阿托伐他汀对angⅱ诱导内皮细胞vcam

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1、阿托伐他汀对AngⅡ诱导内皮细胞VCAM【摘要】目的：观察阿托伐他汀对于血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导的培养人脐静脉内皮细胞表达血管细胞粘附分子-1（VCAM-1）和细胞间粘附分子-1（ICAM-1）mRNA的影响，探讨阿托伐他汀的非降脂作用和潜在的治疗作用。方法：培养人脐静脉内皮细胞，取生长良好的第2、3代细胞进行实验。将细胞分为三组：对照组、AngⅡ组、阿托伐他汀干预组。对照组加培养液，AngⅡ组以不同浓度的AngⅡ与细胞共孵育24h，干预组首先用不同浓度的阿托伐他汀（0.05μmol/L,0.1μmol/L,1.0μmol/L,10μmol/L）分别作

2、用1h，而后加1μmol/LAngⅡ与细胞共育24h。半定量RT-PCR测定粘附分子ICAM-1和VCAM-1mRNA的表达。结果：AngⅡ能上调ICAM-1和VCAM-1的表达，阿托伐他汀在一定程度上可抑制上述作用。结论：阿托伐他汀可抑制粘附分子ICAM-1和VCAM-1mRNA表达，可能具有增加粥样斑块稳定性和延缓动脉粥样硬化进程的作用。【关键词】动脉粥样硬化血管紧张素VCAM-1ICAM-1阿托伐他汀AbstractObjective：ToobservetheinfluenceofatorvastatinonthemRNAexpressionofva

3、scularcelladhesionmolecule-1(VCAM-1）andintercellularadhesionmolecules-1(ICAM-1)inculturedhumanumbilicalarteryendothelialcells(HUVEC)inducedbyAngⅡinordertounderstandthenon-lool/L～10μmol/LAngⅡfor24h.Cellsofatorvastatinol/L,0.1μmol/L,1.0μmol/L,10μmol/Latorvastatinfor1h,thencoincubate

4、dol/L)for24h.VCAM-1andICAM-1mRNARNAexpressioninducedbyAngⅡayincreasethestabilityofplaquesanddeceleratetheprogressionofatherosclerosisthroughinhibitingthemRNAexpressionofVCAM-1andICAM-1.Keyonocytechemo-attractantprotEin-1，MCP-1)、细胞间粘附分子-1（intercellularadhesionmolecule-1，ICAM-1）和血管细

5、胞粘附分子-1（vascularcelladhesionmolecule-1，VCAM-1)，促进单核细胞与内皮细胞粘附、浸润，介导炎症反应，参与AS形成［３～8］。他汀类药物的降脂作用、斑块稳定作用等已被学者所逐渐认识，而其非降脂依赖性的抗炎作用近年来才成为心血管领域的研究热点。大量的研究集中在他汀类药物通过减少病灶中巨噬细胞数量、抑制MMP基因转录、抑制核因子κB活性等机制下调MMP、TF及IL-6等多种细胞因子的表达上。对内皮细胞的研究较少，多集中在内皮功能如NOS等方面，对AngⅡ所诱导内皮细胞中粘附分子表达的影响目前研究较少。为此,我们探讨了阿托

6、伐他汀对AngⅡ诱导HUVECICAM-1和VCAM-1基因水平的表达。1材料与方法1.1材料与试剂健康新生儿脐带由山西医科大学第一医院妇产科提供；AngⅡ为美国Sigma公司产品；vI1640培养基、Ⅱ型胶原酶、胰蛋白酶（Gibco公司）；RT-PCR试剂盒、引物（大连宝生物有限公司）；PCRMark、胎牛血清（上海生物工程技术有限公司）；Ⅷ因子相关抗原（北京中山生物试剂公司）；Trizol（杭州四季青）；阿托伐他汀原粉由辉瑞公司惠赠；ICAM-1、VCAM-1试剂盒购自上海雄森公司。1.2方法1.2.1原代人脐静脉内皮细胞培养、鉴定与分组：无菌取分娩4

7、h健康新生儿脐带，用PBS缓冲液冲洗，以0.1%Ⅱ型胶原酶37℃消化，终止消化后收集消化液离心，弃上清液。加入RPMI1640培养基，在5%CO2、37　℃培养箱内培养。待细胞生长达亚融合状态时，以0.25%胰蛋白酶消化、传代。选择生长良好的第2-5代细胞用于实验。采用形态学及抗Ⅷ因子抗体免疫荧光染色行内皮细胞鉴定。培养的细胞分为三大组：①对照组：不加干预因素；②AngⅡ组：不同剂量的AngⅡ（0.01μmol～10μmol/L）培养细胞24h；③AngⅡ+阿托伐他汀组：用不同浓度的阿托伐他汀（0.05μmol/L，0.1μmol/L，1.0μmol/L，

8、10μmol/L）分别作用1h，而后加1μmol/LAngⅡ与细胞