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时间:2019-05-12
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1、重症急性胰腺炎大鼠TNF-α和ICAM-1的表达及其意义【摘要】目的通过重症急性胰腺炎大鼠探讨TNF-α和细胞间粘附分子-1(ICAM-1)对本疾病的影响。方法20只SD雄性大鼠分2组,每组10只。普通SAP组以5%牛磺胆酸钠建立重症急性胰腺炎(SAP);病因加重组以10%牛磺胆酸钠制模。制模10h后处死大鼠,检测其血液生化和细胞因子浓度,观察组织脏器的病理变化及组织TNF-α和ICAM-1的表达。结果病因加重组大鼠血清的谷丙转氨酶、肌酐和TNF-α与普通SAP组相比有明显升高。同时,该组大鼠的肝脏、肺和肾脏病理评分显著大于普通SAP组。并且其脏器组织
2、中TNF-α表达和ICAM-1的表达也明显增加。结论TNF-α及ICAM-1可能在胰腺炎重症化及MODS发生发展过程中起重要作用。【关键词】重症急性胰腺炎;肿瘤坏死因子α;细胞间粘附分子-1【Abstract】ObjectiveToinvestigatetheexpressionandsignificanceofTNF-αandICAM-1onorganfunctionofsevereacutepancreatitisbyestablishinganimalmodelsofthedisease.MethodsTwentySDratsweredivide
3、dinto2groupswith10ratseachgroup.TheratsingroupAweregivenretrogradeinjectionof5%sodiumtaurocholateintothepancreaticductas9sereveacutepancreatitis(SAP)model.TheratsingroupBweregivenretrogradeinjectionof10%sodiumtaurocholateintothepancreaticduct.Thechangesinorganfunctionswereobserv
4、edbybiochemistryandpathologicalexaminationwasmade10hourslateraftermodeling,andtheexpressionofTNF-αandICAM-1inpancreasandotherorganswasexaminedbyimmunohistochemistry.ResultsThesevereorganpathologicallesionwasfoundintheratsingroupBwhencomparedwiththoseinratsofGroupA.ConclusionTNF-
5、αandICAM-1mayplayanimportantroleintheorgandysfunctioninsevereacutepancreatitis.【Keywords】severeacutepancreatitis;TNF-α;ICAM-1重症急性胰腺炎(severeacutepancreatitis,SAP)是外科急腹症中最为严重的疾病之一,死亡率极高。Isenmann[1]认为严重的胰腺坏死正是导致脏器功能早期发生障碍和衰竭的重要因素。胰腺组织受损激活单核-巨噬细胞系统的炎症反应,合成和释放多种促炎因子如TNF-α、白介素-1等,从而刺激
6、粒细胞活化,激活毛细血管内皮因子,启动炎症反应,诱发全身炎症反应综合征(systemicinflammatoryresponsesyndrome,SIRS)。本研究旨在通过动物实验探讨TNF-α和ICAM-1对SAP的影响。91材料与方法1.1材料雄性SD大鼠20只,体重300~400g,购自中科院上海分院实验动物部。牛磺胆酸钠(纯度99%),购自Sigma公司,用生理盐水配制成5%和10%牛磺胆酸钠溶液。谷丙转氨酶及肌酐测定试剂盒,购自上海生物制品研究所。α-淀粉酶试剂盒,购自上海科华-东菱诊断用品公司。大鼠TNF-αkit:,购自Biosource
7、公司。TNF-α和ICAM-1一抗,购自SantaCruz。抗山羊二抗,购自华美生物工程公司。主要仪器包括低温高速离心机(Beckman公司)、uQuant酶标仪(BIO-TEK公司)、DU640分光光度计(Beckman公司)、CHK2-F-GS光学显微镜(Olympus公司)、BX50病理摄片仪(Olympus公司)。1.2方法1.2.1实验模型制备和分组20只大鼠随机分成两组,每组10只。实验前12h禁食,自由饮水。动物以乙醚吸入麻醉,正中切口进腹,找到胰胆管。于胰胆管远端用无损伤金属夹将其夹闭,近端注射5%牛磺胆酸钠,剂量为1ml/kg体重,为
8、普通SAP组。注射时间均为60s,匀速推完,保持5min后拔出穿刺针,去除金属夹。缝合腹壁各层
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