oxLDL诱导内皮细胞HSP22的表达及他汀干预效果

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1、学位论文独创性声明本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得壶昌太堂或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。学位论文作者签名(手写)．巩气签字日期：弘Ij年6月7日学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解南昌大学有关保留、使用学位论文的规定，有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅。本人授权南昌大学可以将学

2、位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编本学位论文。同时授权中国科学技术信息研究所和中国学术期刊(光盘版)电子杂志社将本学位论文收录到《中国学位论文全文数据库》和《中国优秀博硕士学位论文全文数据库》中全文发表，并通过网络向社会公众提供信息服务。(保密的学位论文在解密后适用本授权书)学位论文作者签名(手写)：现≈I签字日期：列，j年6月7日签字日期：导师签名c手写≥丕至多厶飞一沙，产‘月7日摘要目的：探讨高脂环境中热休克蛋白22(Heatshockprotein22，HSP22)在人脐静脉内皮细胞(HUVECs

3、)的表达及他汀的干预作用。方法：1．构建HUVECs的高脂环境以模拟高脂损伤，并予他汀干预：选择不同药物浓度和时间条件的氧化型低密度脂蛋白(ox．LDL)和阿托伐他汀(Atorvastatin)进行干预，其@ox—LDL浓度为801．1g／ml，160t-tg／m1分别干预24h，48h，72h，Atorvastatin浓度为40ug／ml，80ug／m1分别干预24h，48h，72h，摸索其最佳干预浓度和时间。2．实验分组：对照组、OX．LDL组、他汀组、OX．LDL组+他汀组(先予ox．LDL，后加他汀干预)。3．观察高脂损伤中HSP22表达水平的变化规

4、律，使用PI单染色法检测细胞凋亡、MTT检测细胞增殖、Westernblot检测HSP22、eNOS、ELISA检测TNF．a表达。结果：1、ox．LDL及A仃ovastatin干预浓度及时间的筛选：(1)不Nox·LDL干预浓度及时间对细胞增殖的影响：80Bg／ml，160ug／ml时干预24h，48h，72h对细胞具有抑制作用(p

5、ml时干预24h，48h，72h对细胞具有促增长作用(p<0．05)。(4)不同Atorvastatin干预浓度及时间对HSP22蛋白表达影响：80lag／mlljg托伐他汀处理48h时，HSP22蛋白表达水平最低。2、根据筛选结果，选择以下条件进行实验干预：A、对照组；B、OX．LDL组(16099／ml、48h)；C、他汀组(801xg／ml、48h)：D、OX．LDL组+他汀组(先摘要OX-LDLl601ag／ml、24h；后加他汀801．tg／ml、24h)。(1)HSP22表达：与对照组比较，OX．LDL组HSP22蛋白表达升高(P

6、汀组HSP22蛋白表达降低(P<0．05)。(2)eNOS表达：与对照组相比，OX．LDL组eNOS蛋白表达升高(P<0．05)，他汀组eNOS蛋白表达降低(P<0．05)。(3)细胞增殖和凋亡：与对照组相比，OX．LDL组使细胞增殖降低并诱导细胞凋亡增高(P<0．05)，他汀组细胞增殖明显增高(P<0．05)。(4)TNF．0t表达：与对照组相比，OX—LDL组TNF．0【表达升高(P<0．05)，他汀组TNF．0【表达无明显差异(尸>0．05)，OX—LDL组+他汀组TNF．0L表达升高P<0．05；与OX．LDL组相比，他汀组和OX—LDL组+他汀组T

7、NF一值表达降低P<0．05。结论：使用OX．LDL可损伤内皮细胞，诱导HSP22表达，使用阿托伐他汀干预后降低HSP22表达。关键词：HSP22；高脂环境；脐静脉内皮细胞IIIAbstractObjective：ABSTRACTToinvestigatetheexpressionofheatshockprotein22(Heatshockprotein22，HSP22)inhumanumbilicalveinendothelialcells(HUVECs)sufferedofhyperlipemiastimulationandtheeffectofstat

8、ininterventiontotheseproce