慢性HBV患者感染肠道双歧杆菌种群结构改变的研究姓名：徐敏申请学位级别：硕士专业：内科学指导教师：李兰娟201202浙江大学硕士学位论文中文摘要慢性HBV感染患者肠道双歧杆菌种群结构改变的研究浙江大学医学院内科学(传染病学)硕士研究生徐敏导师李兰娟院士中文摘要目的对慢性HBv感染患者肠道双歧杆菌种群结构表型和多样性进行研究。方法收集16例慢性乙型肝炎患者、16例乙肝肝硬化患者以及15例健康对照者粪便标本，提取粪便总DNA后首先应用基于巢式PCR扩增的变性梯度凝胶电泳(PCR_DGGE)分析三组间双歧杆菌种群多样性并对主条带进行克隆鉴定；再利用

2、属特异性克隆文库分析序列进化关系并确定各组种群构成比例；最后，基于以上定性分析结果，利用荧光定量PCR对主要菌种进行定量分析。结果虽然三组间双歧杆菌种群多样性未出现明显改变(P=o．196)，但是PCR．DGGE图谱、克隆文库和荧光定量PcR结果均显示在疾病组尤其是肝硬化组中B撕如6口c胞，．f“肌如"““m的检出率显著增加。与丑如疗疗甜聊相反，B删b6口c纪，．f珊lc口招，z材肠砌胍侣驴幽6口c纪，．f“聊卵P甜如c砒刀“肠胁所在肝硬化组的检出率明显低于健康对照组，荧光定量PCR结果表明该菌种的数量也显著减少(P=O．023)。虽然三组间B西南6口c陀rf“

3、掰fD唧m的数量未出现显著性差异，但是荧光定量PcR结果显示肝硬化组中A肠恻砌的检出率明显低于慢乙肝组和健康对照组(P=O．011)。n浙江大学硕士学位论文中文摘墨结论慢性HBv感染患者肠道双歧杆菌种群结构发生了明显的改变，主要表现为丑c口纪，z甜肠胁—咖P甜c如c口纪刀甜肠m肌和丑肠刀暑w聊的减少，丑d叠，z疗“明的增加。关键词慢性乙型肝炎肝硬化双歧杆菌变性梯度凝胶电泳(DGGE)克隆文库荧光定量PcRB狮如6叩纪，f“聊沈刀，f删nI浙江大学硕士学位论文英文摘要ChangesofFecalB耖2如6口cfl!，Z以，咒SpeciesinAdultPatien

4、tswithHepatitisBVirus-InducedChronicLiVerDiseaseSpeciali锣InfectiondiseasesPostgraduateXuMinSuperVisorLiLanjuan(academician)AbstractObjectiVeTIIeaimoftllis吣w硒t0cha豫cterizemecompositionofintesti砌B驴db6口c纪，．f“肌iIlpatiems谢thhepatitisBVims—inducedchromcliVerdiseaSe．Methodsnlefecals锄plesof1

5、6patients诵nlchrollichepatitiSB(CHB)，16patients诵tllhepatitiSBVirus-relatcdci仃hosis(HBVci玎hosiS)，觚d15healtllsubjectswerecollectedrespectiVely．A盘ere)m翟ctingtotalDNAf．romthes锄ples，nested-PCR-b嬲eddemturing鲥ientgelelec们phoresis(PCR-DGGE)waSappliedtoaIlalyzemediVersi够ofthegenusB驴面6口c纪，．f“ma

6、ndthenthemostcommonbandsintlleprofileswereidentifiedbycloIliIlg．Me锄Ⅵ栅le，genus—specificclonelibr撕eswereconstllJctedt0illustra：cetlleeVolutionaryrelationsMpanddeterminemephylotypesiIleachgroup．Finally，tllepredomimmtlyobservedspecieswereselectedfore小唧Ierationbyreal．timePCR．ResultsThou曲Ⅱ

7、lere、糯nosi嘶fic锄tdi仃erencei11tlledivers埘alllongtheⅡ鹏egroups(尸：0．196)，Bi疗如6口c陀，f“m如肋}姗zseemstobes】弦cific2L11yeIlllancedillⅣ浙江大学硕士学位论文英文摘要patientsastIlePCR—DGGEprofilesshowed，、^，hich、^啊sf．urtherVali幽tedbyclonelib胱yandre出一timequantitativePCR．111contrastt0me丑沈，z疗删，B泸如6口c胞，f“聊c口纪甩“砌甜"砟艚P舭如

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