仿刺参生长相关基因的克隆与表达

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4、寺某．苗．护荷鴻言诚１巧Ａ锭把墳？，尊身分类号：学校代码：10165密级：学号：201211001055硕士学位论文仿刺参生长相关基因的克隆与表达作者姓名：李乐学科、专业：海洋生物学研究方向：海洋动物分子生物学导师姓名：赫崇波研究员2015年5月辽宁师范大学硕士学位论文摘要仿刺参(Apostichopusjaponicus)俗称刺参，属于棘皮动物门(Echinodermata)，海参纲(Holothuroidea)，循手目(Aspidochirota)，刺参科(Stichopodidae)，仿刺参属(Apostichopus)。仿刺参是一种非常重要的海洋经济棘皮动物，近十

5、几年仿刺参生长的研究取得较大进展，尤其是水温、盐度、光照、附着基、养殖密度和饵料等环境因素对刺参生长影响的相关研究已经较多和深入，在遗传和发育生物学方面的研究也有一定进展。但是，关于生长方面的分子遗传学研究非常少。细胞周期蛋白B(CyclinB)、卵泡抑素(Follistatin，Fst)和下效应蛋白(Tensilin)基因是参与生长调控的相关基因，在刺参的生长发育过程中起着重要作用。CyclinB主要通过控制细胞分裂G2/M这个转换点来调控细胞分裂，是真核细胞周期运转中起关键作用的调控因子。卵泡抑素是一种富含半胱氨酸的糖基化单链多肽，是转化生长因子β超家族成员之一，抑制促卵泡素

6、(FSH)的分泌。下效应蛋白是一种胶原纤维结合蛋白，是由仿刺参真皮的内部的一层异变的胶原组织产生。本实验以仿刺参为原料，利用分子生物学技术，首次克隆了cyclinB、follistatin、tensilin基因，获得了3个基因cDNA全序列。通过生物信息学分析发现，cyclinB基因包含一个717bp的开放阅读框，编码一个由238个氨基酸组成的蛋白，follistatin基因包含一个1254bp的开放阅读框，编码一个由417个氨基酸组成的蛋白，tensilin基因包含一个822bp的开放阅读框，编码一个由273个氨基酸组成的蛋白。对这三种基因编码的蛋白质进行预测分析。Cyclin

7、B包括一个CYCLIN功能结构域，无信号肽无跨膜结构域。Follistatin包括6个功能结构域，按顺序分别是FOLN、KAZAL、FOLN、KAZAL、FOLN、KAZAL结构域，有信号肽无跨膜结构域。Tensilin包括一个NTR功能结构域，有信号肽无跨膜结构域。用实时定量PCR（Real-TimeqPCR）技术，对cyclinB、follistatin、tensilin基因在大小仿刺参不同组织的表达量分别进行研究。发现cyclinB基因在大个体仿刺参中的相对表达量要略高于小