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1、解剖与临床2005年第10卷第3期AnatomyandClinicsVol.10No.3195自体骨髓间充质干细胞复合去抗原牛松质骨载体修复兔桡骨节段性骨缺损1222江兵孔荣朱六龙张文志【摘要】目的:探讨以自体骨髓间充质干细胞(MSCs)复合去抗原牛松质骨载体(BCB)修复兔桡骨节段性骨缺损的效果。方法:抽取20只新西兰大白兔的骨髓并分离、培养、扩增和建立诱导MSCs,将其和BCB复合。手术建立兔双桡骨干15mm骨骨膜缺损的动物模型,实验侧植入MSCsPBCB,对照侧植入BCB,通过X线、组织学检查等
2、手段观察不同时相的骨缺损修复情况。结果:在第12周时,实验侧骨缺损得到骨性修复,对照侧则未能修复。结论:MSCs在体内能成骨,MSCsPBCB能有效地修复节段性骨缺损。【关键词】间充质干细胞;去抗原牛松质骨载体;骨缺损;修复【中图分类号】R318【文献标识码】A【文章编号】1671-7163(2005)03-0195-04RepairingRadialSegmentalDefectsinRabbitswithMesenchymalStemCellsandAntigen-extracitedBovine
3、CancellousBonecarrierJiangBing,KongRong,ZhuLiulong,etal.(DepartmentofOrthopaedics,AnhuiProvincialHospital,Hefei230001)【Abstracts】Objective:Tostudytheefficacyofantigen-extracitedbovinecancellousbonecarrier(BCB)loadedwithautologousbonemarrowmesenchymalste
4、mcells(MSCs)onthehealingofrabbitradialsegmentaldefects.Methods:AutologousMSCswereisolatedinvitro,thenimplantedintotheBCB.Anexperimentalmodelof15mmbonedefectwasmadeinthebilateralradiusof20rabbits.Intheexperimentalgroup,theMSCsPBCBwasimplantedintooneradia
5、lsegmentaldefectandtheBCBwasimplantedintotheotherone.Aftertheoperation,serialradiographicexaminationandhistologicalanalysiswereundertaken.Results:Intheexperi2mentalgroup,thebonedefectshealedby12weeks,butinthecontrolgroup,theydidnot.Conclusion:MSCscanfor
6、mboneinvivoandMSCsPBCBcanrepairsegmentaldefects.【KeyWords】Mesenchymalstemcell;Antigen-extracitedbovinecancellousbonecarrier;Bonedefect;Repair由于肿瘤、外伤等原因引起的大段骨缺损的修脱脂12h,8.8molPLH2O2脱蛋白24h,于0.6molPL盐复是骨科领域中一个常见而又棘手的问题。传统的酸内脱钙5min,用双蒸水反复冲洗至PH6.0,冻干制治疗方法有自体骨
7、移植、异体或异种骨移植等,均存成BCB后灭菌保存备用。在着局限性和不足之处。近年来,随着组织工程学1.2.2兔骨髓间充质干细胞的分离、培养和诱导:的发展,为解决大段骨缺损这一临床难题展示了一取3~4月龄健康的新西兰大白兔20只,体重约2.5条新的途径。为此,我们将兔自体骨髓间充质干细~3.0kg,雌雄不限。用2.5%硫喷妥钠(1mlPkg)静胞(MSCs)与去抗原牛松质骨载体(BCB)相结合,构脉麻醉后,在无菌条件下抽取新西兰大白兔双侧股建人工骨,探索修复兔桡骨节段性骨缺损的可行性。骨大转子处骨髓各2
8、ml,充分混匀置于含10%FBS1材料与方法的肝素化(25μPml)的DMEM基础培养液10ml中(内1.1实验材料含青链霉素各100μPml),再加含10%FBS的DMEM主要试剂:低糖DMEM培养液、胎牛血清、胰蛋基础培养液11ml混匀后接种于25ml培养瓶中,置白酶等,均是GIBCO公司产品。实验动物:新西兰于37.0℃、5%CO2的培养箱中孵育。4d后半量换大白兔(购自安徽医学研究所)。液,1周后完全换液、以后每隔3d换液1次,待细胞1.2实验方