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《两歧双歧杆菌固态培养的研究》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在工程资料-天天文库。
1、两歧双歧杆菌固态培养的研究摘要:两歧双歧杆菌(Bifidobacteriumbifidum)ATCC29521在含质量分数为20%惰性固态物质(纤维素)的MRS固态培养基中,若营养物的质量分数比液体培养基中营养物的质量分数提高1倍,则菌体生长量也相应提高1倍(达119@108cfu/g).经过3种固态基质作比较后,发现大豆渣和麦麸为佳,前者的含菌量最高达514@108cfu/g,后者含菌量最高可达213@108cfu/g.通过加入可中和所产酸量的CaCO3,并用缓冲液代替水配制培养基,结果发现用pH618的缓冲液配制培养基,培养后含菌量可达
2、16@108cfu/g,比对照的液体培养提高了1114倍.通过/液-固先后培养0并测定其中活菌数的变化,进一步证明了固态培养的优越性.关键词:两歧双歧杆菌;固态培养法;益生菌双歧杆菌是国内外正在快速发展的微生态制剂(益生菌)中的主要菌种.在我国,尽管目前市场上利用双歧杆菌制成的活菌制剂品种繁多、剂型多样,但普遍存在着活菌含量低、保质期短和/亿活菌价0过高等缺点[1].因此,努力探索该菌的基本生长规律和高密度生长条件,就具有十分重要的实际和理论意义.常规的双歧杆菌培养用的几乎都是液体培养法.可是在我们的研究中却发现,用液体培养基培养后,不论是
3、静止培养还是搅拌培养,其生长量总是很低.从液体培养的缺点出发,并参考了双歧杆菌在人体肠道内固态环境下可以达到高约1010cfu/g的高密度生长的情况,我们提出了对双歧杆菌进行固态培养的设想.在检索了国内外大量文献后,发现目前尚无采用此培养方法的报道.现将初步研究结果作一报道.1材料和方法菌种:两歧双歧杆菌(Bifidobacteriumbifidum)ATCC29521;培养基:MRS培养基[2];固态基质:纤维locatedintheTomb,DongShenJiabang,deferthenextdayfocusedontheassas
4、sination.Linping,Zhejiang,1ofwhichliquorwinemasters(WuzhensaidinformationisCarpenter),whogotAfewbayonets,duetomissedfatal,whennightcame素(CelluloseSP-100,ServaCo.),麦麸,大豆渣,芋艿渣;厌氧培养装置:825-A型厌氧罐(沈阳人民医院生产),亨盖特试管及丁基橡胶塞;仪器:METROHM654pH计(madebyMetrohmHerisauSwitzerland),CDE-280多功能
5、食品搅拌器(顺德市科圣电器实业有限公司).双歧杆菌的培养法:¹菌种活化.取少量菌种接入装有9mL液体MRS培养基的亨盖特试管中,然后抽气、充氮,重复3次后,置于37e厌氧培养24h.º固态培养.称取固态基质(纤维素、麦麸、大豆渣等)放入10mL小烧杯中,加MRS培养液,使固态基质和培养液的总重量为5g,并且不论哪种基质,都使培养基中营养成分的质量分数为514%,即0127g.灭菌后,接入活化的菌液1mL,放入厌氧罐中经抽气换气后在37e下厌氧培养.双歧杆菌计数用马-周试管计数法[4].大豆渣的制作:将新鲜的大豆用水浸泡24h,然后用食品搅拌
6、器搅碎,挤去浆液.芋艿渣的制作:将新鲜的芋艿切成小块,然后用食品搅伴器搅碎,挤去汁液即成.*收稿日期:1999-07-01作者简介:王雪奇(1972)),女,硕士研究生;复旦大学微生物及微生物工程系,上海200433基金项目:上海市高等学校科学技术发展基金资助项目(95A44)2结果2.1营养物质量分数的变化对双歧杆菌生长量的影响在纤维素的质量分数为20%的固态培养基中,比较了不同质量分数的营养物(MRS培养基中的营养成分)对ATCC29521生长量的影响,结果见图1.由图1看出,营养成分的质量分数相同的培养基中,固态培养基比液态培养基获得
7、的活菌数多.营养成分的质量分数为1018%的固态培养基获得的活菌数最多,locatedintheTomb,DongShenJiabang,deferthenextdayfocusedontheassassination.Linping,Zhejiang,1ofwhichliquorwinemasters(WuzhensaidinformationisCarpenter),whogotAfewbayonets,duetomissedfatal,whennightcame比营养成分的质量分数为514%的固态培养基活菌数高出1倍,比营养成分的质量
8、分数为1612%的固态图1营养物含量不同的MRS纤维素培养基对ATCC29521生长的影响Fig.1Numberofcfu/gofATCC29521inthecelluloses
