肌瓣复合BMP微球修复兔桡骨缺损的实验研究

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1、——一堑燮兰壁堕竺望竺笙塞英文缩写词表英文缩写B斟ScBMPCsAMsBMPMsVMFFBSCBBG一250DMEMDexrhBMPALPBSASEM&fiTP隅DMSO0DED下^(ABBREⅥATl0NS)英文全称中文全称bonemarrowSterncell骨髓基质千细胞bonemorphogeneticprotein骨形态发生蛋白cbitosafl—sodi“酊、alginate壳聚糖一海藻酸钠微球mjcrospheresbonemorphogeneticprotein骨形态发生蛋白微球microspheresvascularmu

2、scleflap带血供肌瓣fatalbovineserurs胎牛皿清coomassiebrilliantblueG250考马斯亮蓝dulbecco’Smodifiedeagle’SDMEM培养基mediumdexmaethasone地塞米松recombinanthumanbone重组入骨形态发生蛋白morphogeneticproteinalkalinepbospbatase碱性磷酸酶bovineserumalbumin牛血清白蛋白scanningelectronmicroscope扫描电子显微镜3一(4，5～dimethylthiazo

3、卜zyl)-2，四甲基偶氨唑盐5一diphenylterazoljumbromidephosphate～buffersaline磷酸盐缓冲液dimethySHlforte二甲亚砜opticaldensity光密度ethylenediaminetetra-aceticacid己二胺四乙酸二钠．2·第一军医大学焉士研究生学位论文肌瓣复合B肝微球修复兔桡骨缺损的实验研究(中文摘要)骨缺损是临床滩症之一，尤其是伴有局部软组织损伤严重的骨缺损治疗效果很差，因此必须寻找更为有效的治疗方法。骨形态发生蛋白(BMP)的异位诱导成骨活性已被多次实验所证实．

4、但到目前为止，Blip的临床应用效果仍不理想，缺少理想的载体系统是影响BMP诱导成骨效果的主要原因。因此，我们设计了本实验，希望在一定程度上解决这两个问题，达到以下两个目的：1．制备壳聚糖一海藻酸钠微球包裹BMP并检测其性质。2．制作带血供肌瓣复合BMP微球修复骨缺损的实验动物模型，并观察缺损部位的修复效果。实验分两个部分进行，首先需要制各BMP微球并检测其性质。采用乳化凝聚法制备壳聚糖一海藻酸钠微球并包裹B肝，体外检测其性质：由新西兰兔骨髓分离出骨髓基质细胞．与BMP微球及空白微球复合后体外培养，分别于3、6、9天做相差显微镜、MTT、

5、考马斯亮蓝、ALP检测，了解BMP微球与空白微球对骨髓基质细胞的影响。其次进行动物实验。取健康新西兰兔24只，共48只前肢随机分为四组：带血供肌瓣／删P微球／1日】

6、／ISc组、带血供肌瓣／B咿微球组、带血供肌瓣／单纯B妒组、带血供矾瓣／空自微球组。制作兔桡骨下段15鳓骨一骨膜完全性缺损，将去神经化的带血供指深屈肌肌瓣转位至缺损区，钝性分开肌瓣，注意保护肌瓣的血供。分别将需包裹的BMP徽球、空白微球、单纯BMP均匀散布在肌瓣内，细胞组另需复合骨髓基质细胞。术后2、4、8周采用大体观察、x线、组织学检查、光密度分析及生物力学检测等方法观察成

7、骨过程，评价骨缺损的修复情况。经过检测，得到如下结果：1．1IMP徽球形态较好，大小均一．平均粒径10．2pIll；B舻平均包埋率为69．14％；2．阴P微球与空白微球与兔骨髓基质细胞复合后细胞形态无明显异常，细胞数量随培养时间的延长而增加，空白微球对细胞的分化及分泌功能均无明显影响，而BMP微球对细胞合成蛋白功能及ALP的表达均有明显的促进作．3一第一军医太学硕士研究生学位论文用；3．以带血供肌瓣复合BMP微球修复了兔挠骨1．5mm的骨缺损；4．术后2、4、8周。带血供肌瓣／13MP微球tBMSc组与带血供肌瓣fBMP微球组修复兔桡骨缺

8、损的效果无明显差别，但均优于带皿供肌瓣／单纯BMP组与带血供肌瓣／空白微球组。通过本实验．我们可以得到如下的结论：1．BI','fP1微球具有良好的生物相容性，可以提高骨髓基质细胞的体外成骨能力。2，带血供肌瓣复合BlIP微球加或不加骨髓基质细胞时修复骨缺损的能力无明显差异，但都明显优于带血供肌瓣复合单纯BMP组、带血供肌瓣复合空白微球组。【关键词】带m供肌瓣；骨形态发生蛋白；骨缺损；骨髓基质干细胞t成骨；壳聚糖一海藻酸钠微球；骨形态发生蛋白微球第一军医大学碗士研究生学位论文—————————————————————————————^——

9、————。———————————————————————～——————————————～一Experimentalstudyontherepairofradiusdefectofrabbitw