鸡干扰素α和γ在家蚕中的表达及其抗病毒活性检测

《鸡干扰素α和γ在家蚕中的表达及其抗病毒活性检测》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、密级:论文编号:中囯农业科学院学位论文鸡干扰素a和y在家香中的表达及其抗病毒活性检测ExpressionofChickenInterferonaandInterferonyinSilkwormandtheAntiviralActivityAssay硕士研究生：李皓洋指导教师：张志芳研究员申请学位类别：理学硕士专业：生物化学与分子生物学研究方向：分子病毒学培养单位•.生物技术研究所研究生院2015年6月独创性声明本人声明所呈夂的论'足我个人在导师指导下迸行的研宄丨:作及取得的研宄成果《尽我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地

2、方外，论丈中不包含其他人1~^发衣或撰'弓过的研宄成果，也不包含为获得屮国农业科学院或丨〔:它教育机构的$位或证I晒使用过的材料-与我一同:丨:作的丨同志对本研宂所做的往何页献均己在论交中作了明确的说明并表小了谢总=研艽生签名：时间：^丨$年<3L」关于论文使用授权的声明本人完全了解中W农收科学院有关保®、使用学位论文的规定，即：中_农此科学院有权保留送交论文的复Wt.和磁盘，允许论文被查阅和借阅，可以采用影印、缩印或扫描等复制乎段保存，汇编学位论文。同意中国农业科学院可以W不M方式在+同媒体丨发表y传播学位论文的全部或部

3、分内容，研宂生签名A/5"年4/J%中国农业科学院硕土学位论文评阅人、答辩委员会签名表论文题W鸡T扰素《和Y在家蚕中的表达及其抗病毐活性检测生物化学与论文作者李皓洋专业研究方向分f病毒学分子生物学指导教师张志芳培养单位（研宂所）生物技术研究所硕（博）姓名职称单位专业签名导^ip评硕玨口_导口阅硕和人博导口答辩卞席晏5：硕导□生物化学与&都师范大学博导0分子生物学硕导口陈二风教授中[i农业大学微牛.物学硬导口屮H科学院动物研宄生物化学与秦启联研宄W博导0所分了•生物学M—答硕导0生物化学与许盂研宂员中W农业科学院博导□分子生

4、物学辩硕导口作物遗传齊叶兴国研究员中国农业科学院博译0种一委硕导口生物化学4王海洋研宄员中国农*科学院博导0分子外:物学W硕导0生物化学与张伟研宄员屮M衣业科学院博导□分/•生物学会议记录（秘书）个:轶女论文符辩时M地点2015年5月21B中国农业科学院生物技术研究所216室密级:论文编号:中国农业科学院学位论文鸡干扰素α和γ在家蚕中的表达及其抗病毒活性检测ExpressionofChickenInterferonαandInterferonγinSilkwormandtheAntiviralActivityAssay硕士

5、研究生：李皓洋指导教师：张志芳研究员申请学位类别：理学硕士专业：生物化学与分子生物学研究方向：分子病毒学培养单位：生物技术研究所研究生院2015年6月Secrecy:No.ChineseAcademyofAgriculturalSciencesDissertationExpressionofChickenInterferonαandInterferonγinSilkwormandtheAntiviralActivityAssayM.S.Candidate：HaoyangLiSupervisor：ZhifangZhangMa

6、jor：BiochemistryandMolecularBiologySpecialty:MolecularVirologyJune2015摘要随着养鸡业的发展，鸡类疾病的防治越来越引起人们的重视。干扰素是一类多功能的细胞因子，在抗病毒、肿瘤和寄生虫方面都有良好的使用效果，对各种养鸡业常见的疾病，如新城疫、禽流感等都有良好的治疗作用。因此，开发高活性的鸡干扰素制品用于鸡类疾病的防治具有良好的应用前景。本研究选取GenBank数据库中的ChIFN-α（GenBank：NM_205427.1）和ChIFN-γ（GenBank：

7、NM_205149.1）基因序列，按家蚕密码子偏好性对其进行优化。利用OptimumGeneTM方法，将ChIFN-α基因和ChIFN-γ基因的CAI值分别提高到0.88和0.89，调整ChIFN-α基因和ChIFN-γ的GC含量分别为49.13％和42.79％。同时，替换掉序列中的稀有密码子和能使mRNA产生发夹结构的密码子，并去除原始序列中的常用限制性内切酶酶切位点，然后采取化学合成法合成用于表达的完整的ChIFN-α和ChIFN-γ序列。将合成的ChIFN-α和ChIFN-γ序列插入杆状病毒基因组形成重组病毒，利用杆

8、状病毒多基因表达技术在家蚕体内共表达ChIFN-α和ChIFN-γ。表达产物经Westernblotting检测，证明ChIFN-α和ChIFN-γ成功在家蚕内表达。利用CEF/VSV-GFP系统6检测表达产物的抗病毒活性，发现家蚕共表达的ChIFN-α和ChIFN-γ效价可达7.64×10U/mL。利