异体脱蛋白松质骨复合纤维蛋白bmp修复兔桡骨缺损

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1、异体脱蛋白松质骨复合纤维蛋白BMP修复兔桡骨缺损【摘要】探讨以纤维蛋白复合脱蛋白松质骨作为骨形态发生蛋白(BMP)的载体修复兔节段性骨缺损。［方法］于36只青紫蓝兔两侧桡骨干处造成1.5cm缺损，采用三种方法进行处理：A组，植入脱蛋白松质骨、纤维蛋白、BMP的复合物；B组，植入脱蛋白松质骨；C组，空白对照。术后2、4、8、12、16周进行放射学、组织学和电镜检查。［结果］A组骨缺损区在成骨活跃程度、骨再生量和再生髓腔结构等方面均显著优于B组，使骨缺损得到了较彻底的修复。B、C两组均不能产生骨性愈合。［

2、结论］脱蛋白松质骨复合纤维蛋白是较理想的BMP载体材料，以三者的复合物修复骨缺损可达到满意效果。.L.编辑。【关键词】脱蛋白松质骨纤维蛋白BMP组织工程骨缺损修复Abstract［Objective］TorepairsegmentalbonedefectorphogeicprotEIn(BMP)andfibrin.［Method］Bonedefectsplantations:A,positeofdeproteinisedcancellousbone,BMPandfibrin;B,ofdeprotein

3、isedcancellousbone;C,blankcontrol.Thedefectsicroscopy,andelectron-microscopyat2,4,8,12,16plantationregeneratedmuchmoreneplantationandgotpletelyrepaired16plantationcouldn’tgetosseoustissuehealing.［Conclusion］Thepositeofdeproteinisedcancellousbone,bonemor

4、phogeicprotein(BMP)andfibrincanbeeffectivelyusedtorepairsegmentalbonedefect.Keyorphogeicprotein(BMP);tissueengineering;bonedefect;repair骨具有再生和修复能力，因肿瘤切除、外伤、骨异常生长所造成的骨缺损，在单纯依靠骨自行修复无法愈合的情况下，则需采用手术治疗。自体骨移植是一种较好的治疗方法，已被广泛应用于临床。但其来源有限，不能满足临床需求，而且对患者造成创伤，于是人们

5、把眼光转向能促进组织或细胞生长、分化和增殖的材料。本实验就异体脱蛋白松质骨复合纤维蛋白、BMP修复兔桡骨缺损的方法和机制进行探讨，以评价复合材料作为骨组织工程材料的作用。1材料和方法1.1植入材料的制备1.1.1异体松质骨的制备取青紫蓝兔(兰州生物制品研究所提供)脊柱骨、骨盆骨、长骨干骺端，剔除骨膜和软组织，去除其表面皮质骨，制成直径约0.5cm×0.5cm×0.5cm大小松质骨颗粒，用流动自来水反复冲洗骨粒4～5h，致无血渍浸出为止，将其放入蒸馏水三角瓶中，摇床上震动4～5h。其间每30min换蒸馏

6、水一次，再将其放入超声波清洗机中反复进行清洗，每次30min，清洗3～5次，自然晾干后，将其放入甲醇与氯仿(1∶1)混合液中，不时搅拌，12h更换混合液，倒弃混合液，蒸馏水冲洗骨粒3次，自然晾干。用0.6mol/LHCL脱钙5min，蒸馏水冲洗3次，自然晾干，转入30%过氧化氢中，不时搅拌，12h更换过氧化氢液一次，处理24h，蒸馏水冲洗3次，自然晾干，转入-80℃深低温冰箱冷冻保存。1.1.2BMP及纤维蛋白的提取按照Urist［1］报道的方法从小牛新鲜皮质骨中提取，提取物置-4℃保存。纤维蛋白原用

7、冷沉淀法自同种异体兔的血液中提取［2］。采集15只健康成年青紫蓝兔的抗凝全血并于3000r／min，离心10min，分离出血清，置-30℃冰箱冻存过夜，次日转入4℃冰箱缓慢融解，待彻底融解后，于4℃条件下离心，收集冷沉淀。冷沉淀用冷冻干燥机冻成干粉，再用重蒸水溶解，配成120mg／ml的纤维蛋白原溶液。1.1.3脱蛋白松质骨／BMP复合物的制备将深低温保存的异体脱蛋白松质骨取出，冷冻干燥机干燥，装入培养皿中，1.0×106rads60Co辐照(兰州辐照中心)，将100mg提取的小牛骨形态发生蛋白溶于1

8、0mL的4mol/L的盐酸胍溶液中，加入10g异体松质骨颗粒，4℃，充分搅拌混匀液体与固体成分，置冷冻干燥机内抽真空、透析、冻干24h，分装。1.1.4脱蛋白松质骨／BMP／纤维蛋白复合物的制备将处理好的异体脱蛋白松质／BMP复合物置于圆柱形模板内，浸没于纤维蛋白原中，按纤维蛋白胶的制备比例混入凝血酶，复合支架制备成功。1.2试验方法选用青紫蓝兔36只，体质量2～3kg不等，雌雄不限，随机分为3组。在无菌手术室中，速眠新-Ⅱ麻醉满意后，常规去毛、消毒、铺