香芹酚对成熟鼠脊髓胶状质神经元谷氨酸能自发性兴奋性传递的作用

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1、学位论文独创性声明本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得直昌太堂或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。学位论文作者签名(手写)：罗黼签字日期：训多年f月孑日学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解南昌大学有关保留、使用学位论文的规定，有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅。本人授权南昌大学可以将学位论文的全部或部分内容编入有关

2、数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编本学位论文。同时授权中国科学技术信息研究所和中国学术期刊(光盘版)电子杂志社将本学位论文收录到《中国学位论文全文数据库》和《中国优秀博硕士学位论文全文数据库》中全文发表，并通过网络向社会公众提供信息服务。(保密的学位论文在解密后适用本授权书)糊黼引矧：黟锄幽㈣哗私签字日期：加眵年‘月彳日签字日期：缈I严I，月才日摘要目的：以香芹酚为主要成分的牛至精油具有许多药理作用，其中包括抗痉挛和镇痛作用。虽然已有研究表明口服香芹酚具有镇痛的效果，但是这种作用的细胞机制尚不明确。为了明确其中机制，我们利用全细胞膜片钳技术检测香芹酚对成年雄性

3、大鼠脊髓胶状质(substantiagelatinosa，SG；laminaIIofRexed神经)细胞的谷氨酸能自发性兴奋性传递的影响。方法：用乌拉坦向成熟雄性SD大鼠(6．7周)施以全身麻醉(1。2g／kg，腹腔注射)，随后行腰骶部椎板切除术。取出腰骶部的脊髓(L1．S3)，利用振动微切片机切取600．800微米(gm)厚度的脊髓切片，放置于标本记录槽内的尼龙网托上。然后利用盲法全细胞膜片钳技术记录SG神经元的生物电信号。用含有香芹酚或其他药物成分的溶液灌注记录槽。结果：保持维持电位在．70mV时，对SG神经元灌注香芹酚(1mM／L)两分钟时后，可诱导产生外向电流或增加SG细胞自发

4、性兴奋性突触后电位(sEPSC)的频率或者同时诱导产生外向电流和增加sEPSC频率。另一方面，灌流香芹酚两分钟呈剂量．依赖关系增加sEPSC的频率和外向电流幅度，EC50分别为0．69mM和O．55mM。香芹酚增加sEPSC频率和产生外向电流的效果是可逆的。香芹酚增加sEPSC频率的能力能被TRPAl通道拮抗剂HC．030031抑制但不能被TRPVl通道的拮抗剂抗辣椒素抑制，结果显示抗辣椒素不能影响香芹酚增加sEPSC频率的能力。外向电流的电流．电压关系曲线表明此过程中存在钾离子和其他离子的细胞膜渗透率的改变。产生的外向电流能被l0mM．K+阻断。钾通道阻滞剂TEA和Ba2+对外向电流

5、无作用。结论：香芹酚能激活神经末梢的TRPAl通道而非TI冲V1通道，引起神经末梢L．谷氨酸的自发性释放增加。它同时也能引起SG神经元的细胞膜电位超极化。这种超极化是由对TEA和BE+不敏感的钾离子通道介导产生。这表明香芹酚导致的神经细胞膜电位超极化可能是它产生镇痛效果的机制。关键词：脊髓后角；兴奋性传递；香芹酚；TRPAl；钾通道；膜片钳AbstarctABSTRACTObjective：Carvacrol，whichisabundantlycontmnedinoreganoessentialoils，hasvariouspharmacologicalactionsincluding

6、anticonvulsiveandantinociceptiveactions．Althoughtheoraladministrationofcarvacrolresultsinantinociception，cellularmechanismsforthisactionhavenotbeenexaminedyet．Weexaminedtheactionofcarvacrolonglutamatergicspontaneousexcitatorytransmissioninthesubstantiagelatinosa(SG；laminaIIofRexed)neuronsofspina

7、lcordslices．Methods：MaleadultSprague-Dawleyrats(6-8weeksold)wereanesthetized谢murethane(1．2g依g，intraperitoneal)，andthenlumbosacrallaminectomywasperformed．Thelumbosacralspinalcord(L1-S3)wasremovedandmountedonavibratingmicrosli