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《胶原蛋白的提取及其改性研究》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在学术论文-天天文库。
1、哈尔滨工业大学工学硕士学位论文摘要胶原是结缔组织中重要的结构蛋白质,主要存在于动物的皮、骨、软骨、牙齿、肌腔、韧带和血管中。胶原作为生物医用材料而被应用于临床医学的各个领域,例如烧伤外科,口腔护理,神经、组织引导再生等。目前特别是在组织工程材料方面胶原得到了广泛的应用研究。在前期胶原蛋白提取研究基础上,本论文以双缩脉法测定粗提取液中蛋白质的浓度作为优化检测手段,进一步优化提取条件,验证提取结果和稳定提取工艺。实验结果表明酶配比为1:10(酶与牛膜重量比)、酸浓度为0.7mo1/I、提取反应时间为5d的搭配条件为最优提取条件.为了提高胶原的力学强度和抗降解能力,使用戊二醛进行胶原的交联实验研
2、究,通过扭辫热分析、DSC和IR测试分析,结果表明戊二醛在胶原分子链之间以C=N键形式交联,胶原交联后抵抗酶降解和生理盐水降解的能力增强,以。.2%浓度的戊二醛交联60min效果最佳,。本文利用低温等离子体技术将胶原蛋白接枝到聚氨醋表面,对胶原蛋白进行改性,制备了胶原一聚氨酷复合材料。通过对等离子体处理后表面活性基团摩尔数、表面表面接枝胶原的接枝密度和处理后胶原与聚氨酷粘接强度的测定,表明等离子体处理对胶原一步法接枝效果较佳,最佳处理功率为60W,处理时间为5min。同时由表面XPS.IR分析表明表面通过过氧自由基与胶原分子发生反应而接枝.通过动物埋植实验观察和组织切片透射电镜分析,表明接
3、枝涂敷胶原的聚氨醋生物相容性较好,材料与组织粘附紧密,胶原在聚氨酷与生物组织之间形成了过渡层,并且胶原分子链牢固的附在聚氨醋表面,胶原蛋白能引导组织细胞再生,而医用聚氨酷生物惰性大,与组织粘附性能不佳。因而可以利用聚氨醋生物良好的稳定性、低毒性和胶原的可降解性、组织引导功能,制备胶原一聚氨酷复合材料作为细胞载体、骨架的组织工程材料。关键词胶原:医用聚氨醋;胶原酶;等离子体:组织工程材料哈尔滨工业大学工学硕士学位论文AbstractCollagens,themajorstructuralproteinsofconnectivetissuessuchastheskin,bone,cartila
4、ge,tendons,ligamentsandbloodvessel,arewidelyappliedasbiomaterialsinvariousfieldsofclinicalmedicine,likeinburnsurgery,dentalcare,nerveandtissueregeneration,etc.Especially,collagenwasusedinthetissueengineeringmaterialsnow.Inthebasicofformerlyextractingresearch,theparametersofextractionwerefurtheropt
5、imizedinthispaper,withinspectingtheconcentrationofproteinofextratingsolutionbymethodofcondensed-dicarbamide.Theresultsshowedthatthebestcompoundingratioofenzymewas0.1,thebestconcentrationofaceticacidwas0.7mo1/1,andthebesttimeofextracctionwas5d.Toenforcetheanti-degradationandmechanicstrength,Glutara
6、ldehydewasusedtocrosslinkcollagen.Theexperimentsoftorsionbraid,DSC,andIRshowedthatglutaraldehydecrosslingkedthechainsofcollagenmoleculesbythemethodofC=Nbonds.Aftercollagenwerecrosslinkedbyglutaraldehyde,theabilityofbiologicaldegradabilityresistancehadincreased.Onthewholethebestconcentrationofgluta
7、raldehydewas0.2%,thebesttimewas60min.Theplasmatechniquewasusedinthetreatmentofpolyurethanefilmtograftcollagenchainstoenhancethebiocompatibility.Thetestingresultsoftheactivablegroupsinthesurface,thegraftedamountsa