慢病毒shrna干扰pgc-1α表达在dr中的作用

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1、分类号：R774.1学校代码：10392学科专业代码：100212学号：2120503730硕士学位论文慢病毒ShRNA干扰PGC-1α表达在DR中的作用TheRoleofLentiviralSh-RNAInterferenctheExpressionofPGC-1αinDR学位类型：医学硕士所在学院：医学技术与工程学院申请人姓名：叶晓雨学科、专业：眼科学导师：黄焱教授研究起止日期：2013年8月至2014年12月答辩委员会主席：XXX教授答辩日期：2015年6月XX日二○一五年六月目录英文缩略一览表⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

2、⋯⋯⋯⋯1中文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯3英文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯5第一部分PGC-1αShRNA慢病毒表达载体的构建与鉴定前言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯8材料及方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯9结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯11第二部分慢病毒ShRNA干扰PGC-1α在内皮细胞与RPE细胞中的表达前言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯12材料及方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯14结

3、果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯22第三部分慢病毒ShRNA干扰PGC-1α在糖尿病大鼠视网膜中的表达前言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯32材料及方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯33结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯36讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯44结论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯49参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯51综述⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯55致谢

4、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯64英文缩略一览表缩略语英文全称中文名AGEsadvancedglycosylationendproducts高级糖基化终末产物BSAbovineserumalbumin牛血清白蛋白cDNAcomplementaryDNA反向转录脱氧核糖核酸DABDiaminobenzidine二氨基联苯胺DEPCdiethypyrocarbonate焦碳酸二乙酯DMEMdulbecco'smodifiedeaglemedium细胞培养基DNAdeoxyribonucleicacid脱氧核糖核酸DR

5、diabeticretinopathy糖尿病视网膜病变EGR-1earlygrowthresponsivegene-1早期反应基因-1ERKextracellularregulatedproteinkinases细胞外调节蛋白激酶GCLGanglioncelllayer神经节细胞层HIFhypoxiainduciblefactor低氧诱导因子HIVHumanImmunodeficiencyVirus人类免疫缺陷病毒HUVECHumanUmbilicalVeinEndothelialCells人脐静脉内皮细胞INLinnernuclea

6、rlayer内核层IODintEGRalopticaldensity积分光密度IPLinnerplexiformlayer外丛状层MAPKmitogen-activatedproteinkinase丝裂原活化蛋白激酶minminutes分钟MOImultiplicityofinfection感染复数mRNAMessengerRNA信使核糖核酸NADPHreducednicotinamide-ademinedinucleotide还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷phosphate酸磷酸1NF-κBnuclearfactor-kappaB核因子-

7、κBONLouternuclearlayer外核层PGC-1αperoxisomepreliferativeactivatedreceptor-gamma过氧化物酶体增殖物激活受coactivator-1alpha体γ辅助激活因子-1αPBSphosphatebufferedsolution磷酸盐缓冲液PCRpolymerasechainreaction聚合酶链式反应PKCproteinkinaseC蛋白激酶CPLphotoreceptorlayer感光层PMSFphenylmethanesulfonylfluoride苯甲基磺酰氟P

8、PARperoxisomeproliferators-activatedreceptor过氧化物酶体增殖剂激活受体RAGEreceptorforadvancedglycosylationendproducts高级糖基化终