水稻两个mirna靶基因功能分析载体的构建及遗传转化

《水稻两个mirna靶基因功能分析载体的构建及遗传转化》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、一，声．＇．Ｉ＾、、＇．‘．瓦－＊？．、；分类号学号Ｓ２０１２２９１：，四川农业大学硕：±１学位论文水稻两个ｍｉＲＮＡ帶基因功能分析载体的构建及遗传转化民ｉｃｅｔｗｏｃａｒｒｉｅｒｃｏｎｓｔｒｕｃｔｉｏ打ｏｆｍｉＲＮＡｔａｒｇｅｔｅｎｅｓｆｕｎｃｔｉｏｎａｎａｌｙｓｉｓａｎｄｅｎｅｔｉｃｇｇｔｒａｎｓｆｏｒｍａｔｉｏｎ．、－＞—＇？ｔｔｆ李敬？＊．－？．＇－？指导教师王文明研究员导师组王义明李燕巧晶四川农业大学学科

2、专业植物病理学研究方向植物抗病性及利用２０１５年６月；—、’、‘：－一－．ｙｒ户一－Ｖ１＞’’’：Ｖ．；非４，；，巧，—论文独创性声明本人郑重声明：所呈交的学位论文是我个人在导师指导下进行研究工作所取得的，成果。尽我所知，除了文中特别加Ｗ标注和致谢的地方外学位论文中不包含其他个人或集体己经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得四川农业大学或其它教育机一构的学位或证书所使用过的材料。与我同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示了谢意。＂如研究生签名

3、：＾＾嫁＾／户年（月《日关于论文使用授权的声明，目本人完全了解四川农业大学有关保留：学校有权、使用学位论文的规定Ｐ保留并向国家有关部口或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅，可１＾＾采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。同意四川农业大学可Ｗ用不同方式在不同媒体上发表。、传播学位论文的全部或部分内容？＾本论文不保密。□本论文保密，在年解密后适用本授权。＿＂＂（请在Ｗ上□内划Ｖ）Ｓ研究生签名：毒和如皆年谷月曰导师签名：Ｗ年月日目录摘要５Ａｂｓｔｒａｃｔ６符号

4、说明７１文献综述８１．１植物的抗病性８１丄１病原相关分子模式所激发的免疫反应（ＰＴＩ）９１丄２效应因子激发的免疫反应（ＥＴＩ）９１丄３植物获得性抗性（ＳＡＲ）１１１．１．１４水稻中与稻癌病相关的先天免疫反应２１．２民ＮＡ干涉技术研究１５１．２．１艮ＮＡ１６ｉ的作用机理．２２ＲＮＡ１１．ｉ的技术特点８１．３Ｍｉ灯ｏＲＮＡ的研究进展２０ｉｃｒｏＲＮＡ的发现２０Ｏ．ｌＭＩ．３．２ＭｉｃｒｏＲＮＡ的合成２０１．３．３ＭｉｃｒｏＲＮＡ的作用机制２２１４Ｍ

5、ｃｏＲＮＡ在植物中的作２２．３．ｉｒ用１．４论文选题依据及研究的目的意义２３２材料与方法２４２．１实验材料２４２丄１水稻材料２４２．１．２遗传转化体系中菌株和质粒载体２４１２丄３分子生物学试剂２４２丄４主要实验仪器设备２５２丄５培养基及其抗生素２５２；２６．２实验方法２６．２．１水稻材料培养：２２．２．２水稻ＤＮＡ提取２６２．２．３水巧总ＲＮＡ提取，反转为ｃＤＮＡ２６２．２．３．１水稻总ＲＮＡ提取的准备２６２．２．３．２水稻总ＲＮＡ提取步骤２６

6、２．．２３３ＲＮＡ纯化及反转录２７２．８．２４相关克隆载体的构建２２．２．４．１目标基因的克隆及回收纯化２８２．２Ａ２大肠杆菌感受态的制备巧２．２Ａ３大肠杆菌的转化２９２．２．４．４农巧菌感受态的制备３１２．２Ａ５农）３１杆菌的转化（电转２．２Ａ６农杆菌的菌落ＰＣＲ检测３１２．２．５本生烟瞬时表达３２２．２．６农杆菌介导的水稻遗传转化３２２．．２．６１主要涉及的培养基３２２．２．６．２水稻愈伤组织的诱导３３２．２．６．３转化愈伤组织３３２．２．７对遗传转化产

7、生的水稻植株进行阳性鉴定３４２．２．７．１潮霉素初筛３４２２．２Ｊ．２水稻转基因植株经行ＰＣ民鉴定３４３结果与分析３５３．１ｍｉＲＮＡ１６０禪基因ＬＯＣＯｓ０６ｇ４７１５０和ｍｉＲＮＡＷＳ鞭基因ＬＯＣＯｓ０４４８４１０＿＿ｇ过表达载体的构建及亚细胞定位３６３丄１载体构建％３丄２亚细胞定位３７３．２ｍＨｌＮＡ１６０ＬＯＣＯｓ０６４７１５０ｍＬＯＣ鞭基因和ｉＲＮＡ３９８靴基因Ｏｓ０４４８４］０＿ｇ＿ｇ过表达突变体载体的构建３９３．３ｍｉＲＮＡ１６０祀基因

8、ＬＯＣＯｓ０６４７１５０和ｍｉＲＮＡ３９８鞭基因ＬＯＣＯｓ０４４８４１０＿ｇ＿ｇＲＮＡｉ载体的构建４０３．４农杆菌介导的水稻遗传转化４１３１．４．转