兔雪旺细胞体外培养及复合PLGA导管修复面神经缺损的实验研究

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1、第四军医大学硕士学位论文兔雪旺细胞体外培养及复合PLGA导管修复面神经缺损的实验研究姓名：马立申请学位级别：硕士专业：口腔临床医学（颌面外科）指导教师：刘彦普2003.5.1狻麓赣蠢囊秉零学较严粪篓学菇与嚣褰鳇辩学遂蠢，零天摹翟囊矍交穗烫支爨燕令轰在导并指斟下进行的研究工作及取懈的研究硪粜。尽我所潮，除了文巾特别加以标注秘致避鳇地方外。论文中不键窘其健人g经发表或撰写遥鳇研究壤聚，萎鬈害零^馥穗矗琶攀镶学楚霸冀穗鬻筵覆瓣蒜魏蠛杀。毒嚣一嚣王痒魏嚣志对本研究所馓的任何贡献均已在论文中作了嘲鞠的说明并裁示了致谢。孛壤学楚谂交与资辩蓉奏番赛之楚，零A黎攥一臻耱荚凑狂。论文作

2、者签各：纛≯纛凝旁凝纛囔日期：型本人完盒了解第四军医大学有关保护知识产权朐规定，即：研究生谯校攻读攀餐囊褥论文王赛嚣蘩落产较蕈毽瓣篆嚣军嚣犬学。奉蠡攥疆孳壁赛较曩，蠢表论文或糗阉论文工作戚果耐署名单位仍然为第四军医大学。学校肓权繇留送交论文越篑娜终，笼谗论文攘查弼耱撰瞬；学较霹鞋公i矗论文越全邦壤赫分雍吝{髹寰荐客菰舞》，霹瑗罴簧彩羁l、黎攀藉筵齄菱蘩手援镙存论文。瓷文粪砉骚之I霉舞叛学一随坠坐一一⋯⋯．．篓塑鬟篓奎兰堡主婆塞．。⋯。——●——-_____*_——___‘_—●w__H_Ⅲ___⋯__’。H_。。^。_M¨“¨_H。”’_。。‘—_’’。”’一一一缎I

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5、，通常采用自体神经(耳大、腓肠神经等)移植的办法。f但它也有许多问题：如供区神经来源有限，需要牺牲有正常功能的神经，以及供区麻木、疤痕等后遗症。m织工程的兴起，为解决这一问题提供了更广阔的思路。本实验研究了从新生兔坐骨神经来分离培养雪旺细胞(SchwannCells，SCs)的方法，并探讨碱性成纤维细胞生长因子(basicfibroblastgrowthfactor，b-FGF)对Scs的生物学作用；同时以聚乳酸．聚羟基乙酸共聚物(polylacticacid．CO．glycolicacid，PLGA)导管，复合体外培养的雪旺细胞，构建组织工程化人工神经，用于修复面神

6、经缺损。／方法；取新生新西兰兔(1．3天)坐骨神经，单酶消化后进行培养，Ara-‘C和G418联合纯化去除FCs，bFGF刺激SCs增殖。采用细胞形态学观察、生长曲线测定、扫描电镜(SEM)、S．100染色等方法观察SCs的生物学特性并进行纯度鉴定；采用MTT法检测不同浓度下b—FGF对SC培养的生物学作用；PLGA导管复合SCs修复兔面神经lcm缺损，修复术后8周和16周采用大体观察、电生理、组织学染色形态学分析、透射电镜(TEM)评价面神经缺损修复效果。结果：新生兔坐骨神经来源的SCs经分离纯化后可培养出大薰高纯度SCs；b．FGF在一定浓度下，明显促进SCs的增

7、殖；SCs复合PLGA2第四军医大学硕士论文管修复面神经lcm缺损比单用PLGA管修复效果好；炉结论：胎兔坐骨神经中分离培养SCs来源确实；b．FGF对SCs有较强的刺激增殖作用；SCs能促进神经的再生及功能恢复，可作为神经组织工程的种子细胞；SCs+PLGA修复面神经缺损效果好，显示出较好的临床应用前景。关键词：细胞培养r组织工程i雪旺细胞，经修复、3@乞圳周神一一釜塑墨墨查兰堡圭黧壅．．_。_。___”_■-___。_1___-____。。。。““¨_。_“。。。。‘。_““。。______’‘’”。。’_●’’。。。。1⋯’1’_’’。。。。1