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时间:2018-08-01
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1、同种异体间充质干细胞复合纤维蛋白修复骨缺损作者:窦强兵,孔荣,朱六龙,戴永立,沈勇【关键词】松质骨缺损 摘要: [目的]探讨骨髓间充质干细胞(mesenchymalstemcells,MSCs)的体外培养,以及同种异体MSCs复合纤维蛋白修复兔股骨髁松质骨缺损的效果。[方法]在日本大耳兔双侧股骨髁制作06cm×10cm松质骨缺损,左侧植入同种异体MSCs纤维蛋白复合物,右侧单纯植入纤维蛋白。分别于术后2、5、8周行放射学、组织学检查,以了解骨缺损修复情况。[结果]单纯植入纤维蛋白的一侧不能自行愈合。植
2、入复合物的一侧术后2周可见少量骨组织生成,5周可见大量模糊骨痂,术后8周骨缺损基本愈合。除少量炎性细胞浸润外,各期均未见明显免疫排斥反应。[结论]同种异体MSCs复合纤维蛋白可有效修复兔股骨髁松质骨缺损,8周内机体的免疫排斥反应较弱。 关键词:松质骨缺损;间充质干细胞;纤维蛋白;同种异体10 Abstract:[Objective]Todiscussbonemarrowderivedmesenchymalstemcells(MSCs)cultureinvitroandthecurativeeffect
3、ofrepairingcancellousbonedefectsinrabbitswiththecompoundofallogenicMSCsandfibrin.[Method]MSCswereisolatedandcultureexpantedfromrabbitbonemarrow.Cancellousbonedefectswerecreatedonbilateralfemurcondylarin15Japanesebigearrabbits,theleftbonedefectsweretreated
4、withallogenicMSCsandfibrin,therightweretreatedwithfibrinonly.Thebonedefectswereexaminedradiologicallyandhistoloyicallyatthe2nd,5th,8thweekafteroperation.[Result]Thedefectswithonlyfibrinimplantationcouldn'thealspontaneouslyandnoboneformationwerefoundatanyt
5、imepoint.InthedefectswithcompoundofMSCsandfibrinimplantation,therewereafewboneformationwithin2weeks.Bythe5thweekplentifulcalluswerefound,attheendofthe8thweek,thedefectshealed.Therewasnoimmuneresponeexceptafewinflammatorycellsinfiltrate.[Conclusion]Thecomp
6、oundgraftsofallogenicMSCsandfibrinshowslowimmunogenicitywithin8weeksandisaneffectivemethodforrepairingcancellousbonedefects. Keywords:Cancellousbonedefect;Mesenchymalstem10cells(MSCs);Fibrin;Allogenic 骨缺损常发生于创伤、感染、肿瘤切除等疾病,是骨科常见难题,在治疗上近年兴起的以间充质干细胞(mesenc
7、hymalstemcells,MSCs)为种子细胞的组织工程骨修复具有广阔的临床应用前景。本实验采用同种异体MSCs与纤维蛋白复合物修复兔股骨髁骨缺损,观察异体MSCs在体内的成骨及免疫情况,为临床使用同种异体MSCs提供实验依据。 1材料和方法 11MSCs的分离培养 4个月龄青紫蓝兔1只,重20kg,用含肝素30u/ml的注射器于股骨粗隆抽取骨髓2ml,加入含10%胎牛血清和青霉素及链霉素的DMEM培养基(Gibsco公司)中吹打混匀,置培养瓶中,37℃、5%C02、95%相对湿度的孵育箱内培养
8、。5d后半量换液,1周后全部换液,以后每周换液2次,逐步去除未贴壁细胞。14d后贴壁细胞汇合到90%生长面积时,用025%的胰蛋白酶消化,按1∶2传代,取第2代MSCs备用。 12MSCs纤维蛋白复合物的制备10 取第2代细胞计数后制成50×106/ml的细胞悬液,按1∶1与纤维蛋白(医用安可胶)混合,置12孔培养板,37℃孵育箱内聚合1h,收缩过夜后备用。 13骨缺损模型的制作及处理 选用4~5个月龄日本大耳兔15只
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