胶原蛋白的提取及其生物膜材料研究

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1、四川大学博士后学位论文胶原蛋白的提取及其生物膜材料研究姓名：穆畅道申请学位级别：博士后专业：生物材料指导教师：鲍朗20030501j肼_s>泌痧内容摘要胶舔作为天然静动物生物质资源，在生物材料等领域的研究和应用深受蹋内外关注。胶原显著的低免疫原性、生物相容性、可降解性，及止盘功能是依为生物零孝将褥优势，并显奁生耪体内容易被吸收、亲水性强、无毒安全性好，因此，已被认为是最有朋的天然生物材料之一。在磷究狡藤的撵取、溶液纯学物理性潢帮生耨貘方爵进行了～些创新性研究。取得的主要学术创见如下：l。酸溶瓣翔酶处瑾法提取羧藤，条件控制在pH=1．9~2．1，酶雳量40：1，时间30

2、h较为合适。用氨基酸分析、傅立叶变换红外定性分据、差示疆播量热测定咒魏手段对冀表征，显示黢滠样菇基本保留了三殷螺旋结构，与天然胶原的相符性较好。2。将LLS；}嚣AFM终合露予磅究穗溶液中醒获蛋自在等邀点醛透豹自聚集过程，证实在等电点明胶是以两性离子的形式存在：由pH变化疆导戆聚集是基予静电佟震戆分子闻熬透簇聚集过程；通过AFM直接观察到了酸溶胶原及其聚集体的高分辨图象。3。应用体积捺阻色谱(SEC)、聚嚣烯酝胺凝胶毫泳(SDS一熬娆)、高效液相与电喷雾质谱联用(HPLC／ESI—MS)这三种蛋白质分子量分橱测试技术，来表征胶原承磐产物的分子量，探索出较好的测定胶原水

3、解产物分子量的方法；为建立水解反应条件的控制与水解产物分子量之闯的关系提供一定的依据。4．用提取出的胶原样品冷冻干燥成膜，根播生物膜材料的特性要求，论文选用了具有独特和多样的生理、药邂活性的单宁酸为交联剂。单宁酸浓度为12．5％时，k可达到8l℃，与戊二醛交联胶原膜的Tm接近，表明单宁酸交联胶原有较高热稳定性，且抗酶解能力强，生物稳定性好，适予用作生物材料。关键谣：胶原挺取激光光散射簇子力显微镜分子量革宁酸胶原麟生物材料AbstractAsakindofnaturalanimalbiomassresource．collagenisfascinatingbothinac

4、ademicresearchandimportantapplicationsinbiomaterials．Theexcellentantigenicity,biocompatibility,degmdabilityandhemostasiaabilityaretheadvantagesofcollagenasbiomaterials，duetoitsspecialbiologicalstructure．Itiseasilyabsorbable，nontoxicinthebod弘andhydrophilic，makingcollagentheprimaryresourc

5、einmedicalapplications．Byresearchingonextractingcollagenffompigskin．itschemicalphysicalpropertiesandmakingcollagenfilm。someoriginalresultsaresummarizedasfoIlows：一Enzymedosage，durationandpHvariation。thekeyfactorseffectingpreparationprocess，werestudied．Theresultsindicatedthat，toenzymaticp

6、rocessing，pHl．9—2．1，30hEpepsinata40：1weightratioofdryweighttissuetoenzymecouldfu嘲lmanufacturingrequirement．Byaminoaciddetermination，FT-lRanalysisandDSC，theoriginaltriplehelixstructurewasshowedwelfpreservedandcharacteristicsofthecollagensamplewereshowedmatchingthenativecollagen。—一heeriec

7、tofpHongelatinseif-association}ndilulesolutionwasjnvestigatedforthefirsttimetotheauthor’sknowledgebyLLSandAFM．1tshowsthat，attheisoelectricpointfIEP)ofgelatin，theampholytemacromolecuiescollapseduetoelectrostaticattractionforcesofoppositelychargedgroups。andtheself-associationoccu