(+)-香芹酮和(-)-香芹酮对成年大鼠胶状质神经元谷氨酸能自发性兴奋传递的作用

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1、学位论文独创性声明本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得直昌太堂或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。学位论文作者签名(手写)：辱敛签字日期：沁I号年罗月习日学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解南昌大学有关保留、使用学位论文的规定，有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅。本人授权南昌

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3、传入传递和整合中有着熏要的意义。瞬时受体电位通道(TI冲)被认为，从外围神经元到脊椎椎板II(胶状质SG)神经元调节痛觉的传输过程中发挥作用，但是该通道的属性还没有得到充分的研究。而在中枢神经系统的TRP通道是否和参与接受疼痛刺激的外周神经系统的TRP通道属性一致将需要进一步的证实。香芹酮是一种单萜类化合物，作为精油的主要活性成分，主要由芳香植物作为来源提取，并显示具有止痛及抗惊厥的作用。(．)．香芹酮和(+)．香芹酮是一组立体异构体，因为据了解它们在神经系统中具有彼此不同的的效果，我们也将分别对其兴奋传递的效果进行了研究。已有研究表明在背根神经

4、节(DI埝)神经元和HEK293细胞(表达TRPVl)中，(．)．香芹酮有通过TRPVl激活诱导细胞内钙离子浓度增加的能力。我们也已经通过采用全细胞膜片钳技术研究镇痛的单萜化合物(．)．香芹酮的效果，其在成年大鼠脊髓切片的SG神经元上通过激活初级传入神经元细胞体的TRPVl通道致谷氨酸能自发兴奋传递。本实验采用全细胞膜片钳技术，观察(+)．香芹酮和(．)．香芹酮对胶状质神经元谷氨酸能自发性兴奋传递的影响，并探讨其作用机制是否与TRP通道有关。方法：我们将使用成熟6．8周的雄性SD大鼠，使用麻醉药乌拉坦(1．2．1．59／kg，约1．5m1)行腹腔

5、注射麻醉，待麻醉后行腰骶部的椎板切除。暴露脊髓后，取出腰骶部脊髓，利用自动切片机制取脊髓切片(约600．700微米)。使用(+)．香芹酮和(．)．香芹酮及TRPAl通道拮抗剂HC．030031和TRPVl通道拮抗剂抗辣椒碱进行灌注，使用全细胞膜片钳技术盲法记录SG神经元的自发兴奋性突触后电流(sEPSC)。结果：(+)．香芹酮和(．)．香芹酮以可重复及浓度依赖性的方式增加自发兴奋性传递的频率并伴幅度小幅增加。(+)．香芹酮和(．)．香芹酮增加sEPSC频率的半数效应浓度分别为0．48毫摩尔和O．43毫摩尔。在某些神经元，固定膜电位摘要为一70mV

6、的情况下sEPSC的频率增加伴随着内向电流。(一)一香芹酮的效果被TRPVl通道拮抗剂抗辣椒碱(10微摩尔)抑制，而(+)．香芹酮则不被TRPVl通道拮抗剂抗辣椒碱(10微摩尔)抑制。与此相反，(+)一香芹酮的效果被TRPAl通道拮抗剂HC．030031(50微摩尔)所抑制影响，而(．)．香芹酮则不被TRPAl通道拮抗剂HC一030031(50微摩尔)抑制。结论：这些结果表明，(+)．香芹酮和(．)．香芹酮分别激活TRPAl和TRPVl通道，导致SG神经元上谷氨酸能自发兴奋性传递的增加。有研究表示(．)．香芹酮有通过TRPVl激活诱导DRG神经元

7、细胞内钙离子浓度增加的能力，说明(一)．香芹酮对中枢神经元和中枢末梢部位神经元的TRP通道类型可能相同。(+)．香芹酮和(一)．香芹酮的作用脊髓SG神经元中枢终端的TRP通道不相同，该结论有助于了解TRP通道的化学结构。关键词：兴奋性传递；(+)．香芹酮；(．)．香芹酮；TI冲V1；TRPAl；全细胞膜片钳AbstractABSTRACTobjective：SpinallaminaII(substantiagelatinosa；SG)neuronsplayallimportantroleinmodulatingnociceptivetransmi

8、ssiontothecentralnervoussystem(CNS)．Transientreceptorpotential(TRP)c