《基于氨基酸平衡的鸡肉粉替代鱼粉的配合饲料对凡纳滨对虾生长性能的影响》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。
学校编码10390分类号S963学号201211908022密级集襄大孝硕士学位论文基于氨基酸平衡的鸡肉粉替代鱼粉的配合饲料对凡纳滨对虾生长性能的影响指导教师-叶继丹研宄员作者姓名：林建伟申请学位级别:硕士学科专业:水产养殖研究方向:论文提交曰期:2015年05月04日论文答辩日期:2015年06月08日学位授予单位-集美大学学位授予日期:2015年06E答辩委员会主席:艾春香教授论文评阅人 学术诚信声明兹呈交的学位论文，是本人在导师指导下独立进行的研究工作及取得的研究成果。除文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他个人或集体已经发表或撰写过的研究成果。本人依法享有和承担由此论文产生的权利和责任。声明人（签名）：1樣命时间:y&l^,o、>T保护知识产权声明本人完全了解集美大学有关保留、使用学位论文的规定，即：学校有权保留送交论文的复印件和磁盘，允许论文被査阅和借阅，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。同意集美大学可以用不同方式在不同媒体上发表、传播学位论文的全部或部分内容。作者（签名）导师（签名）••^吋间： 硕士学位论文基于氨基酸平衡的鸡肉粉替代鱼粉的配合饲料对凡纳滨对虾生长性能的影响CompleteReplacementofFishMealbyPoultryby-ProductMealinPracticalDietsBaseduponanAminoAcidBalanceforPacificWhiteShrimpLitopenaeusvannamei学科门类：农学作者姓名：林建伟指导教师：叶继丹研究员学科专业：水产养殖研究方向：水产动物营养与饲料学学位授予单位：集美大学论文答辩日期：2015年06月08日 基于氨基酸平衡的鸡肉粉替代鱼粉的配合饲料对凡纳滨对虾生长性能的影响摘要本文以凡纳滨对虾（Litopenaeusvannamei）为试验动物，通过在其饲料中补充晶体或包被氨基酸（必需氨基酸Essentialaminoacids,EAA;非必需氨基酸Nonessentialaminoacids,NEAA），探讨鸡肉粉完全替代鱼粉时饲料氨基酸的平衡性以及饲料氨基酸的添加方式对对虾生长、体成分及血浆、肌肉氨基酸含量的影响。主要研究结果如下：1.鸡肉粉替代鱼粉饲料中补充晶体EAA和NEAA对凡纳滨对虾生长性能、体成分、血浆及肌肉游离氨基酸含量的影响本试验采用2×4因子试验设计进行了为期56d的饲养试验。2个饲料蛋白质水平分别为40%和31%，4个饲料处理分别为鱼粉组（对照组）、鸡肉粉组、鸡肉粉+晶体EAA、鸡肉粉+晶体EAA+晶体NEAA，配制8组饲料。将凡纳滨对虾（0.37±0.01g）随机分配到32个圆桶（150L）中，每桶30尾，每4个桶为一个处理组，饲喂一种饲料，每天饱食投喂三次。在每一饲料蛋白质水平下，补充EAA或EAA+NEAA组对虾的增重率均比鸡肉粉组有显著提高（P<0.05），但明显低于鱼粉组（P<0.05），饲料系数的变化正好与之相反（P<0.05）；补充EAA+NEAA组对虾增重率与补充EAA组无差异（P>0.05）。饲喂高蛋白质水平饲料较之饲喂低蛋白质饲料明显提高对虾增重率、虾体蛋白含量（P<0.05），但降低虾体脂肪含量（P<0.05）。凡纳滨对虾血浆游离EAA/NEAA与饲料EAA/NEAA之间呈正线性关系，且血浆游离赖氨酸和苯丙氨酸均与特定生长率之间呈正相关。鸡肉粉组血浆游离蛋氨酸、苯丙氨酸和赖氨酸含量显著低于对照组（P<0.05），各组对虾肌肉游离氨基酸含量无显著差异（P>0.05）。结果表明，在鸡肉粉完全替代鱼粉的饲料中补充晶体EAA可促进凡纳滨对虾的生长，但进一步补充晶体NEAA并没有进一步改善其生长性能。2.鸡肉粉替代鱼粉饲料中补充包被EAA和NEAA对凡纳滨对虾生长性能、体成分、血浆及肌肉氨基酸含量的影响本试验采用2×6因子试验设计进行了为期56d的饲养试验。2个饲料蛋白质水平分别为40%和32%，6个饲料处理分别为鱼粉组（对照组）、鸡肉粉组、鸡肉粉+晶体EAA、鸡肉粉+晶体EAA+晶体NEAA、鸡肉粉+包被EAA、鸡肉粉+包被EAA+包被NEAA，配制12组饲料。将凡纳滨对虾（0.30±0.01g）随机分配到36个圆桶（150L）中，每桶30尾，每3个桶为一个处理组，饲喂一种饲料，每天饱食投喂三次。在每一饲料蛋白质水平下，无论是补充晶体氨基酸（Crystallineaminoacid,CAA）组还是包被氨基酸组对虾的增重率均显著高于鸡肉粉组（P<0.05），且在32%蛋白质水平下，包被EAA组对虾增重率达到了鱼粉组水平（P>0.05）；补充晶体EAA+NEAA组对虾增重率与补充晶体EAA组无差异I （P>0.05），但均显著低于补充包被氨基酸组（P<0.05）；补充包被EAA组对虾增重率显著高于补充包被EAA+NEAA组（P<0.05）。饲料系数的变化正好与增重率变化相反（P<0.05）。饲喂高蛋白质水平饲料较之饲喂低蛋白质饲料明显提高对虾增重率、虾体蛋白含量（P<0.05），但降低虾体脂肪含量（P<0.05）。包被氨基酸组凡纳滨对虾血浆游离氨基酸含量总体显著低于CAA组（P<0.05）。除谷氨酸、甘氨酸以及脯氨酸外，各组对虾肌肉氨基酸含量无显著差异（P>0.05）。结果表明，在32%饲料蛋白质水平下，用鸡肉粉完全替代鱼粉时，饲料中补充包被EAA可明显促进凡纳滨对虾的生长，且达到了鱼粉组的饲喂效果。关键词:凡纳滨对虾；鸡肉粉；氨基酸平衡；生长性能；游离氨基酸II CompleteReplacementofFishMealbyPoultryby-ProductMealinPracticalDietsBaseduponanAminoAcidBalanceforPacificWhiteShrimpLitopenaeusVannameiAbstractInthepresentstudy,thesupplementingeffectsofcrystallineorcoatedaminoacidsindietswithcompletereplacementoffishmealbypoultryby-productmealonanaminoacidbalancewereevaluatedonthegrowth,bodycomposition,andplasma,muscleaminoacidcontentsofPacificwhiteshrimp(Litopenaeusvannamei).Themainfindingswereasfollows:1.Effectsoffishmealreplacementwithpoultryby-productmealindietssupplementedwithcrystallineEAAor/andNEAAongrowthperformance,bodycomposition,plasmaandmusclefreeaminoacidsA2×4factorialexperimentwithtwolevelsofdietaryprotein(32%and40%)andfourdietarytreatmentsofaminoacidsupplementationwascarriedouttodeterminetheeffectsofcompletereplacementoffishmeal(FM)withpoultryby-productmeal(PBM)indietsonabasisofEAAsorEAA+NEAAsonthegrowthandbodycompositionofPacificwhiteshrimpoveran8-weekfeedingtrial.Fouraminoacid-treateddietswereformulatedandexpressedasdietFM,dietPBM,dietPBM+EAAanddietPBM+EAA+NEAArespectivelyforeachdietaryproteinlevel.Theweightgainrate(WGR)inPBM+EAAandPBM+EAA+NEAAgroupswerehigherthanthatinPBMgroup(P<0.05),butlowerthanthatofcontrol(P<0.05)foreachdietaryproteinlevel.ChangesinFCRwasjusttheoppositeofWGR(P<0.05).NodifferenceinWGRbetweenPBM+EAAandPBM+EAA+NEAAgroups(P<0.05)wasobserved.Theshrimpfedthedietscontaining40%proteinlevelhadhigherWGR(P<0.05),bodyproteincontent(P<0.05),butlowerbodylipidcontent(P<0.05)comparedtothoseshrimpfeddietscontaining32%proteinlevel.FreeplasmaEAA/NEAAwaspositivelylinearlycorrelatedwithdietaryEAA/NEAA.Specificgrowthrateofshrimpwaspositivelycorrelatedwiththeconcentrationsofplasmafreemethionineorphenylalanine.Plasmafreemethionine,phenylalanineandlysineconcentrationsofPBMgroupwerelowerthanthatincontrolgroup(P<0.05),buttherewerenosignificantdifferencesinmusclefreeaminoacidconcentrations(P>0.05).FeedingadietwithPBM+EAAorPBM+EAA+NEAAdoesnotleadtoagrowthcomparabletofeedingthebasaldiet.ThedietssupplementedwithNEAAsdonothelpinimprovingthegrowthofshrimp.2.Effectsoffishmealreplacementwithpoultryby-productmealindietssupplementedwithcoatedEAAor/andNEAAongrowthperformance,bodycomposition,plasmaandmuscleaminoIII acidsA2×6factorialexperimentwithtwolevelsofdietaryprotein(32%and40%)andsixaminoacidtreatmentswasconductedtodeterminetheeffectsofcompletereplacementoffishmeal(FM)withpoultryby-productmeal(PBM)indietsonabasisofEAAsorEAA+NEAAsonthegrowthandbodycompositionofPacificwhiteshrimpoveran8-weekfeedingtrial.Sixaminoacid-treateddietswereformulatedandexpressedasdietFM,dietPBM,PBM+crystallineEAA,dietPBM+coatedEAA,dietPBM+crystallineEAA+crystallineNEAAanddietPBM+coatedEAA+coatedNEAArespectivelyforeachdietaryproteinlevel.Foreachdietaryproteinlevel,WGRingroupsofPBM+crystallineEAAandPBM+crystallineEAA+crystallineNEAAwerehigherthanthatinPBMgroup(P<0.05).NodifferenceinWGRbetweengroupPBM+coatedEAAandcontrolgroupsat32%dietaryproteinlevel(P>0.05)wasobserved.TheWGRbothingroupPBM+crystallineEAAingroupPBM+crystallineEAA+crystallineNEAAwasnotdifferent(P>0.05),butwaslowerthanthoseingroupPBM+coatedEAAandgroupPBM+coatedEAA+coatedNEAAgroups(P<0.05).TheWGRvalueingroupofPBM+coatedEAAwassignificantlyhigherthanthoseingroupPBM+coatedEAA+coatedNEAA(P<0.05).ChangesinFCRwasjusttheoppositeofWGR(P<0.05).Theshrimpfedthe40%proteindietshadhigherWGR,bodyproteincontent,butlowerbodylipidcontent(P<0.05)comparedtothoseshrimpfed32%proteindiets.FreeaminoacidconcentrationsinplasmaofgroupsPBM+coatedaminoacidsweregenerallylowerthanthoseingroupsPBM+crystallineaminoacids(P<0.05).Therewerenodifferencesinmuscleaminoacidconcents(P>0.05)exceptglutamate,glycineandprolineacrossdietarytreatments(P<0.05).FeedingadietwithPBM+coatedEAAcanleadtoagrowthcomparabletofeedingthebasaldietat32%dietaryproteinlevel.Keywords:LitopenaeusVannamei;Poultryby-ProductMeal;AminoAcidBalance;Growth;FreeAminoAcidsIV 目录第1章引言...................................................................................................................................11.1研究目的及意义...............................................................................................................11.2文献综述...........................................................................................................................21.2.1凡纳滨对虾的生物学特性.....................................................................................21.2.2凡纳滨对虾的蛋白质、氨基酸需求及饲料氨基酸平衡.....................................21.2.3合成氨基酸在水产动物饲料中的应用.................................................................31.2.4微胶囊的制作工艺及微胶囊壁材的选择.............................................................41.2.5对虾饲料中鱼粉的替代.........................................................................................61.3研究内容、研究目标和创新点.......................................................................................81.3.1研究内容.................................................................................................................81.3.2研究目标.................................................................................................................81.3.3创新点.....................................................................................................................8第2章鸡肉粉替代鱼粉饲料中补充晶体EAA和NEAA对凡纳滨对虾生长性能、体成分、血浆及肌肉游离氨基酸含量的影响...............................................................................92.1材料与方法.......................................................................................................................92.1.1试验饲料.................................................................................................................92.1.2试验动物.................................................................................................................92.1.3饲养管理...............................................................................................................152.1.4样品采集...............................................................................................................152.1.5样品测定...............................................................................................................152.1.6计算方法...............................................................................................................152.1.7数据统计...............................................................................................................162.2结果.................................................................................................................................162.2.1生长性能...............................................................................................................162.2.2鱼体成分...............................................................................................................18V 2.2.3血浆游离氨基酸...................................................................................................202.2.4肌肉游离氨基酸...................................................................................................222.3讨论.................................................................................................................................252.3.1生长性能...............................................................................................................252.3.2体成分...................................................................................................................262.3.3血浆及肌肉游离氨基酸.......................................................................................262.4小结.................................................................................................................................27第3章鸡肉粉替代鱼粉饲料中补充包被EAA和NEAA对凡纳滨对虾生长性能、体成分、血浆及肌肉氨基酸含量的影响...................................................................................283.1材料与方法.....................................................................................................................283.1.1试验饲料...............................................................................................................283.1.2试验动物...............................................................................................................293.1.3饲养管理...............................................................................................................363.1.4样品采集...............................................................................................................363.1.5样品测定...............................................................................................................363.1.6计算方法...............................................................................................................373.1.7数据统计...............................................................................................................373.2结果.................................................................................................................................383.2.1生长性能...............................................................................................................383.2.2鱼体成分...............................................................................................................403.2.3包被氨基酸的溶失率...........................................................................................413.2.4血浆游离氨基酸...................................................................................................423.2.5肌肉氨基酸...........................................................................................................443.3讨论.................................................................................................................................483.3.1生长性能...............................................................................................................483.3.2体成分...................................................................................................................493.3.3血浆游离氨基酸及肌肉氨基酸...........................................................................49VI 3.4小结.................................................................................................................................50第4章全文总结.........................................................................................................................51致谢...............................................................................................................................................52参考文献.......................................................................................................................................53在学期间发表的学术论文...........................................................................................................61VII 主要符号表缩略语英文名称中文名称AbbreviationEnglishNameChineseNameIAWInitialaverageweight初均重FAWFinalaverageweight末均重WGWeightgain增重率SGRSpecificgrowthrate特定生长率FCRFeedconversionratio饲料系数SRSurvivalrate存活率EAAEssentialaminoacids必需氨基酸NEAANonessentialaminoacids非必需氨基酸CAACrystallineaminoacid晶体氨基酸VIII 集美大学硕士学位论文基于氨基酸平衡的鸡肉粉代替鱼粉的配合饲料对凡纳滨对虾生长性能的影响第1章引言1.1研究目的及意义凡纳滨对虾（Litopeaneusvannamei）俗称南美白对虾，是世界三大经济养殖对虾之一。为了能够更好地促进凡纳滨对虾的生长，降低养殖对虾的成本，研究人员、养殖户、饲料生产商以及原料供应商都在不断探索与提高凡纳滨对虾的集约与半集[1]约化养殖技术。在对虾养殖中，饲料花费通常占所有养殖成本的60%~70%。鱼粉是公认的优质蛋白源，其必需氨基酸（Essentialaminoacids,EAA）含量高，氨基酸平衡性好，生物学价值高，是水产动物最为重要的蛋白源，在大多数水产养殖种类的饲料配方中不可或缺，也是凡纳滨对虾饲料主要的动物蛋白原料。随着水产养殖行业的飞速发展，对鱼粉的需求量大幅增加，而受厄尔尼诺现象及不良海洋环境的影响，以及过度捕捞海洋鱼类资源，致使野生鱼类资源急剧下降，造成鱼粉供应短缺，供不应求，使得鱼粉的价格与日俱增，而鱼粉价格对对虾饲料成本影响较大。因此，需要寻找其他可替代鱼粉的廉价动植物蛋白原料，该方面研究已经成为当前[2,3]饲料学领域的热点之一。鸡肉粉营养价值较高，适口性好，并有一定产量，是潜[4-11]在的鱼粉替代品。研究表明，凡纳滨对虾饲料中用鸡肉粉替代鱼粉的最大比例[4,5][12]为80%。Ye等尝试了通过调配饲料中赖氨酸和蛋氨酸平衡来降低凡纳滨对虾饲料中鱼粉的比例的试验，获得了较好的实验结果。由于鸡肉粉蛋白质的质量不仅与EAA的丰缺程度和平衡性有关，甚至还可能受到非必需氨基酸（Nonessentialaminoacids,NEAA）的影响，因此考虑饲料所有氨基酸的平衡更有利于提高饲料蛋白质的利用率。研究人员通常通过补充外源氨基酸来弥补其他蛋白源替代鱼粉后氨[13]基酸的不足，然而外源氨基酸的添加方式也可能会影响其利用效果。在以往的鱼[4,5]粉替代研究中，鸡肉粉要么按一定比例直接替代鱼粉，要么只考虑通过补充个别[14,15]必需氨基酸来弥补替代鱼粉后的必需氨基酸的不足，而较少考虑用鸡肉粉部分或全部替代鱼粉后饲料中所有氨基酸的平衡性问题。为此，本试验设计了两个不同蛋白质水平的参考饲料配方，并以参考配方的EAA和NEAA水平为标准，设计鸡肉粉完全替代鱼粉后饲料氨基酸含量或外源氨基酸添加方式不同的饲料配方，探讨饲料氨基酸的平衡性与对虾生长、体成分及血浆、肌肉氨基酸间的关系，为合理设计凡纳滨对虾高效、低鱼粉饲料配方提供理论依据。1 集美大学硕士学位论文基于氨基酸平衡的鸡肉粉代替鱼粉的配合饲料对凡纳滨对虾生长性能的影响1.2文献综述1.2.1凡纳滨对虾的生物学特性凡纳滨对虾隶属节肢动物门（Arthopoda）、甲壳纲（Crustacea）、十足目（Decapoda）、游泳亚目（Natantia）、对虾科（Penaeidae）、对虾属（Penaeus）、滨对虾亚属（Litopenaeus）也称白对虾、万氏对虾、南美白对虾、白肢虾等。凡纳滨对虾原产于太平洋沿岸水域从秘鲁北部至墨西哥桑诺拉，在厄瓜多尔一带分布最为集中，其外形与中国明对虾、墨吉对虾类似，成虾体长可达23cm左右，正常体色为浅青灰色，是当今世界三大经济养殖对虾之一。其具有生长快、抗环境的变化能[16,17]力强、抗病性强、对饲料要求低、加工出肉率高、肉质鲜美等特点。凡纳滨对虾属于变温性动物，其温度适应的范围为16~35℃，其最适生长温度为22~30℃，15℃以下不再摄食，水温低于9℃会出现死亡，水温高于35℃会影响其机体代谢。凡纳滨对虾有很强的盐度适应能力，属于广盐性虾类，其盐度适应范围为0~40，能够在海水、半咸水甚至纯淡水中养殖，适宜的淡化养殖的盐度范围为0.5~10。凡纳滨对虾pH的适应范围为7.5~9.0，最适宜pH为8.1~8.4；养殖水体中氨氮应小于0.5mg/L；水体中溶氧量应大于4mg/L；池底硫化氢浓度应低于0.1mg/L。凡纳滨对虾为底栖动物，养殖前期水体透明度可控制在30~40cm，养殖后期应不小[18]于20cm。1.2.2凡纳滨对虾的蛋白质、氨基酸需求及饲料氨基酸平衡蛋白质是组成机体一切细胞、组织必不可少的成分，是维持机体结构和功能的重要物质，也是是水产动物生长所需的最重要的营养物质。由于蛋白质是水产动物饲料中最主要和最昂贵的营养成分，因此国内外研究人员都将水产动物蛋白质需要量作为动物营养学的首要的基础性研究工作。动物体在不同的生长阶段其最适蛋白[19]质需要量也有所差异。Colvin等通过研究凡纳滨对虾幼虾和后期幼体的蛋白质需要量发现，幼虾的蛋白质需要量要低于30%，后期幼体最适蛋白质需要量为30~35%。[20]Kureshy等研究发现凡纳滨对虾幼虾和中成年对虾的蛋白质需要量均为32%。[21]Smith等认为凡纳滨对虾幼虾最适蛋白质需要量应高于36%；Velasco等则报道凡[22]纳滨对虾幼虾最适蛋白质需要量为25~33%，而后期幼体的蛋白质需求量为[23][24]20.2~21.5%；Samocha等研究表明，凡纳滨对虾后期幼体的蛋白质需要量为[25]40~55%；andrew等认为28~32%蛋白质水平的饲料就能满足凡纳滨对虾的生长需[26][27]要；Villalon等报道凡纳滨幼虾最适蛋白质需要量为35%；李广丽等认为当饲料蛋白质水平在42.37~44.12%时，凡纳滨对虾可获得最大的生长。凡纳滨对虾的最适宜蛋白质需要量不仅依其生长阶段的不同而有所变化，还会受到环境条件、饲料[28]蛋白质品质等因素影响。Shiau等研究表明，在盐度为32的咸水中，其蛋白质需2 集美大学硕士学位论文基于氨基酸平衡的鸡肉粉代替鱼粉的配合饲料对凡纳滨对虾生长性能的影响要量为40%，而在盐度为16的半咸水中，凡纳滨对虾的最适蛋白质需要量提高到[29]44%。Robertson等报道，在高盐度（45）水体中凡纳滨对虾的饲料蛋白质需要量（45%）反而要高于低盐度（12）下的需要量（35%）。在不同的盐度下凡纳滨对虾对饲料蛋白质的需求量不同的原因可能是对虾需要增加体内能量消耗以及调动某[30]些游离氨基酸来维持体内渗透压稳定。氨基酸是构成蛋白质的基本单位，蛋白质的营养实质上就是氨基酸的营养。而氨基酸的营养又以其维持正常生长、发育所必需但又不能自身合成的EAA的营养最为重要。因此研究者们不断探索动物体所需的各种EAA需要量。凡纳滨对虾所需的10种EAA分别为赖氨酸、组氨酸、蛋氨酸、精氨酸、缬氨酸、苏氨酸、色氨酸、亮氨酸、苯丙氨酸和异亮氨酸，具体的需要量见表2.4。而在这10种EAA中赖氨酸、蛋氨酸、精氨酸对凡纳滨对虾最为重要，其中赖氨酸是第一限制性氨基酸[31][32-34]。由于某些EAA之间存在着协同或拮抗作用，因此保证饲料中EAA适宜的比例有助于提高饲料蛋白质的利用效率，从而可在一定程度上降低饲料蛋白质水平而不影响鱼虾的生长。还有研究表明饲料中NEAA的水平也可能通过影响饲料中总[35,36]EAA与总NEAA的比列来影响饲料蛋白质的利用率，因此水产动物对饲料蛋白质的需要实质上就是对饲料EAA数量和比例的需要或是对EAA和NEAA数量及混合比例的需要，即达到饲料氨基酸平衡能够更好地促进水产动物的生长。Alam等[37]认为，其他非鱼粉蛋白源，除了适口性和所含抗营养因子（尤其是植物性蛋白源）等因素外，饲料氨基酸的平衡性是决定饲料蛋白质营养价值的最主要因素。[38]Yamamoto等研究发现,饲料氨基酸平衡性对虹鳟生长性能的影响程度要大于饲料蛋白质水平。如何改善饲料氨基酸的平衡性成了饲料蛋白质研究的热点。一般来说，解决饲料氨基酸平衡性的方法有两种，一是通过调配饲料中各种蛋白源的比例来来解决，二是通过在饲料中直接添加外源合成氨基酸使饲料氨基酸达到平衡，而后者无疑是最为直接的解决方案。1.2.3合成氨基酸在水产动物饲料中的应用晶体氨基酸（Crystallineaminoacid,CAA）作为一种营养性添加剂在水产动物饲[39]料研究中广泛应用。Gaylord等在蛋白质水平为35%的饲料中补充赖氨酸、蛋氨[40]酸和苏氨酸有效促进了虹鳟的生长，提高了饲料蛋白质利用效率；Fox等报道在蛋白质水平为35%的饲料中补充5.19%（占饲料蛋白质比例）的晶体赖氨酸盐酸盐[41]能有效促进凡纳滨对虾的生长；Xie等研究表明，在40%饲料蛋白质水平下，补充3.95%（占饲料蛋白质比例）的赖氨酸就能够满足凡纳滨对虾生长所需；Cheng[42]等报道，在鱼粉含量为15%的饲料中补充0.4~1%的晶体赖氨酸盐酸盐，虹鳟的[43]生长达到了高鱼粉组（32.1%）水平；Yamamoto等研究发现，在蛋能比相对较低3 集美大学硕士学位论文基于氨基酸平衡的鸡肉粉代替鱼粉的配合饲料对凡纳滨对虾生长性能的影响的饲料中添加CAA，能够降低虹鳟的氮排泄，明显提高其蛋白质效率和饲料效率；[44][45]Peres等成功地用CAA替代了大菱鲆幼鱼饲料中19%的蛋白质；Williams等报道，尖吻鲈利用饲料中的CAA的效率与完整蛋白质氨基酸相近；Rodehutscord[46]等研究表明,在不同蛋白质水平饲料中补充晶体赖氨酸均能促进虹鳟生长、提高[47]蛋白质沉积。还有很多有关水产动物能够有效利用饲料中CAA的例子，如鲫鱼、[48][49][50][51][52,53][54]鲤鱼、斑点叉尾鮰、大西洋鲑、斑节对虾、罗非鱼、黑鲈、美国[55][56]红鱼、杂交条纹鲈。[57]然而有关水产动物能否有效利用CAA仍存在一定争议。Alam等认为，日本囊对虾不能有效利用CAA，在饲料中添加包被氨基酸能够有效提高合成氨基酸的利[58]用效率。朱选等在罗非鱼的研究中也表明，CAA不能被罗非鱼很好的利用，添加包膜赖氨酸和蛋氨酸能显著提高罗非鱼的生长，且添加两种包膜氨基酸组罗非鱼的生长要显著高于仅添加一种包膜氨基酸组，这与Alam等有关日本囊对虾的研究[13][59]相一致。还有一些有关水产动物利用饲料中CAA效果不理想的研究，如草鱼、[60][61][62][63]鲤鱼、凡纳滨对虾、斑点叉尾鮰、异育银鲫。上述研究认为水产动物需将蛋白质分解成短链的小肽或单个的氨基酸才能被吸收，而CAA可作为单个氨基酸直接被水产动物体肠道所吸收，吸收速率较快，因此存在蛋白结合氨基酸与CAA吸收不同步的问题。且CAA在水中易溶失，因此造成水产动物对CAA利用率不高的问题。为了解决以上问题研究者们通过使用各种不同的材料包被CAA，不仅使CAA免于与水直接接触，降低了CAA的溶失，还延缓了CAA在水产动物体肠道内[57-63]的吸收，提高了与蛋白结合氨基酸吸收的同步性，获得了较好的试验结果。也[64][65-67]有关于通过增加投喂频率以及使用不同构型和种类的CAA来提高动物体肠道对CAA与蛋白结合氨基酸吸收的同步性，从而改善水产动物生长报道。1.2.4微胶囊的制作工艺及微胶囊壁材的选择1.2.4.1微胶囊的制作工艺[68]以下方法参考梁治齐《微胶囊技术及其应用》。1．应用化学原理制备微胶囊（1）界面聚合法把两种含有双（多）官能团要发生聚合反应的单体，溶解在不相混溶的两种液体中，并把囊心溶解在分散相中，在不相混溶的两种液体中加入乳化剂，充分搅拌，这两种聚合反应的单体会分别从两相的内部朝着乳化液的界面移动，当两种单体相遇时会迅速发生缩聚反应将囊心包裹，形成微胶囊。（2）原位聚合法与界面聚合法不同的是，原位聚合法是有一种含多官能团的单体或是低聚合度4 集美大学硕士学位论文基于氨基酸平衡的鸡肉粉代替鱼粉的配合饲料对凡纳滨对虾生长性能的影响的预聚体，依靠催化剂自身缩聚形成缩聚物，且单体是可溶的，单体和催化剂全部位于囊心外部或者内部，所形成的缩聚物是不可溶的，缩聚物沉积在囊心的表面形成微胶囊。（3）锐孔-凝固浴法把褐藻酸钠水溶液用微孔注射器一缓慢加到氯化钙溶液中，此时液滴表面会凝固而形成一个小胶囊，这就是锐孔-凝固浴法制作的胶囊。原理是将可溶性高聚物与囊心混合后，用微孔滴加到凝固浴中，形成微胶囊。2．应用物理化学原理制备微胶囊（1）复合凝聚法将囊心材料分散到两种带有相反电荷水溶性高分子电解质溶液中，当着两种溶液混合时，两种电荷相互中和发生凝聚，产生凝聚相包裹囊心。（2）单凝聚法若把既不溶于水也不溶于乙醇的某油性囊心加入到明胶水溶液中，搅拌使其乳化分散，滴加乙醇使明胶凝聚包裹囊心，这种从水相分离出的凝胶中只含一种水溶性高分子的方法称为单凝聚法。（3）油相分离法对于某些水溶性的固体或液体囊心，其不能用水作为介质进行分散，只能使用有机溶剂将它们分散成油包水的乳液，再用油溶性壁材进行包被形成微胶囊。（4）干燥浴法该方法是将水或者液体石蜡、豆油之类的油作为介质，把壁材溶液与囊心材料及乳化剂形成的乳化体系以微滴的状态分散到以上介质中，然后通过加热、溶剂萃取、减压搅拌、冷却或冻结等方式将壁材溶液中的溶剂去除，壁材从溶液中析出并包裹囊心，形成微胶囊。（5）熔化分散冷凝法此方法是利用蜡状物质受热时熔化，常温下为固态的独特性质来实现包被的方法。即将囊心物质与加热熔化的蜡状物质混合后，滴加到适宜温度的分散溶液中，加入乳化剂使其形成乳化体系，不断搅拌，逐渐降低温度使蜡状物质固化形成微胶囊。（6）粉末床法该法是利用液滴可以湿润微小的固体粉末并且在液体周围形成一定厚度的膜来完成包裹。用此方法制成的微胶囊颗粒直径为毫米级别，相对于其他方法制得的微胶囊要偏大。3．应用物理和机械原理制备微胶囊（1）锅包法5 集美大学硕士学位论文基于氨基酸平衡的鸡肉粉代替鱼粉的配合饲料对凡纳滨对虾生长性能的影响在糖衣锅内放置包被壁材，运用糖衣锅对囊心进行滚制包被，此方法类似于粉末床法。（2）空气悬浮成膜法该方法是应用流床将囊心物质悬浮在空中，在将壁材溶液不断以雾状喷到悬浮的囊心上形成包裹。（3）喷雾干燥法把囊心与壁材形成的固体水溶液以液滴状喷入热空气中，使水分受热蒸发，而分散到液滴中的固态壁材即被干燥并包裹囊心形成微胶囊。（4）包结络合法该法以β-环糊精作为微胶囊壁材，是在分子水平上形成的包被。β-环糊精具有疏水亲脂性内腔，能与具有适当大小的疏水性分子以非共价键结合，形成稳定的微胶囊。（5）旋转悬浮分离法将囊心物质与通过液化处理的壁材混合后，加入到一个转盘上，旋转的转盘会将壁材摊薄并在囊心物质上形成一层很薄的液膜，当这个被包裹的囊心因离心力离开转盘时，可通过冷凝或者干燥的方式将其固化收集，可得微胶囊。（6）挤压法将悬浮在液态碳水化合物中的囊心通过微孔挤压到凝固浴中，此时壁材从溶液中析出包裹囊心。（7）静电结合法把带有相反电荷的囊心和壁材以气溶胶的形式喷入空中，彼此依靠静电相互吸引结合后形成微胶囊。1.2.4.2微胶囊壁材的选择微胶囊的壁材要对动物体无毒无害，工艺上容易制备，不与囊心发生化学反应，具有一定的机械强度，价格低，来源广泛，对于水产动物饲料添加剂而言，应尽量选择不溶于水或微溶于水的物质作为壁材。有许多关于在饲料中使用各种壁材包被[63][63][69]的氨基酸明显促进水产动物生长的报道如使用环糊精、淀粉、明胶、硬化[69][57][70][71][71]油脂、明胶-酪蛋白、醋酸纤维酯、卡拉胶、甘油三棕榈酸酯、单硬脂[72][73,74][75]酸甘油酯、琼脂、明胶-海藻酸钠等。1.2.5对虾饲料中鱼粉的替代鱼粉是由一种或多种鱼类作为原料加工而成的一种高营养价值的饲料原料。鱼粉富含多种EAA、矿物质、必须脂肪酸、维生素等水产动物生长、发育、繁殖所必需的的营养物质，且其氨基酸平衡性及适口性好、抗营养因子少以及含有某些未知6 集美大学硕士学位论文基于氨基酸平衡的鸡肉粉代替鱼粉的配合饲料对凡纳滨对虾生长性能的影响[76-78]的生长因子等，是水产动物饲料中最重要的蛋白源。鱼粉产量有限，供不应求，[79]因此研究人员不断尝试使用其他动植物蛋白源来替代鱼粉。Forster等用3种肉骨[80]粉替代凡纳滨对虾饲料中25~75%的鱼粉，不影响其生长；Tan等报道，用肉骨粉替代饲料中60%的鱼粉蛋白，对凡纳滨对虾的生长、饲料系数、蛋白质效率、存[4]活率及体组成均无负面影响；Cruz-Suárez等用鸡肉粉替代凡纳滨对虾饲料中80%的鱼粉不影响其生长，但是在完全替代鱼粉时，由于饲料适口性的下降导致了对虾[10]生长的下降；Saoud等用鸡肉粉完全成功地替代了红螯螯虾饲料中的鱼粉；Lim[81]等研究表明，用豆粕替代饲料中混合动物蛋白（53%鱼粉、32%虾头粉和15%鱿[82]鱼粉）超过42%时，明显影响凡纳滨对虾的生长；Lim等研究报道，可花生粕替代凡纳滨对虾饲料中20%的混合动物蛋白（53%鱼粉、34%虾头粉和13%鱿鱼粉），对其生长无影响。由表1.1可知，鸡肉粉能以高比例替代凡纳滨对虾饲料中的鱼粉，[7]使用鸡肉粉+膨化豆粕甚至能够完全替代鱼粉，这说明对对虾来说，鸡肉粉是极具潜力的鱼粉的替代品，然而鸡肉粉与鱼粉之间的主要差异是其氨基酸组成的差异（尤其是EAA组成），因此通过调配鸡肉粉饲料中的氨基酸组成来实现完全替代鱼粉饲料具有很高的可行性。表1.1对虾饲料中鱼粉的替代Tab.1.1Replacementoffishmealindietforshimp(%)种类蛋白源替代比例SpeciesProteinsourceReplacementproportion[79]凡纳滨对虾（Litopeaneusvannamei）肉骨粉75[83]凡纳滨对虾（Litopeaneusvannamei）猪肉粉35[6]凡纳滨对虾（Litopeaneusvannamei）肉骨粉60[84]日本沼虾（Macrobrachiumnipponense）肉骨粉50[4]凡纳滨对虾（Litopeaneusvannamei）鸡肉粉80[5]凡纳滨对虾（Litopeaneusvannamei）鸡肉粉70[6]凡纳滨对虾（Litopeaneusvannamei）鸡肉粉80[10]红螯螯虾（Cheraxquadricarinatus）鸡肉粉100[84]日本沼虾（Macrobrachiumnipponense）鸡肉粉50[7]凡纳滨对虾（Litopeaneusvannamei）膨化豆粕+鸡肉粉100[85]凡纳滨对虾（Litopeaneusvannamei）红蟹粉38[86]南方滨对虾（Litopenaeusschmitti）豆粕75[87]凡纳滨对虾（Litopeaneusvannamei）菜籽粕+豆粕507 集美大学硕士学位论文基于氨基酸平衡的鸡肉粉代替鱼粉的配合饲料对凡纳滨对虾生长性能的影响续表1.1种类蛋白源替代比例SpeciesProteinsourceReplacementproportion[88]凡纳滨对虾（Litopeaneusvannamei）棉籽粕26.5[89]凡纳滨对虾（Litopeaneusvannamei）花生粕20%1.3研究内容、研究目标和创新点1.3.1研究内容（1）鸡肉粉替代鱼粉饲料中补充晶体EAA或晶体EAA+NEAA对凡纳滨对虾生长性能、体成分、血浆及肌肉游离氨基酸含量的影响（2）鸡肉粉替代鱼粉饲料中补充包被EAA或包被EAA+NEAA对凡纳滨对虾生长性能、体成分、血浆及肌肉氨基酸含量的影响1.3.2研究目标（1）探明饲料中补充EAA或EAA+NEAA对凡纳滨对虾生长的影响（2）探明凡纳滨对虾能否有效利用饲料中的CAA（3）探明硬化油脂包被氨基酸能否通过提高与完整蛋白质氨基酸吸收的同步性来进一步提高凡纳滨对虾对氨基酸的利用效果1.3.3创新点（1）比较凡纳滨对虾对CAA与硬化油脂包膜氨基酸的利用效果（2）探讨饲料中添加EAA或同时添加EAA和NEAA与凡纳滨对虾生长之间的关系8 集美大学硕士学位论文基于氨基酸平衡的鸡肉粉代替鱼粉的配合饲料对凡纳滨对虾生长性能的影响第2章鸡肉粉替代鱼粉饲料中补充晶体EAA和NEAA对凡纳滨对虾生长性能、体成分、血浆及肌肉游离氨基酸含量的影响2.1材料与方法2.1.1试验饲料[90]本试验参考Ye等的试验设计，设两个饲料蛋白质水平（40%和32%）。每个蛋白质水平下设置鱼粉组（对照组）、鸡肉粉组（鸡肉粉完全替代鱼粉组）、鸡肉粉+晶体EAA组、鸡肉粉+晶体EAA+晶体NEAA组，饲料配方及常规成分列于表2.1。在40%饲料蛋白质水平下，试验料分别记为D1-D4，其中D2不添加晶体氨基酸，D3补足相对于D1缺乏的EAA，D4补足相对于D1缺乏的EAA+NEAA；在31%饲料蛋白质水平下，试验料分别记为D5-D8，其中D6不添加晶体氨基酸，D7补足相对于D5缺乏的EAA，D8补足相对于D5缺乏的EAA+NEAA。将所有原料用粉碎机粉碎后过80目筛网，逐级混匀后，每千克饲料再加入约400mL的蒸馏水继续混匀，然后用制粒机制成直径为1.5mm的硬颗粒饲料，自然风干后于-20℃冰箱保存备用。饲料氨基酸组成和凡纳滨对虾必需氨基酸建议需要量列于表2.4。2.1.2试验动物从厦门当地养殖场购进健康凡纳滨对虾虾苗，放入2个1000L的循环水装置的圆桶内培育，1个月后对虾规格达到0.3g左右，选取较大规格的虾苗（0.37±0.01g），随机分配到32个循环水装置的圆桶（含水150L）中，每桶30尾，每4个桶为一个处理组，共8个处理组。表2.1饲料组成及营养水平（风干基础）Tab.2.1Ingredientsandcompositionofexperimentaldiets(air-drybasis)(g/kg)原料IngredientD1D2D3D4D5D6D7D8①鱼粉Fishmeal378.00.00.00.0283.50.00.00.0②豆粕Soyabeanmeal200.0200.0200.0200.0150.0150.0150.0150.0②虾头粉Shrimpheadmeal100.0100.0100.0100.075.075.075.075.0鸡肉粉0.0365.0365.0365.00.0274.5274.5274.5②Poultryby-productmeal玉米淀粉Cornstarch224.5224.5224.5224.5384.0384.0384.0384.09 集美大学硕士学位论文基于氨基酸平衡的鸡肉粉代替鱼粉的配合饲料对凡纳滨对虾生长性能的影响续表2.1原料IngredientD1D2D3D4D5D6D7D8微晶纤维素0.041.029.525.70.029.821.218.4Crystallinecellulose鱼油Fishoil16.02.02.02.021.010.610.610.6豆油Soybeanoil16.02.02.02.021.010.610.610.6卵磷脂Lecithin20.020.020.020.020.020.020.020.0氯化胆碱Cholinechloride2.52.52.52.52.52.52.52.5胆固醇Cholesterol2.02.02.02.02.02.02.02.0多种维生素Vitaminpremix2.02.02.02.02.02.02.02.0多种矿物质Mineralpremix2.02.02.02.02.02.02.02.0磷酸二氢钙Ca(H2PO4)215.015.015.015.015.015.015.015.0海藻酸钠Sodiumalginate20.020.020.020.020.020.020.020.0维生素CVitaminC2.02.02.02.02.02.02.02.0晶体氨基酸混合物0.00.011.515.30.00.08.611.4③Crystallineaminoacidmix合计1000.01000.01000.01000.01000.01000.01000.01000.0营养水平Nutrientlevel干物质Drymatter901.1910.0918.3905.3911.2911.3919.2908.5粗蛋白质Crudeprotein404.2402.4407.1402.6314.1312.2315.2315.1粗脂肪Crudelipid77.274.979.275.776.974.180.078.1粗灰分Ash78.076.773.876.965.364.463.265.5注：①由秘鲁TecnológicadeAlimentosS.A公司提供；②由厦门百穗行科技股份有限公司提供；③由上海捷瑞生物工程有限公司提供（纯度>98.5%）；晶体氨基酸混合物组成列于表2.2。Notes:①ObtainedfromTecnológicadeAlimentosS.A,Peru;②obtainedfromBaisuihangTechnologyCo.,Ltd,Xiamen,China;③ObtainedfromGenearyBiotechCo.,Ltd,shanghai,China(Purity>98.5%);CrystallineaminoacidmixcompositionsshowninTable2.2.10 集美大学硕士学位论文基于氨基酸平衡的鸡肉粉代替鱼粉的配合饲料对凡纳滨对虾生长性能的影响表2.2晶体氨基酸混合物组成（风干物质）Tab.2.2Compositionofcrystallineaminoacidmix(air-drybasis)(g/kg)氨基酸AAD3D4D7D8EAA苏氨酸Thr0.700.700.510.51缬氨酸Val0.760.760.550.55蛋氨酸Met1.821.821.351.35异亮氨酸Ile0.680.680.490.49亮氨酸Leu0.910.910.640.64苯丙氨酸Phe1.191.190.870.87组氨酸His1.781.781.331.33赖氨酸Lys3.243.242.402.40色氨酸Trp0.420.420.310.31NEAA天冬氨酸Asp0.001.480.001.07酪氨酸Tyr0.000.210.000.14牛磺酸Tau0.000.510.000.3811 集美大学硕士学位论文基于氨基酸平衡的鸡肉粉代替鱼粉的配合饲料对凡纳滨对虾生长性能的影响表2.3原料氨基酸含量（风干基础）Tab.2.3Aminoacidprofileofproteinsourceusedintheexperiment(air-drybasis)(%)氨基酸AA鱼粉豆粕虾头粉鸡肉粉FishmealSoyabeanmealShrimpheadmealPoultryby-productmealEAA苏氨酸Thr2.571.771.952.47缬氨酸Val3.042.052.222.94蛋氨酸Met1.920.691.351.49异亮氨酸Ile2.411.951.732.31亮氨酸Leu4.723.553.254.64苯丙氨酸Phe2.402.231.762.16组氨酸His1.611.170.891.18赖氨酸Lys4.742.703.374.02精氨酸Arg3.943.182.734.42色氨酸Trp0.700.650.490.61NEAA天冬氨酸Asp5.505.294.525.29丝氨酸Ser2.332.151.722.61谷氨酸Glu6.807.275.807.45脯氨酸Pro2.542.382.284.07甘氨酸Gly3.781.943.967.26丙氨酸Ala3.791.943.234.26胱氨酸Cys0.520.630.450.67酪氨酸Tyr1.891.601.441.90①牛磺酸Tau0.25－0.200.12注：①未检出。Notes:①Nodetected.12 ②③②③③③②②③④①－－－－－－(%)的鸡肉粉代替鱼粉的配合饲料对凡纳滨对虾生长性能的影响133.46(11.0)3.53(11.3)3.56(11.3)3.56(11.3)基于氨基酸平衡试验饲料氨基酸含量（风干基础）2.4表2.66(6.58)2.45(6.08)2.60(6.38)2.68(6.21)2.03(6.47)1.93(6.18)1.96(6.22)2.01(6.38)2.7(7.7)酪+Ile1.46(3.61)1.38(3.43)1.43(3.51)1.43(3.55)1.04(3.31)1.00(3.20)1.06(3.36)1.04(3.30)1.3(2.7)Asp3.54(8.76)3.32(8.25)3.44(8.45)3.57(8.87)2.61(8.31)2.56(8.20)2.55(8.09)2.67(8.47)D2D3D4D5D6D7D8RAAD1Thr1.50(3.71)1.40(3.48)1.55(3.81)1.54(3.83)1.12(3.57)1.08(3.46)1.10(3.49)1.18(3.74)1.4(3.6)Val1.79(4.43)1.68(4.17)1.75(4.30)1.74(4.32)1.38(4.39)1.27(4.07)1.36(4.31)1.37(4.35)1.5(3.4)Met0.95(2.35)0.78(1.94)0.92(2.26)0.93(2.31)0.71(2.26)0.60(1.92)0.75(2.38)0.72(2.28)0.9(2.2)Leu2.83(7.00)2.69(6.68)2.80(6.88)2.85(7.08)2.12(6.75)1.98(6.34)2.11(6.69)2.15(6.82)2.1(4.3)His0.97(2.40)0.71(1.76)0.91(2.24)0.98(2.43)0.68(2.16)0.52(1.67)0.65(2.06)0.65(2.06)0.8(2.1)Lys2.68(6.63)2.31(5.74)2.65(6.51)2.64(6.56)2.01(6.40)1.73(5.54)2.01(6.38)2.06(6.54)2.0(5.3)Arg2.33(5.76)2.52(6.26)2.49(6.12)2.55(6.33)1.72(5.48)1.82(5.83)1.86(5.90)1.82(5.78)2.2(5.4)Trp0.42(1.04)0.37(0.92)0.49(1.20)0.45(1.12)0.31(0.99)0.30(0.96)0.31(0.98)0.32(1.02)0.3(0.7)Ser1.48(3.66)1.53(3.80)1.52(3.73)1.55(3.85)1.11(3.53)1.16(3.72)1.14(3.62)1.15(3.65)Pro1.64(4.06)2.19(5.44)2.19(5.38)2.16(5.37)1.20(3.82)1.69(5.41)1.62(5.14)1.68(5.33)GluGly2.18(5.39)3.44(8.55)3.29(8.08)3.30(8.20)1.62(5.16)2.58(8.26)2.53(8.03)2.56(8.12)4.64(11.5)Ala2.13(5.27)2.23(5.54)2.20(5.40)2.28(5.66)1.62(5.16)1.73(5.54)1.68(5.33)1.70(5.40)4.76(11.8)4.72(11.6)4.78(11.9)Tab.2.4Aminoacidprofileofexperimentaldiets(air-drybasis)Phe+TyrA集美大学硕士学位论文A氨基酸E苏氨酸A缬氨酸蛋氨酸异亮氨酸亮氨酸A苯丙氨酸氨酸组氨酸E赖氨酸精氨酸色氨酸N天冬氨酸丝氨酸谷氨酸脯氨酸甘氨酸丙氨酸 ①Values－－－－③[93]该值基于王用黎等；④[92]等ValuesarebasedonAkiyama(1992);Wilson②该值基于；③[91]的鸡肉粉代替鱼粉的配合饲料对凡纳滨对虾生长性能的影响等Akiyama该值基于Recommendedrequirementforshrimp;①14基于氨基酸平衡凡纳滨对虾必需氨基酸建议需要量；②epercentageofaminoacidofdietaryprotein.ValuesarebasedonWangYongli(2013).④D2D3D4D5D6D7D8RCys3.62(8.96)4.17(10.4)4.15(10.2)4.13(10.3)2.70(8.60)3.05(9.77)2.98(9.45)3.11(9.87)AAD1Tyr1.16(2.87)1.04(2.58)1.10(2.70)1.14(2.83)0.85(2.71)0.85(2.72)0.83(2.63)0.86(2.73)Tau0.14(0.35)0.05(0.12)0.07(0.17)0.12(0.30)0.09(0.29)0.03(0.10)0.03(0.10)0.07(0.22)2.4集美大学硕士学位论文续表氨基酸胱氨酸酪氨酸牛磺酸EAA/NEAA44/5640/6042/5842/5844/5640/6042/5842/58注：括号内表示氨基酸占饲料蛋白质的含量。①Notes:ValuesinparenthesesareexpressedastharebasedonWilson(2003); 集美大学硕士学位论文基于氨基酸平衡的鸡肉粉代替鱼粉的配合饲料对凡纳滨对虾生长性能的影响2.1.3饲养管理养殖过程中每天分别在08:00，14:00，20:00定时投喂饲料，每次投喂2~3轮至饱食，第一轮少量投喂，确保虾能够快速摄食无残饵，1h后进行第二轮投喂，30min后吸去残料和粪便，记下残料量，并换水。每天换水量约为1/3。养殖试验持续56d。养殖期间水温25~28℃，盐度26~28，氨氮含量低于0.2mg/L，溶氧量4.7~5.3mg/L，pH8.0~8.2。2.1.4样品采集养殖试验结束后，对每桶虾称重，再将虾放回圆桶内稳定24h。在饲喂后10h，[94]每桶取10尾虾，用经预冷抗凝剂（配置1L抗凝剂：50mmol柠檬酸钠+10mmolEDTA•Na2+蒸馏水）润湿后的1mL注射器，从心脏取血淋巴，血淋巴样以4000r/min离心10min，收集血浆，血浆样本保存在-80℃冰箱中待测。抽完血后，剥离虾壳留取肌肉，保存在-20℃冰箱中。2.1.5样品测定饲料和全虾样品中水分含量采用105℃烘箱干燥法测定，粗蛋白含量采用Foss凯氏定氮仪测定；粗脂肪含量采用索氏抽提法测定；粗灰分含量采用马福炉灼烧法测定。[95]饲料氨基酸的测定：饲料样品先用6mol/LHCl真空110℃水解22h，再经0.45um滤膜过滤后，真空抽干，加入0.02mol/LHCl，用日立L-8900氨基酸分析仪检测。测定饲料色氨酸时用4mol/LNaOH水解样品。测定饲料含硫氨基酸时样品先用过甲酸（88%甲酸与30%过氧化氢按9:1）氧化，再用6mol/LHCl水解。[96]肌肉，血浆游离氨基酸的测定：将肌肉或血浆样品与4%的磺基水杨酸按3:1的比例混合，超声波破碎匀质，13000rpm/min下离心沉淀蛋白质。取上清液经0.45μm滤膜过滤，滤液用日立L-8900氨基酸分析仪检测。2.1.6计算方法成活率(Survivalrate,SR)（%）=100×（实验末虾数量/实验初虾数量）（2.1）增重率(Weightgainrate,WGR)（%）=100×（实验虾终末均重-实验虾初始均重）/实验虾初始均重（2.2）特定生长率(Specificgrowthrate,SGR)（%/d）=100×（Ln实验虾终末均重-Ln实验虾初始均重）/饲喂天数（2.3）饲料系数（Feedconversionratio,FCR）=实验虾进食总量/（实验虾终末重+死亡虾重量-实验虾初始重）（2.4）15 集美大学硕士学位论文基于氨基酸平衡的鸡肉粉代替鱼粉的配合饲料对凡纳滨对虾生长性能的影响2.1.7数据统计所有实验数据采用SPSS17.0统计软件进行单因素方差分析(one-wayANOVA)和二因素方差分析(two-wayANOVA)，若处理组之间存在显著差异（P<0.05），则采用Student-Newman-Keuls法进行多重比较分析，实验数据以平均值±标准差(mean±SD)的形式表示。2.2结果2.2.1生长性能由表2.5可知，饲料蛋白质水平和饲料氨基酸平衡性均显著影响凡纳滨对虾的生长性能。与31%饲料蛋白质水平相比，40%饲料蛋白质水平显著提高对虾WGR和SGR（P<0.05），降低FCR（P<0.05）。在每一个饲料蛋白质水平下，对照组对虾WGR（分别为774.2%和671.2%）显著高于其余各组（P<0.05），说明鸡肉粉替代鱼粉的饲料中无论添加EAA还是添加EAA+NEAA并不能完全达到对照组的生长性能水平。但在鸡肉粉替代鱼粉的饲料中添加氨基酸比不添加氨基酸能够明显地改善对虾生长性能，然而，同时添加EAA和NEAA对对虾生长的改善作用不大。对虾存活率在各组间无显著性差异（P>0.05）。饲料的蛋白质水平和饲料的氨基酸平衡之间交互作用不显著（P>0.05）。16 (%)SR存活率80.0±6.17.214.5±±a15.676.74.7cd79.2±b11.2±9.6b80.0±b10.370.0±d73.3±74.272.5bcbcFCR饲料系数1.46±0.020.030.06±±0.021.371.55±0.04±0.041.450.03±1.450.06±1.61±1.521.51dbcccabb特定生长率(%/d)SGR3.60±0.080.030.06±±d3.870.08b3.300.06±c0.02±c3.610.08±c3.640.07±a2.99±b3.33b3.43的鸡肉粉代替鱼粉的配合饲料对凡纳滨对虾生长性能的影响(%)WGR增重率11.8±774.2532.7±21.1651.5±31.4654.0±32.1671.2±26.7434.3±5.1546.1±28.5582.7±28.7dbcccabb17(g)0.05).FBW＜P基于氨基酸平衡末均重不同实验饲料对凡纳滨对虾生长性能的影响2.5(g)0.096<0.001<0.0010.899<0.001<0.001<0.001<0.001<0.001<0.001表IBW。初均重）0.05Tab.2.5Growthperformanceofshrimpfeddifferentexperimentaldiets.＜P处理组treatmentAAAminoacid(g/kg)-value)P集美大学硕士学位论文蛋白质水平Dietaryproteinlevel400310D1ANOVA(D2蛋白质水平0.37±0.00D3Proteinlevel(P)D4D53.24±0.030.37±0.00氨基酸处理0.37±0.01Aminoacidtreatment(A)D62.33±0.100.37±0.00P×A0.36±0.01D72.75±0.03注：同列数字上标小写字母不同表示差异显著（2.77±0.14D82.81±0.120.36±0.01Notes:Datainthesamecolumnwithdifferentlettersindicatesignificantdifference(0.36±0.011.95±0.040.36±0.012.35±0.142.48±0.06 集美大学硕士学位论文基于氨基酸平衡的鸡肉粉代替鱼粉的配合饲料对凡纳滨对虾生长性能的影响2.2.2体成分与31%饲料蛋白质水平相比，40%饲料蛋白质水平显著提高凡纳滨对虾的虾体水分、粗蛋白质和灰分含量（P<0.05），而降低粗脂肪含量（P<0.05）。在每一个饲料蛋白质水平下，氨基酸添加与否对凡纳滨对虾虾体成分没有明显的影响（P>0.05）。饲料的蛋白质水平和饲料氨基酸平衡性之间交互作用不显著（P>0.05）（表2.6）。18 bbbbaaaa灰分Ash0.010.010.01±0.01±0.01±4.010.02±4.000.01±4.020.01±4.02±3.96±3.983.973.98aaaabbbb粗脂肪Crudelipid0.030.020.08±0.06±0.01±1.070.05±1.080.07±1.040.04±1.07±1.19±1.281.201.24babbbaaaa粗蛋白的鸡肉粉代替鱼粉的配合饲料对凡纳滨对虾生长性能的影响Crudeprotein17.82±0.1117.49±0.4017.83±0.0817.70±0.0817.32±0.0117.20±0.1017.14±0.1217.24±0.13bccccaababa19水分Moisture0.05).＜P基于氨基酸平衡不同实验饲料对凡纳滨对虾体成分的影响（湿重基础）<0.001<0.0010.511<0.0010.626<0.0010.1880.062。2.6）表0.05氨基酸处理组＜PAminoacidtreatment-value)P0.596集美大学硕士学位论文0.184Tab.2.6Wholebodycompositionofshrimpfeddifferentexperimentaldiets(wetweightbasis)蛋白水平Dietaryproteinlevel40(%)0.29231ANOVA(0.496蛋白质水平Proteinlevel(P)D1氨基酸处理D2Aminoacidtreatment(A)D3P×AD4注：同列数字上标小写字母不同表示差异显著（D577.24±0.33Notes:Datainthesamecolumnwithdifferentlettersindicatesignificantdifference(D677.49±0.14D777.50±0.09D877.37±0.0276.83±0.1276.96±0.2076.94±0.10 集美大学硕士学位论文基于氨基酸平衡的鸡肉粉代替鱼粉的配合饲料对凡纳滨对虾生长性能的影响2.2.3血浆游离氨基酸饲料处理对凡纳滨对虾血浆游离氨基酸含量的影响总体不明显（除游离蛋氨酸、苯丙氨酸和赖氨酸）外（P>0.05）。（表2.7）。在每一个饲料蛋白质水平下，不添加晶体氨基酸的鸡肉粉组对虾血浆游离蛋氨酸、苯丙氨酸和赖氨酸含量显著低于其他各组。进一步对这三种血浆游离氨基酸含量与SGR进行拟合，结果发现，血浆游离蛋氨酸含量与SGR之间相关性很低，而血浆苯丙氨酸和赖氨酸含量分别与SGR之间相关性明显。上述3种氨基酸含量共同与SGR的关系则呈线性关系。此外，血浆游离EAA/NEAA比值与饲料EAA/NEAA比值也呈良好线性关系。见表2.8。20 bbbc－g/100mL)1.40±0.092.10±0.302.62±0.13babab－1.29±0.101.55±0.352.68±0.13aaa－1.08±0.031.25±0.212.35±0.12bbc－的鸡肉粉代替鱼粉的配合饲料对凡纳滨对虾生长性能的影响1.44±0.122.24±0.142.65±0.12bbc－211.48±0.182.30±0.442.63±0.14基于氨基酸平衡bbbc－1.49±0.112.14±0.33不同试验饲料对凡纳滨对虾血浆游离氨基酸含量的影响2.70±0.09aaab2.7表－1.14±0.211.50±0.272.23±0.21bbc－Ile1.49±0.101.45±0.071.46±0.201.57±0.171.31±0.101.45±0.101.42±0.121.38±0.13Phe1.58±0.05Asp0.25±0.020.24±0.020.21±0.030.26±0.020.26±0.030.24±0.030.26±0.050.29±0.05AAThrVal0.51±0.090.42±0.120.45±0.080.50±0.060.37±0.080.27±0.090.34±0.100.38±0.120.43±0.050.33±0.080.36±0.090.40±0.100.37±0.060.31±0.050.32±0.090.35±0.09D1MetLeuD22.57±0.232.52±0.582.64±0.202.61±0.512.36±0.332.84±0.402.85±0.232.87±0.632.66±0.17HisD32.40±0.391.75±0.362.00±0.681.95±0.231.93±0.301.66±0.271.93±0.351.73±0.44ArgLys4.64±0.604.86±0.494.82±0.414.17±0.274.66±0.324.97±0.745.02±0.604.30±0.48D4Trp2.52±0.33SerD5Glu0.48±0.220.38±0.160.31±0.100.58±0.340.42±0.280.36±0.260.49±0.310.50±0.32Pro0.31±0.040.31±0.060.32±0.020.37±0.060.35±0.030.35±0.030.35±0.040.37±0.04Gly8.46±0.508.28±0.858.49±0.318.15±0.977.82±0.817.94±0.677.85±0.387.70±0.56D6Ala5.37±0.605.61±0.624.97±0.795.13±0.674.38±0.415.33±0.584.95±0.105.14±0.37Cys2.78±0.582.69±0.303.11±0.592.84±0.722.89±0.363.28±0.263.29±0.492.71±0.270.99±0.140.97±0.120.93±0.130.96±0.100.98±0.110.95±0.130.97±0.180.98±0.15D7D8集美大学硕士学位论文Tab.2.7Plasmafreeaminoacidconcentrationsofshrimpfeddifferentexperimentaldiets氨基酸(mEAA苏氨酸缬氨酸蛋氨酸异亮氨酸亮氨酸苯丙氨酸组氨酸赖氨酸精氨酸色氨酸NEAA天冬氨酸丝氨酸谷氨酸脯氨酸甘氨酸丙氨酸胱氨酸 P2R的关系EAA/NEAA。0.006+2.3860.945）3与饲料X2.9-0.7362（表+2.471X+3.354X）0.9070.9050.0030.003X的鸡肉粉代替鱼粉的配合饲料对凡纳滨对虾生长性能的影响EAA/NEAA)ofshrimporbetweenshrimpplasmaEAA/NEAAanddietary-0.452-1.405+2.370>0.05XRegressiveequation22X1+0.210P0.941XXX）及血浆X=0.030=1.078=-0.131=0.784回归方程YYYY22EAA/NEAA0.05).基于氨基酸平衡＜PCorrelation:）3X）与血浆游离氨基酸含量（)andplasmafreeaminoacidcontent(YY蛋氨酸（。+）Correlation:）2）0.05XX＜（PCorrelation:苯丙氨酸（Correlation:）+）X）1EAA/NEAA凡纳滨对虾特定生长率（XX2.8-饲料表）Y-赖氨酸（-苯丙氨酸（-赖氨酸（（）））40.86±2.6739.01±1.3838.51±6.0239.47±1.7836.76±3.8336.57±4.6536.33±6.4636.01±4.70YYY肌肉游离氨基酸D2D3D4D5D6D7D8AAD1TyrTau1.26±0.101.01±0.131.13±0.050.95±0.160.95±0.080.99±0.120.93±0.210.93±0.133.54±0.353.49±0.163.63±0.353.12±0.343.29±0.323.47±0.153.42±0.363.53±0.272.7EAA/NEAA各饲料组间所有肌肉中各种游离氨基酸和总游离氨基酸均无显著性差异（Tab.2.8Relationshipsbetweenspecificgrowthrate(集美大学硕士学位论文续表氨基酸酪氨酸牛磺酸总游离氨基酸EAA/NEAA45/5541/5944/5644/5645/5541/5944/5644/56注：同行数字上标小写字母不同表示差异显著（Notes:Datainthesamerowwithdifferentlettersindicatesignificantdifference(特定生长率（特定生长率（特定生长率（血浆2.2.4 (mg/100g)的鸡肉粉代替鱼粉的配合饲料对凡纳滨对虾生长性能的影响23基于氨基酸平衡不同实验饲料对凡纳滨对虾肌肉游离氨基酸含量的影响2.9表Ile6.18±0.555.97±0.146.17±0.695.95±0.386.28±0.406.63±0.426.51±0.636.18±0.80Phe24.18±1.5825.61±0.8127.35±1.3126.14±1.7226.16±2.2524.42±1.3624.18±1.5425.93±0.55Asp0.92±0.060.68±0.170.77±0.080.76±0.240.78±0.160.86±0.100.74±0.140.85±0.10AAThrVal130.8±5.5129.7±9.1131.1±7.5134.1±8.8130.1±3.6132.0±9.7132.9±7.9128.7±5.1Met9.31±0.718.88±0.258.89±0.519.16±0.549.03±1.089.10±0.519.49±1.129.10±0.25D14.22±0.533.83±0.334.20±0.563.82±0.704.09±0.294.41±0.484.38±0.674.39±0.73D2Leu14.62±0.6213.58±0.6615.02±0.7215.02±0.7314.88±1.2913.98±1.3913.69±1.4614.57±1.29HisD3Lys55.62±3.3052.57±2.9154.63±4.6853.93±4.6152.73±3.6355.94±3.0854.73±1.7455.97±3.07Arg33.82±4.6432.29±1.8436.08±5.0734.05±1.4036.92±2.8336.01±2.7735.08±2.5634.64±2.23Trp276.1±9.6287.8±24.2270.1±4.7259.7±3.8242.9±16.0242.0±21.0250.8±24.1243.2±12.8D43.58±0.583.20±0.233.91±0.823.71±0.583.59±0.263.57±0.403.59±0.393.76±0.42SerD5Glu18.08±1.1917.62±1.1617.90±1.1918.22±1.1416.70±2.2618.45±2.3317.79±1.9019.48±0.12158.6±9.4149.2±6.9152.2±11.6149.9±5.0156.8±6.3163.5±4.9155.3±10.0159.9±5.9ProGlyD642.93±6.8543.95±1.6745.11±5.1444.79±6.4145.56±2.2847.74±1.9048.94±0.6244.81±3.05142.0±5.3150.8±4.3149.1±5.7150.2±6.6144.8±9.1150.8±6.6141.1±4.1147.2±8.3AlaCys20.41±0.5726.53±2.8724.94±0.3223.90±3.4121.83±2.3926.43±2.9524.62±3.7123.37±2.41D753.87±3.8357.84±1.7153.78±4.5158.89±5.2453.89±2.4549.91±5.3348.44±2.7653.72±5.15D8A集美大学硕士学位论文ATab.2.9Musclefreeaminoacidconcentrationsofshrimpfeddifferentexperimentaldiets氨基酸E苏氨酸缬氨酸蛋氨酸异亮氨酸亮氨酸苯丙氨酸组氨酸赖氨酸精氨酸色氨酸NEAA天冬氨酸丝氨酸谷氨酸脯氨酸甘氨酸丙氨酸胱氨酸 的鸡肉粉代替鱼粉的配合饲料对凡纳滨对虾生长性能的影响240.05).基于氨基酸平衡＜P。）0.05＜P997.2±28.5996.6±26.3993.2±13.0997.3±10.8992.1±29.2990.7±21.1986.1±37.0981.1±12.6TyrAATau1.68±0.101.57±0.111.61±0.111.63±0.041.66±0.081.63±0.131.58±0.161.66±0.0814.05±1.6612.48±2.0714.86±0.8814.59±1.1712.45±1.9613.87±1.9612.34±2.5613.33±1.07D1D2D3D4D5D6D7D82.9集美大学硕士学位论文续表氨基酸酪氨酸牛磺酸总游离氨基酸EAA/NEAA55/4555/4555/4554/4656/4453/4754/4653/47注：同行数字上标小写字母不同表示差异显著（Notes:Datainthesamerowwithdifferentlettersindicatesignificantdifference( 集美大学硕士学位论文基于氨基酸平衡的鸡肉粉代替鱼粉的配合饲料对凡纳滨对虾生长性能的影响2.3讨论2.3.1生长性能[90]本试验表明，高的饲料蛋白质水平明显促进凡纳滨对虾的生长和饲料利用率。Ye等的结果也表明38%饲料蛋白质水平比33%饲料蛋白质水平更有利于凡纳滨对虾生长，说明凡纳滨对虾在快速生长阶段仍需要较高的饲料蛋白质水平以满足其生长发育的需要。饲料[39,97][97]氨基酸平衡性将关系到水产动物能否正常生长。Gaylord等在以鸡肉粉为主要蛋白源的饲料中补充几种EAA，使饲料EAA组成与杂交条纹鲈肌肉氨基酸组成相近，结果发现，在饲料中补充赖氨酸没有促进鲈鱼的生长，而在饲料中补充赖氨酸+蛋氨酸能明显提高鲈鱼生长和饲料效率，但在饲料中补充赖氨酸+蛋氨酸+苏氨酸后鲈鱼的生长与饲料效率又有所下降，而在饲料中补充赖氨酸+蛋氨酸+苏氨酸+亮氨酸相比于补充赖氨酸+蛋氨酸+[98]苏氨酸，鲈鱼生长性能又有所提高。Gaylord等认为，添加苏氨酸可能与支链氨基酸（亮氨酸、异亮氨酸、缬氨酸）在肠道产生运输竞争，使亮氨酸成为限制性氨基酸，因此降低[99]14了鲈鱼的生长。Fraga等研究了C亮氨酸在小鼠与人体肠道上皮细胞的吸收转运过程，证实了亮氨酸与支链氨基酸、芳香族氨基酸、蛋氨酸、组氨酸及色氨酸之间均存在运输竞争。上述研究表明，只注重个别氨基酸的平衡可能会竞争性抑制其他氨基酸的吸收从而产生新的限制性氨基酸，引起新的饲料氨基酸不平衡性问题。在本实验中，通过在鸡肉粉替代鱼粉的饲料中添加晶体EAA或同时添加晶体EAA和NEAA，使饲料中的EAA或EAA和NEAA水平与鱼粉组的一致，以期获得理想饲喂效果，结果表明，无论在高还是低的饲料蛋白水平下，添加氨基酸的试验组凡纳滨对虾的生长速度均比鱼粉组的低，说明即使用晶体氨基酸直接补齐鸡肉粉完全替代鱼粉饲料中EAA或EAA和NEAA的不足，并且满足凡纳滨对虾生长的需求（表2.4），但也未必能够获得理想的饲喂效果，因此，通过采取在鸡肉粉替代鱼粉的饲料中直接添加晶体氨基酸来平衡饲料氨基酸——这一方式对凡纳滨[73]对虾的生长促进作用是有限的。由于CAA的生理活性不如蛋白质水解的氨基酸，这在[12]养殖动物，尤其是鱼虾，不能很好地利用添加到饲料中的CAA。目前普遍认可的鱼虾利用CAA差的原因是CAA在消化道中吸收速度快于完整蛋白降解的氨基酸吸收速度，二者[100]通过血液进入组织存在时间差，在组织中的代谢周转也不同步地进行，从而降低氨基酸[61]利用率。有研究指出，饲料中过高的鱼粉蛋白质替代水平不利于鱼虾对CAA的利用。在本实验中，鸡肉粉全部替代鱼粉蛋白质同样会降低凡纳滨对虾对饲料中CAA的利用率。由于试验饲料中鱼粉蛋白质替代水平为100%，因此，作为试验饲料主要蛋白源的鸡肉粉[4,11]势必会影响饲料适口性，这与鸡肉粉以大比例替代鱼粉后饲料中饱和脂肪酸的含量增[101]加而多不饱和脂肪酸含量相应下降有关。可见，试验饲料适口性的下降导致凡纳滨对虾摄食量减少从而降低了生长速度。此外，尽管试验组饲料的EAA水平与鱼粉组饲料一致，但由于鸡肉粉的氨基酸利用率低于鱼粉，因此试验组饲料中实际用于鱼生长的EAA量有25 集美大学硕士学位论文基于氨基酸平衡的鸡肉粉代替鱼粉的配合饲料对凡纳滨对虾生长性能的影响[102]限，这也是鸡肉粉以大比例替代鱼粉造成凡纳滨对虾生长不佳的一个原因。除了饲料氨基酸水平满足对虾需要之外，氨基酸之间的平衡性也在一定程度上影响饲喂效果。本试验表明，鸡肉粉+EAA组、鸡肉粉+EAA+NEAA组对虾生长速度明显比鸡肉粉组的快，饲料利用率明显改善。但饲料中进一步补充晶体NEAA并未起到进一步提高[35]凡纳滨对虾生长性能的作用，这可能与饲料中EAA与NEAA的比率有关。Peres等报道，饲料中EAA/NEAA为60/40时，欧洲海鲈获得最大的饲料利用率。当饲料EAA/NEAA为[36]57/43时，虹鳟获得最大氮沉积与最小氮排泄。本试验鱼粉组饲料EAA/NEAA为44/56，鸡肉粉+EAA组和鸡肉粉+EAA+NEAA组饲料的EAA/NEAA均为42/58，鸡肉粉组饲料EAA/NEAA为40/60，以鸡肉粉组饲料的为最低，这也与凡纳滨对虾生长性能的结果一致。通过平衡饲料氨基酸来改善饲料效率反过来又可以减少饲料蛋白质浪费，从而达到在不影[39]响生长性能的前提下降低饲料蛋白质水平的目的。2.3.2体成分本试验结果显示，饲料蛋白质水平明显影响虾体成分，高饲料蛋白质水平促进凡纳滨[90]对虾虾体蛋白质和灰分沉积，该结果与Ye等报道的结果一致，相反，高饲料蛋白质水[90][103]平降低虾体脂肪沉积，该结果与Ye等和Mu等的结果一致。低饲料蛋白质水平导致虾体蛋白质沉积降低而体脂沉积增加，原因可能是，低的饲料蛋白质水平更易出现氨基酸平衡失衡问题，尤其是EAA的失衡（表2.4），因此，部分EAA被用于能量代谢，过多能[41]量会转化为脂肪并以体脂的形式沉积，而相应地减少了氨基酸用于蛋白质的沉积。Xie等研究表明，饲料赖氨酸含量从1.44%升到1.99%时，凡纳滨对虾虾体的蛋白质含量变化不明显，而当饲料赖氨酸含量增加到2.23%时，虾体蛋白质含量出现明显增加。他们认为，饲料赖氨酸的缺乏可能增加了其他EAA的氧化，降低了氨基酸的沉积。在每一个饲料蛋白质水平下，外源添加氨基酸与否并不影响凡纳滨对虾的虾体成分，可见，凡纳滨对虾的虾体成分不受饲料氨基酸的平衡性影响。2.3.3血浆及肌肉游离氨基酸水产动物体内游离氨基酸水平能够在一定程度上反映不同饲料蛋白质的利用程度[63,104]。在本试验中，尽管鸡肉粉组的饲料苏氨酸、蛋氨酸、苯丙氨酸和组氨酸低于凡纳滨对虾需求水平，而赖氨酸则满足需求（见表2.4），但饲养试验结果表明，只有该饲料组凡纳滨对虾的血浆游离赖氨酸、蛋氨酸和苯丙氨酸明显低于鱼粉组的水平，苏氨酸和组氨酸并没有出现不足。由此可见，饲料赖氨酸、蛋氨酸、苯丙氨酸进入凡纳滨对虾外周血液循环过程中极易造成缺乏，可能与消化吸收过程中氨基酸之间的拮抗作用有关，但具体的机[33]制还不清楚。Berge等报道，赖氨酸与精氨酸在大西洋鲑肠道中竞争相同转运载体，低浓度的赖氨酸能够促进精氨酸的吸收，高浓度的赖氨酸则抑制精氨酸的吸收，而精氨酸在[34]任何浓度下都会阻碍肠道对赖氨酸的吸收。Berge等的体外研究结果表明，培养液中低26 集美大学硕士学位论文基于氨基酸平衡的鸡肉粉代替鱼粉的配合饲料对凡纳滨对虾生长性能的影响浓度的蛋氨酸在大西洋鲑肠道中的吸收会被其他氨基酸所抑制，然而当蛋氨酸浓度提高到一定水平，这种抑制作用又会被解除，当培养液中缺乏某些氨基酸时，也会降低肠道对蛋氨酸的吸收。当饲喂添加晶体EAA或晶体EAA+NEAA的鸡肉粉替代鱼粉的饲料后，对虾血浆游离赖氨酸、蛋氨酸、苯丙氨酸恢复到鱼粉组的水平，这与通过添加氨基酸使鱼粉替代饲料的氨基酸平衡性得到改善有关。凡纳滨对虾生长与其血浆游离赖氨酸或苯丙氨酸水平变化密切相关，且对虾的特定生长率随其血浆赖氨酸或苯丙氨酸水平的上升而增加。这说明饲料中某些EAA的缺乏或饲料氨基酸不平衡都可能会减少凡纳滨对虾对某些EAA的吸[41,105]收，降低其在血浆中的浓度，导致凡纳滨对虾的生长变慢。凡纳滨对虾肌肉组织中游离氨基酸浓度在各处理组间无明显变化，这可能是因为肌肉组织中的蛋白质分解与合成处[95]于相对平衡的状态。Mente等的研究证实，凡纳滨对虾肌肉组织细胞内游离氨基酸的运输是依靠主动的跨膜运输来调节。本实验还发现，所有饲料组对虾血浆游离EAA/NEAA均比肌肉组织中游离EAA/NEAA低，可能反映了不同组织对EAA和NEAA代谢强度的不同[106]。由于凡纳滨对虾血浆游离EAA/NEAA与饲料EAA/NEAA之间呈正线性关系，其变化[107]直接与饲料氨基酸丰度与平衡性关系密切，因此，血浆游离氨基酸起到了动物机体氨基酸代谢的中转库作用。2.4小结（1）在鸡肉粉完全替代鱼粉的饲料中添加晶体EAA比不添加晶体EAA对凡纳滨对虾的生长促进效果明显，但仍达不到鱼粉组的饲喂效果。在添加了晶体EAA的鸡肉粉组饲料中进一步补充晶体NEAA对凡纳滨对虾的生长没有明显促进作用。（2）饲喂高蛋白质水平（40%）的饲料比饲喂低蛋白质水平（32%）的饲料更能促进凡纳滨对虾的生长，且高饲料蛋白质水平增加凡纳滨对虾的体蛋白质沉积，减少体脂肪沉积。27 集美大学硕士学位论文基于氨基酸平衡的鸡肉粉代替鱼粉的配合饲料对凡纳滨对虾生长性能的影响第3章鸡肉粉替代鱼粉饲料中补充包被EAA和NEAA对凡纳滨对虾生长性能、体成分、血浆及肌肉氨基酸含量的影响3.1材料与方法3.1.1试验饲料本试验按2×6因子试验设计，设两个饲料蛋白质水平（40%和32%）。每个蛋白质水平下设置鱼粉组（对照组）、鸡肉粉组（鸡肉粉完全替代鱼粉组）、鸡肉粉+晶体EAA组、鸡肉粉+包被EAA组、鸡肉粉+晶体EAA+晶体NEAA组、鸡肉粉+包被EAA+包被NEAA组，饲料配方及常规成分列于表3.1。在40%饲料蛋白质水平下，试验料分别记为D1-D6，其中D2不添加氨基酸，D3、D4分别补足相对于D1缺乏的EAA，D5、D6分别补足相对于D1缺乏的EAA+NEAA；在32%饲料蛋白质水平下，试验料分别记为D7-D12，其中D8不添加氨基酸，D9、D10分别补足相对于D7缺乏的EAA，D11、D12分别补足相对于D7缺乏的EAA+NEAA。将所有原料用粉碎机粉碎后过80目筛网，逐级混匀后，每千克饲料再加入约400mL的蒸馏水继续混匀，然后用制粒机制成直径为1.5mm的硬颗粒饲料，自然风干后于-20℃冰箱保存备用。饲料氨基酸组成和凡纳滨对虾必需氨基酸建议需要量列于表3.4。3.1.1.1包被氨基酸壁材的选择与制作对水产动物而言，尤其是虾类，饲料高的耐水性有助于减少营养物质在水中的溶失，提高饲料效率。常用的包被壁材有蛋白质和脂类，由于脂类具有很高的耐水[108-112]性，而CAA易溶于水，因此使用脂类作为包被CAA的壁材更为理想。本试验使用的包被壁材为硬化牛油，其熔点在58~62℃左右。使用熔化冷凝分散法制作包被氨基酸，操作步骤如下：将硬化牛油于70℃熔化，与粉碎后的晶体氨基酸1:1混合，搅拌分散，滴加到70℃丙二醇、甲醇混合溶液（2:1）中，用磁力搅[68]拌器搅拌得到分散液滴，迅速冷却，过滤、干燥后得硬化油脂包膜氨基酸。3.1.1.2包被氨基酸溶失率的测定取20ml蒸馏水于烧杯中，加入0.4g结晶或硬化油脂包被氨基酸，分别浸泡5min、10min、20min、40min后，迅速过滤，取10ml上清液，用凯氏定氮仪测定水中氮含量，计算氨基酸溶失率。氨基酸溶失率=100×（加入氨基酸一定时间后水中氮含量-蒸馏水中氮含量）/加入氨基酸的氮含量（3.1）28 0.25g个桶为一个3尾，每(g/kg)30个月后对虾规格达到1）中，每桶150L的鸡肉粉代替鱼粉的配合饲料对凡纳滨对虾生长性能的影响的循环水装置的圆桶内培育，291000L个个循环水装置的圆桶（含水236基于氨基酸平衡饲料组成及营养水平（风干基础）3.1表，随机分配到）0.30±0.01g380.00.00.00.00.00.0285.00.00.00.00.00.0200.0200.0200.0200.0200.0200.0150.0150.0150.0150.0150.0150.0100.0100.0100.0100.0100.0100.075.075.075.075.075.075.00.0397.0397.0397.0397.0397.00.0297.0297.0297.0297.0297.0186.6186.6186.6186.6186.6186.6349.3349.3349.3349.3349.3349.314.532.920.68.316.50.010.825.115.76.412.60.021.74.04.04.04.04.027.214.114.114.114.114.121.74.04.04.04.04.027.214.114.114.114.114.120.020.020.020.020.020.020.020.020.020.020.020.02.52.52.52.52.52.52.52.52.52.52.52.52.02.02.02.02.02.02.02.02.02.02.02.02.02.02.02.02.02.02.02.02.02.02.02.0个处理组。12VitaminpremixCornstarch试验动物CholinechlorideCholesterolShrimpheadmealLecithin从厦门翔安养殖场购进健康凡纳滨对虾虾苗，放入IngredientFishmealD1D2D3D4D5D6D7D8D9D10D11D12SoyabeanmealFishoilSoybeanoil集美大学硕士学位论文3.1.2左右，选取较大规格的虾苗（处理组，共Tab.3.1Ingredientsandcompositionofexperimentaldiets(air-drybasis)原料鱼粉豆粕虾头粉鸡肉粉Poultryby-productmeal玉米淀粉微晶纤维素Crystallinecellulose鱼油豆油卵磷脂氯化胆碱胆固醇多种维生素 。3.2的鸡肉粉代替鱼粉的配合饲料对凡纳滨对虾生长性能的影响。晶体氨基酸和硬化油脂包被氨基酸混合物组成列于表30=1:1Hardenedlipid:Crystallineaminoacid=1:1;Crystallineaminoacidandaminoacidscoatedwith②基于氨基酸平衡硬化油脂：晶体氨基酸；②）>98.5%2.02.02.02.02.02.02.02.02.02.02.02.015.015.015.015.015.015.015.015.015.015.015.015.020.020.020.020.020.020.020.020.020.020.020.020.02.02.02.02.02.02.02.02.02.02.02.02.010.010.010.010.010.010.010.010.010.010.010.010.00.00.012.30.016.40.00.00.09.40.012.50.00.00.00.024.60.032.90.00.00.018.70.025.11000.01000.01000.01000.01000.01000.01000.01000.01000.01000.01000.01000.0)24①PO2②MineralpremixCa(HSodiumalginatelevelNutrientproteinCrude403.2402.5404.1405.2406.6404.1321.0322.5324.9322.8325.6325.3CVitaminCObtainedfromGenearyBiotechCo.,Ltd,shanghai,China(Purity>98.5%);matterDrylipid75.776.979.394.476.988.978.079.177.590.280.192.3911.5910.7913.7908.2917.6915.3919.2908.5911.2907.4914.8904.7CrudeAsh由上海捷瑞生物工程有限公司提供（纯度79.076.972.478.975.477.166.767.567.364.866.264.53.1①IngredientD1D2D3D4D5D6D7D8D9D10D11D12集美大学硕士学位论文续表原料多种矿物质磷酸二氢钙海藻酸钠维生素预糊化淀粉Pregelatinizedstarch晶体氨基酸Crystallineaminoacids硬化油脂包被氨基酸Aminoacidscoatedwithhardenedlipid合计营养水平干物质粗蛋白质粗脂肪粗灰分注：①Notes:hardenedlipidmixcompositionsshowninTable3.2. 集美大学硕士学位论文基于氨基酸平衡的鸡肉粉代替鱼粉的配合饲料对凡纳滨对虾生长性能的影响表3.2晶体氨基酸和硬化油脂包被氨基酸混合物组成（风干物质）Tab.3.2Compositionofcrystallineaminoacidandhardenedlipidcoatedaminoacidsmix(air-drybasis)(g/kg)氨基酸AAD3D4D5D6D9D10D11D12EAA苏氨酸Thr0.920.920.920.920.710.710.710.71缬氨酸Val0.640.640.640.640.500.500.500.50蛋氨酸Met1.991.991.991.991.501.501.501.50异亮氨酸Ile1.141.141.141.140.870.870.870.87亮氨酸Leu1.021.021.021.020.790.790.790.79苯丙氨酸Phe0.180.180.180.180.150.150.150.15组氨酸His2.312.312.312.311.741.741.741.74赖氨酸Lys3.463.463.463.462.622.622.622.62色氨酸Trp0.630.630.630.630.470.470.470.47NEAA天冬酰胺Asp0.000.001.821.820.000.001.401.40酪氨酸Tyr0.000.000.320.320.000.000.250.25牛磺酸Tau0.000.002.022.020.000.001.521.5231 集美大学硕士学位论文基于氨基酸平衡的鸡肉粉代替鱼粉的配合饲料对凡纳滨对虾生长性能的影响表3.3原料氨基酸含量（风干基础）Tab.3.3Aminoacidprofileofproteinsourceusedintheexperiment(air-drybasis)(%)氨基酸AA鱼粉豆粕虾头粉鸡肉粉FishmealSoyabeanmealShrimpheadmealPoultryby-productmealEAA苏氨酸Thr2.501.791.952.16缬氨酸Val2.772.082.222.49蛋氨酸Met2.070.441.351.48异亮氨酸Ile2.391.931.732.00亮氨酸Leu4.273.403.253.83苯丙氨酸2.462.251.762.31Phe组氨酸His1.831.180.891.17赖氨酸Lys4.663.103.373.59精氨酸Arg3.243.042.733.75色氨酸Trp0.520.460.490.34NEAA天冬酰胺5.174.934.524.49Asn丝氨酸Ser2.232.201.722.37谷氨酸Glu7.148.055.806.96脯氨酸Pro2.091.782.283.22甘氨酸Gly3.251.893.965.60丙氨酸Ala3.521.923.233.70胱氨酸Cys0.540.530.450.62酪氨酸Tyr1.881.421.441.72牛磺酸Tau①0.70-0.130.16注：①未检出。Notes:①Nodetected.32 ②③②③③③②①1.41.50.91.32.12.70.8(3.6)(3.4)(2.2)(2.7)(4.3)(7.7)(2.1)(%)1.01.27(3.90)0.73(2.24)0.98(3.01)1.90(5.84)2.02(6.21)0.77(2.37)7(3.29)1.15(3.53)1.30(3.99)0.66(2.03)1.05(3.22)2.01(6.17)2.04(6.27)0.79(2.43)1.13(3.50)1.29(4.00)0.72(2.23)1.08(3.35)2.07(6.41)2.13(6.60)0.80(2.48)1.18(3.63)1.25(3.85)0.71(2.19)1.10(3.39)1.92(5.91)2.11(6.49)0.73(2.25)的鸡肉粉代替鱼粉的配合饲料对凡纳滨对虾生长性能的影响0.96(2.98)1.22(3.78)0.55(1.71)0.91(2.82)1.81(5.61)2.08(6.45)0.58(1.80)1.11(3.46)1.28(3.99)0.66(2.06)1.00(3.12)1.95(6.07)2.07(6.45)0.77(2.40)331.40(3.46)1.55(3.84)0.97(2.40)1.38(3.41)2.58(6.38)2.74(6.78)0.95(2.35)基于氨基酸平衡试验饲料氨基酸含量（风干基础）3.4表1.49(3.66)1.64(4.03)0.95(2.34)1.43(3.52)2.57(6.32)2.66(6.54)0.94(2.31)1.48(3.65)1.59(3.92)0.91(2.25)1.45(3.58)2.65(6.54)2.71(6.69)0.95(2.34)1.45(3.59)1.61(3.98)1.02(2.52)1.37(3.39)2.63(6.51)2.70(6.68)0.92(2.28)1.31(3.25)1.46(3.63)0.71(1.76)1.25(3.11)2.44(6.06)2.74(6.81)0.72(1.79)D1D2D3D4D5D6D7D8D9D10D11D12R1.43(3.5)1.58(3.92)1.00(2.48)1.42(3.52)2.60(6.45)2.72(6.75)0.98(2.43)Tab.3.4Aminoacidprofileofexperimentaldiets(air-drybasis)酪氨酸集美大学硕士学位论文氨基酸AAEAA苏氨酸Thr缬氨酸Val蛋氨酸Met异亮氨酸Ile亮氨酸Leu苯丙氨酸+Phe+Tyr组氨酸His ②③④①2.02.20.3－－－－－(5.3)(5.4)(0.7)1.95(5.99)1.73(5.32)0.27(0.83)2.32(7.13)1.17(3.60)3.711.27(3.90)2.17(6.67)(11.40)1.97(6.05)1.68(5.16)0.23(0.71)2.38(7.31)1.15(3.53)3.611.31(4.02)2.26(6.94)(11.09)1.97(6.10)1.71(5.30)0.28(0.87)2.22(6.88)1.14(3.53)3.661.33(4.12)2.04(6.32)(11.34)2.02(6.22)1.63(5.02)0.25(0.77)2.13(6.56)1.23(3.79)3.701.19(3.66)2.15(6.62)(11.39)的鸡肉粉代替鱼粉的配合饲料对凡纳滨对虾生长性能的影响1.68(5.21)1.67(5.18)0.16(0.50)2.11(6.54)1.16(3.60)3.631.28(3.97)2.08(6.45)(11.26)1.93(6.01)1.48(4.61)0.20(0.62)2.35(7.32)1.21(3.77)3.540.91(2.83)1.42(4.42)(11.03)342.73(6.76)2.34(5.79)0.36(0.89)3.29(8.14)1.57(3.89)4.911.81(4.48)3.22(7.97)(12.15)基于氨基酸平衡2.73(6.71)2.35(5.78)0.29(0.71)3.31(8.14)1.59(3.91)4.921.77(4.35)3.24(7.97)(12.10)2.73(6.74)2.27(5.60)0.33(0.81)3.02(7.45)1.65(4.07)4.871.69(4.17)3.17(7.82)(12.02)2.73(6.67)2.33(5.77)0.35(0.87)2.97(7.35)1.61(3.98)4.941.74(4.31)3.15(7.80)(12.22)2.38(5.91)2.31(5.74)0.31(0.77)3.03(7.53)1.62(4.02)4.901.76(4.37)3.23(8.02)(12.17)D1D2D3D4D5D6D7D8D9D10D11D12R2.73(6.77)2.09(5.18)0.30(0.74)3.20(7.94)1.51(3.75)4.881.18(2.93)2.11(5.23)(12.10)3.4集美大学硕士学位论文续表氨基酸AA赖氨酸Lys精氨酸Arg色氨酸TrpNEAA天冬氨酸Asp丝氨酸Ser谷氨酸Glu脯氨酸Pro甘氨酸Gly Values③[93]1.55(4.76)0.20(0.61)0.78(2.40)0.16(0.49)该值基于王用黎等1.60(4.91)0.24(0.74)0.89(2.73)0.20(0.61)；④[92]等1.59(4.93)0.21(0.65)0.85(2.63)0.15(0.46)ValuesarebasedonAkiyama(1992);Wilson②1.53(4.71)0.25(0.77)0.82(2.52)0.12(0.37)该值基于；③[91]的鸡肉粉代替鱼粉的配合饲料对凡纳滨对虾生长性能的影响等1.56(4.84)0.22(0.68)0.79(2.45)0.08(0.25)Akiyama1.44(4.49)0.17(0.53)0.88(2.74)0.31(0.97)该值基于Recommendedrequirementforshrimp;①355251/4947/5350/5050/5049/5149/512.15(5.32)0.37(0.92)1.14(2.82)0.23(0.57)基于氨基酸平衡2.03(4.99)0.35(0.86)1.19(2.93)0.27(0.66)2.18(5.38)0.27(0.67)1.13(2.79)0.13(0.32)凡纳滨对虾必需氨基酸建议需要量；②2.17(5.37)0.30(0.74)1.15(2.85)0.08(0.20)epercentageofaminoacidofdietaryprotein.2.21(5.49)0.34(0.84)1.22(3.03)0.11(0.27)ValuesarebasedonWangYongli(2013).④D1D2D3D4D5D6D7D8D9D10D11D12(4.59)0.33(0.82)1.17(2.90)0.25(0.62)3.4Ala1.85CysTyrTau集美大学硕士学位论文续表氨基酸AA丙氨酸胱氨酸酪氨酸牛磺酸EAA/NEAA50/5046/5449/5149/5148/5248/注：括号内表示氨基酸占饲料蛋白质的含量。①Notes:ValuesinparenthesesareexpressedastharebasedonWilson(2003); 集美大学硕士学位论文基于氨基酸平衡的鸡肉粉代替鱼粉的配合饲料对凡纳滨对虾生长性能的影响3.1.3饲养管理养殖过程中每天分别在08:00，14:00，20:00定时投喂饲料，每次投喂2~3轮至饱食，第一轮少量投喂，确保虾能够快速摄食无残饵，1h后进行第二轮投喂，30min后吸去残料和粪便，记下残料量，并换水。每天换水量约为1/3。养殖试验持续56d。养殖期间水温25~30℃，盐度26~29‰，氨氮含量低于0.2mg/L，溶氧量4.7~5.5mg/L，pH8.0~8.4。3.1.4样品采集养殖试验结束后，对每桶虾称重，再将虾放回圆桶内稳定24h。在饲喂后30min，[94]用经预冷抗凝剂（配置1L抗凝剂：50mmol柠檬酸钠+10mmolEDTA•Na2+蒸馏水）润湿后的1mL注射器，从虾的心脏取血，血样以4000r/min离心10min，收集血浆，血浆样本保存在-80℃冰箱中待测。抽完血后，剥离虾壳留取肌肉，保存在-20℃冰箱中。3.1.5样品测定饲料和全虾样品中水分含量采用105℃烘箱干燥法测定，粗蛋白含量采用Foss凯氏定氮仪测定；粗脂肪含量采用索氏抽提法测定；粗灰分含量采用马福炉灼烧法测定。[95]饲料氨基酸及肌肉氨基酸含量的测定：取风干饲料或风干肌肉样品先用6mol/LHCl真空110℃水解22h，再经0.45μm滤膜过滤后，真空抽干，加入0.02mol/LHCl，用日立L-8900氨基酸分析仪检测。测定饲料色氨酸时用4mol/LNaOH水解样品。测定饲料含硫氨基酸时样品先用过甲酸（88%甲酸与30%过氧化氢按9:1）氧化，再用6mol/LHCl水解。36 集美大学硕士学位论文基于氨基酸平衡的鸡肉粉代替鱼粉的配合饲料对凡纳滨对虾生长性能的影响[96]血浆游离氨基酸的测定：将血浆样品与4%的磺基水杨酸按3:1的比例混合，超声波匀质，13000rpm/min下离心沉淀蛋白质。取上清液经0.45μm滤膜过滤，滤液用日立L-8900氨基酸分析仪检测。3.1.6计算方法成活率(Survivalrate,SR)（%）=100×（实验末虾数量/实验初虾数量）（3.2）增重率(Weightgainrate,WGR)（%）=100×（实验虾终末均重－实验虾初始均重）/实验虾初始均重（3.3）特定生长率(Specificgrowthrate,SGR)（%/d）=100×（Ln实验虾终末均重－Ln实验虾初始均重）/饲喂天数（3.4）饲料系数（Feedconversionratio,FCR）=实验虾进食总量/（实验虾终末重+死亡虾重量－实验虾初始重）（3.5）3.1.7数据统计所有实验数据采用SPSS17.0统计软件进行单因素方差分析(one-wayANOVA)和二因素方差分析(two-wayANOVA)，若处理组之间存在显著差异（P<0.05），则采用Student-Newman-Keuls法进行多重比较分析，实验数据以平均值±标准差(mean±SD)的形式表示。37 ，）(%)，但是）>0.05。SRP）要显著高于存活率<0.05P<0.05WGRP±11.9375.67±5.1371.00±3.4676.6774.33±8.0872.33±4.0479.00±8.54。在每一个饲料蛋成氨基酸。对虾存adcacb）在饲料中添加包膜氨基<0.05组对虾，FCR纳滨对虾的生长性能。与P饲料系数）无显著性差异（（EAANEAAFCR和0.020.01±0.02±0.01g1.35±0.03c1.55±0.02d1.48±f1.37±d1.48e1.44770.5%（，且包被）显著高于其余各组（EAA，降低））(%)SGRWGR特定生长率<0.05903.0%<0.05P衡之间存在显著的交互作用（P（的鸡肉粉代替鱼粉的配合饲料对凡纳滨对虾生长性能的影响（0.020.02±0.030.01±4.120.02±±3.790.03d3.84±4.05±3.87e3.96组（gcfdWGR(%)SGRCAA，凡纳滨对虾能更有效地利用外源合WGR和）与对照组对虾增重率WGR38769.0%±7.1g±12.9c±3.6735.0d903.0±9.8759.0±9.4f865.9±14.2d774.2e818.5（(g)基于氨基酸平衡衡性以及外源氨基酸的添加方式均显著影响凡均分别显著高于FWWGR末均重SGR不同实验饲料对凡纳滨对虾生长性能的影响和蛋白质水平下，对照组对虾3.5表WGR对凡纳滨对虾生长的促进作用要优于同时添加(g)40%。饲料的蛋白质水平和饲料的氨基酸平组凡纳滨对虾）IWEAATab.3.5Growthperformanceofshrimpfeddifferentexperimentaldiets初均重。在）饲料蛋白质水平显著提高对虾EAA>0.05P40%<0.05P0.30±0.000.30±0.012.60±0.022.73±0.040.30±0.00））2.50±0.03组（0.30±0.002.99±0.040.31±0.010.30±0.002.63±0.032.91±0.03处理组））EEE+NEE+NEAATreatmentNEAA更能够明显地改善对虾生长性能，在低蛋白质水平下（鱼粉）（鸡肉粉）（晶（硬（晶（硬可知，饲料蛋白质水平、饲料氨基酸平包被3.5CAA生长性能饲料蛋白质水平下，包被结果由表饲料蛋白质水平相比，EAA+32%集美大学硕士学位论文3.23.2.132%白质水平下，包被氨基酸组凡纳滨对虾包被在说明鸡肉粉替代鱼粉的饲料中添加酸比添加活率在各组间无显著性差异（蛋白水平(g/kg)400D1D2D3D4D5D6 (%)SR存活率75.33±6.8075.67±8.0873.00±0.00±10.1576.67±6.5178.0077.67±4.04ceecedeFCR饲料系数0.020.01±0.02±0.041.51±0.011.62±0.031.60±1.49±1.621.58dabcdbc(%)SGR特定生长率3.87±0.01的鸡肉粉代替鱼粉的配合饲料对凡纳滨对虾生长性能的影响0.020.03±0.03±d3.86±0.043.670.033.76±±b3.733.79abcdc(%)WGR增重率721.2±12.3769.0±3.539±10.2770.5683.5±12.4±17.6707.0737.6±12.5dabcdbc0.05).(g)＜P基于氨基酸平衡FW末均重(g)。）IW0.05初均重＜P0.6110.762<0.001<0.001<0.001<0.001<0.001<0.001<0.001<0.0010.30±0.010.30±0.002.40±0.022.50±0.030.30±0.01））2.34±0.040.30±0.002.61±0.020.30±0.010.30±0.012.44±0.032.64±0.03）处理组）EE+NEE+NEEAATreatment（硬（晶（硬（鱼粉）（鸡肉粉）（晶-value)P3.5集美大学硕士学位论文续表蛋白水平(g/kg)320D7D8D9D10D11D12ANOVA(蛋白质水平Proteinlevel(P)氨基酸处理Aminoacidtreatment(A)P×A注：同列数字上标小写字母不同表示差异显著（Notes:Datainthesamecolumnwithdifferentlettersindicatesignificantdifference(<0.001<0.001<0.0010.0170.965 。）abbbbbbaaaaaba>0.05P灰分Ash，而降低粗脂3.22±0.023.25±0.023.18±0.023.17±0.03）<0.05P(%)0.020.020.03±0.02±±3.270.02±3.250.033.260.03±3.25±0.03±3.173.19±3.173.20aaabcabcbbbcbc粗脂肪Crudelipid0.040.040.04±0.03±0.07±0.960.06±1.040.04±1.020.04±1.190.03±1.010.03±1.220.02±1.150.04±1.12±1.13±1.251.161.27bccccccaabababaab粗蛋白Crudeprotein17.37±0.1117.64±0.3017.61±0.3717.86±0.1117.54±0.1717.52±0.1616.67±0.3716.72±0.4016.89±0.3116.83±0.3616.64±0.2616.85±0.16。）3.6cbcbcabbcababababaaba（表）基于氨基酸平衡的鸡肉粉代替鱼粉的配合饲料对凡纳滨对虾生长性能的影响40水分>0.05MoistureP不同实验饲料对凡纳滨对虾体成分的影响（湿重基础）76.92±0.3976.25±0.2577.73±0.2776.92±0.18））77.86±0.45））77.07±0.283.678.02±0.6577.75±0.3077.04±0.4676.86±0.3176.91±0.3576.51±0.21表））））饲料蛋白质水平显著提高凡纳滨对虾的虾体水分、粗蛋白质和灰分含量（EE+NEE+NE氨基酸处理组EEE+NEE+NEE40%Aminoacidtreatment（硬（晶（硬（鱼粉）（鸡肉粉）（晶（硬（晶（硬（鱼粉）（鸡肉粉）（晶D10D11D12。在每一个饲料蛋白质水平下，氨基酸添加与否或以何种形式添加对凡纳滨对虾虾体成分没有明显的影响（）饲料蛋白质水平相比，<0.05P体成分32%与集美大学硕士学位论文3.2.2肪含量（饲料的蛋白质水平和饲料氨基酸平衡性之间交互作用不显著（Tab.3.6Wholebodycompositionofshrimpfeddifferentexperimentaldiets(wetweightbasis)蛋白水平Dietaryproteinlevel40D1D2D3D4D5D632D7D8D9 灰分Ash－40min粗脂肪Crudelipid－20min粗蛋白Crudeprotein基于氨基酸平衡的鸡肉粉代替鱼粉的配合饲料对凡纳滨对虾生长性能的影响－41水分<0.001<0.001<0.001<0.00110minMoisture0.05).＜P晶体或包被氨基酸在水中的溶失率3.7表0.397<0.0010.4040.001。Tab.3.7Theleachinglossofcrystalandcoatedaminoacids）5min73.5%28.4%40.3%56.4%4.1%0.05氨基酸处理组＜PAminoacidtreatment-value)P包被氨基酸的溶失率3.60.5120.0770.848集美大学硕士学位论文续表蛋白水平DietaryproteinlevelANOVA(0.711蛋白质水平Proteinlevel(P)氨基酸处理Aminoacidtreatment(A)P×A注：同列数字上标小写字母不同表示差异显著（Notes:Datainthesamecolumnwithdifferentlettersindicatesignificantdifference(3.2.3氨基酸Aminoacids晶体氨基酸Crystallineaminoacids硬化油脂包膜Aminoacidscoatedwithhardenedlipid bcbbbabbc还是0.80±0.040.58±0.090.85±0.074.32±0.220.64±0.060.58±0.05EAAdcdccefcd1.23±0.120.98±0.081.27±0.045.29±0.081.38±0.040.73±0.10(mg/100mL)cbbbbcbc。无论是补充）0.84±0.110.60±0.040.78±0.034.52±0.240.72±0.020.61±0.06<0.05Pddcdcdecd。在每一个饲料蛋白质水平下，相比）。1.22±0.061.01±0.131.38±0.055.60±0.191.35±0.030.73±0.103.8）aaaaaa（表。<0.05）P0.56±0.070.31±0.040.55±0.043.36±0.120.53±0.040.39±0.05<0.05aaaaababP，且显著高于鱼粉组（）0.47±0.110.35±0.050.61±0.083.37±0.210.59±0.070.46±0.02<0.05P组均有所下降（bccdbbbccd基于氨基酸平衡的鸡肉粉代替鱼粉的配合饲料对凡纳滨对虾生长性能的影响42CAA0.81±0.140.79±0.100.78±0.064.46±0.230.73±0.080.71±0.06ddddfe1.26±0.061.01±0.061.47±0.115.81±0.071.50±0.091.65±0.09abcbbcd不同试验饲料对凡纳滨对虾血浆游离氨基酸含量的影响3.80.64±0.030.78±0.100.80±0.114.50±0.400.78±0.070.84±0.12后血浆游离氨基酸含量总体影响显著（表dcddcdefe30min1.39±0.030.94±0.131.44±0.065.41±0.121.44±0.081.70±0.12aabaaabab0.59±0.130.45±0.090.63±0.043.53±0.070.61±0.050.46±0.12组对虾在摄食后，血浆游离氨基酸含量显著上升（ababadbcCAAD1D2D3D4D5D6D7D8D9D10D11D12，包被氨基酸组对虾的血浆游离氨基酸浓度相对于0.62±0.040.31±0.120.82±0.053.56±0.171.06±0.060.63±0.05血浆游离氨基酸饲料处理对凡纳滨对虾摄食集美大学硕士学位论文3.2.4于鸡肉粉组，EAA+NEAAATab.3.8PlasmafreeaminoacidconcentrationsofshrimpfeddifferentexperimentaldietsA氨基酸AAE苏氨酸Thr缬氨酸Val蛋氨酸Met异亮氨酸Ile亮氨酸Leu苯丙氨酸Phe bcbcbbbcbb1.68±0.133.31±0.170.99±0.050.62±0.061.24±0.293.66±0.090.68±0.13ddccbbb2.45±0.085.72±0.551.77±0.071.65±0.090.94±0.093.75±0.120.62±0.15bcdbabcbb0.488.94±0.097.98±0.5265±0.183.43±0.153.65±0.091.72±0.144.51±0.270.91±0.120.19±0.071.08±0.193.46±0.250.61±0.05cdcabcbb2.34±0.035.35±0.051.87±0.100.26±0.011.21±0.273.55±0.050.75±0.16aaaabcbb1.38±0.042.38±0.090.71±0.120.21±0.081.32±0.063.57±0.340.71±0.16abcabaaaa57±0.273.53±0.253.79±0.183.49±0.498.50±0.798.94±0.608.02±1.38±0.123.21±0.120.85±0.090.22±0.040.39±0.072.59±0.230.28±0.04ccbbcbb基于氨基酸平衡的鸡肉粉代替鱼粉的配合饲料对凡纳滨对虾生长性能的影响431.80±0.033.69±0.580.97±0.090.65±0.111.58±0.243.64±0.270.68±0.15eecdbcbb2.71±0.296.11±0.451.90±0.091.77±0.071.49±0.143.85±0.100.76±0.08cdbabcbb1.85±0.074.40±0.303.73±0.143.98±0.113.96±0.233.0.93±0.040.35±0.071.42±0.203.53±0.529.27±1.549.17±0.818.48±0.837.0.57±0.12decabcbb2.35±0.065.91±0.381.89±0.030.32±0.041.29±0.353.62±0.340.63±0.10ababaacbb1.48±0.042.64±0.350.73±0.050.25±0.041.54±0.303.70±0.280.63±0.09abcbaaaaD1D2D3D4D5D6D7D8D9D10D11D121.49±0.123.56±0.233.78±0.113.89±0.263.80±0.250.96±0.040.29±0.060.56±0.032.75±0.187.88±0.128.59±1.118.80±0.620.34±0.073.8集美大学硕士学位论文续表氨基酸AA组氨酸His赖氨酸Lys精氨酸Arg色氨酸TrpNEAA天冬氨酸Asp丝氨酸Ser谷氨酸Glu脯氨酸Pro甘氨酸Gly cccbbc11.65±0.093.56±0.250.87±0.111.64±0.0749.31±0.93bcbdf10.93±0.773.72±0.160.95±0.082.31±0.0958.07±0.47bcaabc。）3.910.81±0.833.45±0.470.45±0.091.69±0.0848.43±0.52bcaabe（表）11.17±0.643.34±0.510.40±0.041.48±0.1055.73±1.17>0.05Pcbcabb11.55±1.053.04±0.120.44±0.101.46±0.1244.50±2.09aaaaabc9.16±0.182.40±0.240.43±0.051.62±0.0439.43±0.84dcacd基于氨基酸平衡的鸡肉粉代替鱼粉的配合饲料对凡纳滨对虾生长性能的影响4413.37±0.473.59±0.160.62±0.071.81±0.0553.13±2.15dccdg0.05).＜P12.48±0.463.55±0.231.15±0.122.47±0.0964.11±1.27dcaad。）12.64±0.393.60±0.330.42±0.071.37±0.1252.43±0.820.05dcaaf＜P12.63±0.273.56±0.350.44±0.0658.95±1.15d1.38±0.18ccaab13.16±0.263.63±0.310.44±0.131.45±0.0948.41±1.18aabacbD1D2D3D4D5D6D7D8D9D10D11D129.55±0.432.65±0.240.50±0.071.76±0.0843.14±0.97肌肉氨基酸3.8各饲料组间（除谷氨酸、脯氨酸、甘氨酸外）肌肉氨基酸和总氨基酸均无显著性差异（集美大学硕士学位论文续表氨基酸AA丙氨酸Ala胱氨酸Cys酪氨酸Tyr牛磺酸Tau总游离氨基酸注：同行数字上标小写字母不同表示差异显著（Notes:Datainthesamerowwithdifferentlettersindicatesignificantdifference(3.2.5 (mg/100g)35±0.212.42±0.132.38±0.0836±0.173.79±0.393.81±0.3776±0.081.80±0.092.02±0.1589±0.162.84±0.202.92±0.1107±0.275.02±0.255.13±0.2475±0.072.96±0.312.77±0.1633±0.051.33±0.111.27±0.0853±0.165.59±0.305.65±0.040.082.36±0.052.31±0.132.0.053.74±0.363.70±0.483.0.141.77±0.121.81±0.161.0.103.07±0.183.16±0.112.0.175.02±0.325.46±0.145.0.112.86±0.112.86±0.132.0.141.32±0.051.29±0.061.0.255.61±0.225.98±0.285.基于氨基酸平衡的鸡肉粉代替鱼粉的配合饲料对凡纳滨对虾生长性能的影响45不同实验饲料对凡纳滨对虾肌肉氨基酸含量的影响3.937±0.162.41±0.072.48±0.182.31±95±0.393.84±0.383.94±0.403.50±73±0.101.74±0.091.77±0.091.69±07±0.173.02±0.243.03±0.103.05±47±0.265.24±0.235.29±0.205.47±91±0.253.05±0.163.01±0.142.81±30±0.061.35±0.101.32±0.141.38±80±0.196.00±0.245.89±0.195.97±表D1D2D3D4D5D6D7D8D9D10D11D122.45±0.152.41±0.092.43±0.122.3.78±0.263.66±0.234.06±0.153.1.61±0.211.77±0.271.80±0.121.3.06±0.183.07±0.083.09±0.203.5.36±0.205.07±0.175.54±0.205.2.97±0.102.82±0.063.01±0.092.1.26±0.071.27±0.151.24±0.021.5.54±0.165.70±0.165.58±0.105.集美大学硕士学位论文Tab.3.9Muscleaminoacidcontentsofshrimpfeddifferentexperimentaldiets氨基酸AAEAA苏氨酸Thr缬氨酸Val蛋氨酸Met异亮氨酸Ile亮氨酸Leu苯丙氨酸Phe组氨酸His赖氨酸Lys aaba11.81±0.573.04±0.525.67±0.12baab12.47±0.023.14±0.265.74±0.16baab46±0.285.54±0.185.54±0.0450±0.100.46±0.060.53±0.0922±0.336.54±0.106.62±0.1349±0.142.57±0.122.46±0.1270±0.114.87±0.165.16±0.2747±0.100.41±0.060.37±0.0712.59±0.132.97±0.255.71±0.10baab12.67±0.163.20±0.045.68±0.05baab12.75±0.143.12±0.105.65±0.08aab65±0.095.66±0.115.54±0.165.43±0.050.43±0.020.47±0.050.82±0.186.79±0.046.59±0.157.52±0.232.43±0.142.40±0.112.02±0.274.80±0.275.02±0.234.35±0.050.49±0.100.45±0.060.11.70±0.162.71±0.146.16±0.10bba基于氨基酸平衡的鸡肉粉代替鱼粉的配合饲料对凡纳滨对虾生长性能的影响4612.71±0.333.40±0.285.69±0.03aaa11.66±0.272.63±0.11ababa5.68±0.1738±0.355.81±0.385.28±0.375.43±0.100.46±0.080.42±0.040.67±0.146.55±0.176.92±0.176.45±0.182.44±0.202.43±0.132.17±0.204.92±0.225.19±0.265.47±0.060.53±0.050.44±0.050.12.19±0.403.16±0.085.52±0.14baa12.77±0.22abb2.68±0.21a5.64±0.193.46±0.285.51±0.2412.31±0.37aabD1D2D3D4D5D6D7D8D9D10D11D125.77±0.186.10±0.555.67±0.265.0.50±0.040.51±0.050.40±0.050.6.55±0.096.62±0.166.65±0.116.2.42±0.042.48±0.112.25±0.232.11.85±0.052.59±0.126.16±0.274.86±0.144.99±0.115.27±0.115.0.46±0.090.39±0.060.36±0.040.3.9Asp集美大学硕士学位论文续表氨基酸AA精氨酸Arg色氨酸TrpNEAA天冬氨酸丝氨酸Ser谷氨酸Glu脯氨酸Pro甘氨酸Gly丙氨酸Ala胱氨酸Cys 0.042.29±0.172.15±0.100.050.39±0.030.37±0.070.4470.16±0.5469.68±0.812.27±0.202.17±0.012.20±0.37±0.040.38±0.030.40±8470.50±0.8071.13±0.5469.41±基于氨基酸平衡的鸡肉粉代替鱼粉的配合饲料对凡纳滨对虾生长性能的影响47.0.05)＜P2.37±0.142.25±0.072.25±0.090.38±0.030.42±0.020.38±0.038470.07±1.5771.79±0.2670.17±0.。）0.05＜P2.40±0.152.30±0.152.23±0.070.36±0.030.35±0.030.33±0.0970.80±0.5171.10±1.0870.60±0.D1D2D3D4D5D6D7D8D9D10D11D122.41±0.130.43±0.0370.03±0.303.9集美大学硕士学位论文续表氨基酸AA酪氨酸Tyr牛磺酸Tau总氨基酸注：同行数字上标小写字母不同表示差异显著（Notes:Datainthesamerowwithdifferentlettersindicatesignificantdifference( 集美大学硕士学位论文基于氨基酸平衡的鸡肉粉代替鱼粉的配合饲料对凡纳滨对虾生长性能的影响3.3讨论3.3.1生长性能本试验表明，饲料蛋白质水平、饲料氨基酸平衡性、外源氨基酸的添加方式都明显影响凡纳滨对虾的生长和饲料利用率。且高的饲料蛋白质水平明显促进凡纳滨对虾的生长和[90][27]饲料利用，这与Ye等，李广丽等的研究相一致，说明处于快速生长阶段的凡纳滨对[113]虾虾需要高的饲料蛋白质水平来满足其生长需要。Yamamoto等的研究表明，饲喂35%蛋白质水平饲料组（低蛋能比饲料）虹鳟的饲料蛋白质利用率要明显高于饲喂45%蛋白质水平饲料组（高蛋能比饲料）。本试验结果显示，在40%饲料蛋白质水平下，各试验组凡纳滨对虾的生长均明显低于对照组水平，而在32%饲料蛋白质水平下，鸡肉粉+包膜EAA组凡纳滨对虾的生长到达了与鱼粉组水平，这可能是因为低蛋白质水平饲料中的氨基酸水平，特别是EAA水平，并未满足凡纳滨对虾的生长需求（表3.4），因此相比于高的饲料蛋白质水平，在低的饲料蛋白质水平下，凡纳滨对虾对饲料中所补充的外源氨基酸存在更高的利用率，从而使低蛋白质水平下的鸡肉粉+包膜EAA组对虾的生长达到了鱼粉组水平。[114,115]饲料氨基酸平衡不仅仅是指饲料中EAA的数量与比例上满足动物体生长的需要，饲[35,36,116,117][116]料中NEAA的质与量也会影响动物体的生长。Mambrini等研究表明，罗非鱼[36]饲料中NEAA占总氨基酸的比例不宜超过60%。Green等报道，当饲料EAA/NEAA为57/43时，虹鳟获得最大氮沉积与最小氮排泄。本试验表明，在每一蛋白质水平下，凡纳滨对虾的生长和饲料效率均与饲料EAA/NEAA呈相同趋势，即鱼粉组（50/50）>鸡肉粉+包被EAA组（49/51）>鸡肉粉+包被EAA+包被NEAA组（48/52）>鸡肉粉组（46/54），这说明可以通过平衡饲料中氨基酸组成的方式来提高凡纳滨对虾的饲料蛋白质的利用率，进而提高饲料效率，从而可以实现在不影响对虾生长的情况下适当降低对虾饲料蛋白质含[39,113]量（详见第二章讨论）。研究人员通常使用外源合成氨基酸来平衡饲料中的氨基酸组[57][57]成，然而不同外源氨基酸的添加方式也会影响外源合成氨基酸的利用效果。Alam等使用CAA替代饲料中所有的酪蛋白后，日本囊对虾的生长明显下降，然而使用酪蛋白-明[59]胶包被的氨基酸替代饲料中所有的酪蛋白后，对虾的生长达到了对照组水平。刘永坚等研究表明，在草鱼饲料中添加包膜赖氨酸对其生长的促进作用要优于添加晶体赖氨酸。本试验结果也表明，在鸡肉粉替代鱼粉的饲料中添加硬化油脂包被的氨基酸对凡纳滨对虾生长的促进作用明显好于直接添加CAA，且晶体EAA组与晶体EAA+NEAA组凡纳滨对虾生长没有明显差异，而包被EAA组凡纳滨对虾的生长却又好于包被EAA+NEAA组，这可能是因为在鸡肉粉饲料中添加包被氨基酸后，突显了饲料EAA与NEAA比例（即饲料氨基酸平衡）对凡纳滨对虾生长的影响。上述研究表明，将CAA通过包被处理后，能够有效提高水产动物对外源合成氨基酸的利用效率。当前对于水产动物利用CAA效果不如包被氨基酸的原因主要有：1.CAA在水中溶失率高；2.CAA与完整蛋白质氨基酸吸收不同48 集美大学硕士学位论文基于氨基酸平衡的鸡肉粉代替鱼粉的配合饲料对凡纳滨对虾生长性能的影响步；3.由于CAA在水产动物体内吸收过快，超出了水产动物体内游离氨基酸库对饲料来源氨基酸的容纳量或水产动物体内游离氨基酸库对某些氨基酸在短时间内大量吸收的缓冲能力有限，因此先被吸收的氨基酸可能被水产动物用于能量消耗或是通过转氨基作用分[118-120][121,122]解排泄掉了，这也解释了为什么畜禽能够很好的利用饲料中的CAA，而水产动物对饲料中CAA利用效果不理想的原因，即动物体对体内氨基酸的短期存储和利用能[108]力不同。而将CAA包被后，即可以降低CAA的溶失，又可以延缓CAA的吸收，因此更有利于水产动物的生长。3.3.2体成分本试验结果显示，饲料蛋白质水平明显影响虾体成分，高饲料蛋白质水平促进凡纳滨对虾虾体蛋白质和灰分沉积，降低虾体脂肪沉积。凡纳滨对虾的体成分与饲料氨基酸的平[123]衡性无关（详见第二章讨论）。González等研究表明，随着饲料中脂肪含量增加，凡纳滨对虾肝胰腺与肌肉脂肪含量明显上升。本试验表明，在每一个饲料蛋白质水平下，鸡肉粉+包被氨基酸组凡纳滨对虾的体脂肪沉积要明显高于其他各组，这是因为本试验选用脂类作为CAA的包被壁材，增加了包被氨基酸组饲料中的脂肪含量，进而提高了对虾的体脂肪沉积。3.3.3血浆游离氨基酸及肌肉氨基酸动物体内游离氨基酸水平能够在一定程度上反映不同饲料蛋白质的利用程度[59,63,104,125][104]。Segovia-Quintero等研究表明，使用软脂酸甘油酯聚乙烯醇包被蛋氨酸，能[125]够有效延缓罗非鱼肠道对游离蛋氨酸的吸收。Schuhmacher等报道，虹鳟在饲喂小麦蛋白饲料18h后血浆游离氨基酸浓度达到峰值，而在饲喂氨基酸饲料后9h其血浆游离氨基[63]酸浓度就达到峰值；冷向军等报道，相对CAA而言，饲料中补充环糊精或淀粉包膜氨基酸使异育银鲫血清游离氨基酸峰值有所延迟，且补充环糊精或淀粉包膜氨基酸组异育银鲫的生长要明显好于补充CAA组。以上研究表明，水产动物对CAA的吸收速度要快于完整蛋白质氨基酸，通过包被CAA可有效延缓CAA在水产动物肠道内的吸收速度，降低血液中游离氨基酸的浓度，提高外源合成氨基酸与完整蛋白质氨基酸吸收的同步性，从而提高饲料蛋白质的利用率，进而有效促进水产动物的生长。本试验结果也表明，在饲喂30min后，补充包被氨基酸组凡纳滨对虾的血浆游离氨基酸浓度要明显低于补充CAA组，且在32%蛋白质水平下，鸡肉粉+包被EAA组凡纳滨对虾的生长与鱼粉组水平一致。这说明使用硬化油脂包被CAA能够有效降低CAA在凡纳滨对虾肠道内的吸收速率，提高与完整蛋白质氨基酸吸收的同步性，促进对虾生长。各处理组凡纳滨对虾肌肉氨基酸含量（除谷氨[124]酸、甘氨酸、脯氨酸外），均无明显差异，这与牛化欣的研究结果类似，说明饲料氨基酸平衡与否对对虾肌肉氨基酸含量影响不大。49 集美大学硕士学位论文基于氨基酸平衡的鸡肉粉代替鱼粉的配合饲料对凡纳滨对虾生长性能的影响3.4小结（1）在鸡肉粉完全替代鱼粉的饲料中添加硬化油脂包被氨基酸对凡纳滨对虾生长的促进作用要明显好于添加CAA，且在32%饲料蛋白质水平下，添加包被EAA组对虾的生长达到鱼粉组水平。（2）相对于CAA而言，在鸡肉粉完全替代鱼粉的饲料中添加硬化油脂包被氨基酸能够有效延缓外源合成氨基酸的吸收速率，降低血浆游离氨基酸浓度，提高与完整蛋白氨基酸吸收的同步性，降低外源合成氨基酸的溶失率。50 集美大学硕士学位论文基于氨基酸平衡的鸡肉粉代替鱼粉的配合饲料对凡纳滨对虾生长性能的影响第4章全文总结（1）在鸡肉粉完全替代鱼粉的饲料中添加外源合成EAA或EAA+NEAA能够明显促进凡纳滨对虾的生长，添加硬化油脂包被氨基酸对凡纳滨对虾生长的促进作用要明显好于添加CAA，在低蛋白质水平（32%）鸡肉粉组饲料中添加硬化油脂包被EAA，能使凡纳滨对虾的生长达到鱼粉组水平，在添加了EAA的鸡肉粉组饲料中进一步补充NEAA没有改善凡纳滨对虾的生长。（2）相对于CAA而言，在鸡肉粉完全替代鱼粉的饲料中添加硬化油脂包被氨基酸能够有效延缓外源合成氨基酸的吸收速率，降低血浆游离氨基酸浓度，提高与完整蛋白氨基酸吸收的同步性，降低外源合成氨基酸的溶失率，从而提高凡纳滨对虾的生长。（3）饲喂高蛋白质水平（40%）的饲料比饲喂低蛋白质水平（32%）的饲料更能促进凡纳滨对虾的生长，且高饲料蛋白质水平增加凡纳滨对虾的体蛋白质沉积，减少体脂肪沉积。51 集美大学硕士学位论文基于氨基酸平衡的鸡肉粉代替鱼粉的配合饲料对凡纳滨对虾生长性能的影响致谢本论文是在导师叶继丹研究员的悉心指导下完成的，从论文的选题、实验方案设计与实施到文章及论文的撰写都凝聚着导师的心血。三年来，叶老师严谨的治学态度，以及雷厉风行的办事效率深深地影响着我，无论从生活、做事、学习还是科研，只要有机会，导师都希望我们从中得到历练，使我们自身变得更加成熟，迎接未来的挑战。这三年的学习与历练将是我这一生最宝贵的财富，我也将会以最好的精神面貌来面对未来的挑战。在此，谨向我的恩师叶继丹研究员致以最诚挚的敬意，衷心的祝愿叶老师身体健康，工作顺利！感谢师母王琨老师对我生活上、学习上无微不至的关心，王琨老师处处为学生着想，有了王老师的帮助，使我的研究生生活变得更加美好。感谢孙云章老师、张春晓老师、翟少伟老师以及宋凯老师对我学习、生活以及科研上的帮助，有了他们的帮助我的实验才得以更加顺利。还要感谢师兄杨伟，正是杨伟师兄的帮助，我才能有幸成为叶老师的学生，感谢师兄王和伟、于海振对我使用氨基酸分析仪的指导，师兄陈建春、李建、师姐陈孟瑶、翟秋玲、于苗苗对我生活，试验设计以及饲料制作及养殖过程的帮助和建议，感谢周铭文、黄飞、胡田恩、史庆超、李洁、闫洋洋、宋俊英以及师弟师妹陈庭、李家旭、王学习、黄岩、吉中力、冯伟、孙秀文、骆源、李剑、赵芸、胡水城等人对我生活以及实验过程中的帮助。感谢谢佳对我生活上无微不至的关心，感谢舍友李佳凯、尹诚、曹款、孙宏对我生活上的帮助、包容与理解。最后我要感谢家人多年来对我学业的鼓励与支持，正是你们对我的支持才使我能够在困难中不断前行，无所畏惧！感谢一路上所有陪伴我的亲朋好友，谢谢你们！52 集美大学硕士学位论文基于氨基酸平衡的鸡肉粉代替鱼粉的配合饲料对凡纳滨对虾生长性能的影响参考文献[1]CuzonG,LawrenceA,GaxiolaG,etal.NutritionofLitopenaeusVannameiRearedinTanksorinPonds[J].Aquaculture,2004,235(1):513-551.[2]NRC.NutritionRequirementsofFish[S].Washington:NationalAcademyPress,1993:114.[3]HardyR,KissilG.TrendsinAquacultureFeeding:WecanNowObtainaKgofSalmonWeightGainforEachKgofFeed[J].FeedMix,1997,5(1):31-37.[4]Cruz-SuárezLE,Nieto-LópezM,Guajardo-BarbosaC,etal.ReplacementofFishMealwithPoultryby-ProductMealinPracticalDietsforLitopenaeusVannamei,andDigestibilityoftheTestedIngredientsandDiets[J].Aquaculture,2007,272(1):466-476.[5]ChiS,TanB,MaiK,etal.GrowthandFeedEfficiencyofJuvenileShrimpLitopenaeusVannameiFedFormulatedDietsContainingDifferentLevelsofPoultryby-ProductMeal[J].JournalofOceanUniversityofChina,2009,8(4):399-403.[6]ZhuW,MaiK,ZhangB,etal.AStudyontheMeatandBoneMealandPoultryby-ProductMealasProteinSubstitutesofFishMealinPracticalDietsforLitopenaeusVannameiJuveniles[J].JournalofOceanUniversityofChina,2004,3(2):157-160.[7]SamochaTM,DavisDA,SaoudIP,etal.SubstitutionofFishMealbyco-ExtrudedSoybeanPoultryby-ProductMealinPracticalDietsforthePacificWhiteShrimp,LitopenaeusVannamei[J].Aquaculture,2004,231(1):197-203.[8]DavisDA,ArnoldCR.ReplacementofFishMealinPracticalDietsforthePacificWhiteShrimp,LitopenaeusVannamei[J].Aquaculture,2000,185(3):291-298.[9]ChengZJ,BehnkeKC,DominyWG.EffectsofPoultryby-ProductMealasaSubstituteforFishMealinDietsonGrowthandBodyCompositionofJuvenilePacificWhiteShrimp,LitopenaeusVannamei[J].JournalofAppliedAquaculture,2002,12(1):71-83.[10]SaoudIP,RodgersLJ,DavisDA,etal.ReplacementofFishMealwithPoultryby-ProductMealinPracticalDietsforRedclawCrayfish(CheraxQuadricarinatus)[J].AquacultureNutrition,2008,14(2):139-142.[11]董纯.蛋白源适口性对大菱鲆幼鱼生长、体组成和表观消化率的影响[D].青岛:中国海洋大学,2014.[12]YeJD,LiuXH,KongJH,etal.TheEvaluationofPracticalDietsonaBasisofDigestibleCrudeProtein,LysineandMethionineforLitopenaeusVannamei[J].AquacultureNutrition,2012,18(6):651-661.[13]AlamMS,TeshimaS,KoshioS,etal.SupplementalEffectsofCoatedMethionineand/orLysinetoSoyProteinIsolateDietforJuvenileKurumaShrimp,MarsupenaeusJaponicus[J].Aquaculture,2005,248(1):13-19.[14]El-SaidyDMSD,GaberM.CompleteReplacementofFishMealbySoybeanMealwithDietaryL-LysineSupplementationforNileTilapiaOreochromisNiloticus(L.)Fingerlings[J].JournaloftheWorldAquacultureSociety,2002,33(3):297-306.[15]HuM,WangY,WangQ,etal.ReplacementofFishMealbyRenderedAnimalProteinIngredientswithLysineandMethionineSupplementationtoPracticalDietsforGibelCarp,CarassiusAuratusGibelio[J].53 集美大学硕士学位论文基于氨基酸平衡的鸡肉粉代替鱼粉的配合饲料对凡纳滨对虾生长性能的影响Aquaculture,2008,275(1):260-265.[16]王兴强,马甡,董双林.凡纳滨对虾生物学及养殖生态学研究进展[J].海洋湖沼通报,2005(4):94-100.[17]张伟权.世界重要养殖品种——南美白对虾生物学简介[J].海洋科学,1990,3(3):69-73.[18]刘襄河.凡纳滨对虾对蛋白质饲料原料消化率的研究及饲料配方实践[D].厦门:集美大学,2011.[19]ColvinLB,BrandCW.TheProteinRequirementofPenaeidShrimpatVariousLifeCycleStagesinControlledEnvironmentalSystems[J].ProceedingsWorldMaricultureSociety,1977,8:821-840.[20]KureshyN,DavisDY.ProteinRequirementforMaintenanceandMaximumWeightGainforthePacificWhiteShrimp,LitopenaeusVannamei[J].Aquaculture,2002,204(1):125-143.[21]SmithLL,LawrenceA,StrawnK.GrowthandDigestibilitybyThreeSizesofPenaeusVannameiBoone:EffectsofDietaryProteinLevelandProteinSource[J].Aquaculture,1985,46(1):85-96.[22]VelascoM,LawrenceAL,NeillWH.DevelopmentofAStatic-WaterEcoassaywithMicrocosmTanksforPostlarvalPenaeusVannamei[J].Aquaculture,1998,161(1):79-97.[23]VelascoM,LawrenceAL,CastilleFL,etal.DietaryProteinRequirementforLitopenaeusVannamei.In:Cruz-SuárezLE,Ricque-MarieD.,Tapia-SalazarM.,Olvera-NovoaM.A.yCivera-CerecedoR.,(Eds.)[C]//AvancesenNutriciónAcuícolaVMemoriasdelV.SimposiumInternacionalde.NutriciónAcuícola,2000:19-22.[24]SamochaTM,LawrenceAL,BrayWA.DesignandOperationofanIntensiveNurseryRacewaySystemforPenaeidShrimp[J].CRCHandbookofMariculture:CrustaceanAquaculture,1993,1(1):173.[25]AndrewsJW,SickLV,BaptistGJ.TheInfluenceofDietaryProteinandEnergyLevelsonGrowthandSurvivalofPenaeidShrimp[J].Aquaculture,1972,1(1):341-347.[26]VillalonJR.PracticalManualforSemi-IntensiveCommercialProductionofMarineShrimp[J].TexasA&MUniversity.1991,12(1):91-501.[27]李广丽,朱春华,周歧存.不同蛋白质水平的饲料对凡纳滨对虾生长的影响[J].海洋科学,2001,25(4):1-4.[28]ShiauSY,KwokCC,ChouBS.OptimalDietaryProteinLevelofPenaeusMonodonRearedinSeawaterandBrackishwater[J].NipponSuisanGakkaishi,1991,57(1):711-716.[29]RobertsonL,LawrenceAL,CastilleF.EffectofFeedingFrequencyandFeedingTimeonGrowthofPenaeusVannamei(Boone)[J].AquacultureResearch,1993,24(1):1-6.[30]AwaparaJ.FreeAminoAcidsinInvertebrates:AComparativeStudyofTheirDistributionandMetabolism[J].AminoAcidPools,1962,23(1):158-175.[31]McveyJP,FoxJM.HatcheryTechniquesforPenaeidShrimpUtilizedbyTexasA&M-NmfsGalvestonLaboratoryProgram[J].CRCHandbookofMariculture,1983,1(1):129-154.[32]MillamenaO,Bautista-TeruelM,ReyesO,etal.RequirementsofJuvenileMarineShrimp,PenaeusMonodon(Fabricius)forLysineandArginine[J].Aquaculture,1998,164(1-4):95-104.[33]BergeGE,Bakke-McKellepAM,LiedE.InVitroUptakeandInteractionbetweenArginineandLysineintheIntestineofAtlanticSalmon(SalmoSalar)[J].Aquaculture,1999,179(1):181-193.[34]BergeGE,GoodmanM,EspeM,etal.IntestinalAbsorptionofAminoAcidsinFish:KineticsandInteractionoftheinVitroUptakeofL-MethionineinAtlanticSalmon(SalmoSalarL.)[J].Aquaculture,54 集美大学硕士学位论文基于氨基酸平衡的鸡肉粉代替鱼粉的配合饲料对凡纳滨对虾生长性能的影响2004,229(1):265-273.[35]PeresH,Oliva-TelesA.EffectoftheDietaryEssentialtonon-EssentialAminoAcidRatioonGrowth,FeedUtilizationandNitrogenMetabolismofEuropeanSeaBass(DicentrarchusLabrax)[J].Aquaculture,2006,256(1):395-402.[36]GreenJA,HardyRW,BrannonEL.TheOptimumDietaryEssential:NonessentialAminoAcidRatioforRainbowTrout(OncorhynchusMykiss),whichMaximizesNitrogenRetentionandMinimizesNitrogenExcretion[J].FishPhysiologyandBiochemistry,2002,27(1-2):109-115.[37]AlamMS,TeshimaS,KoshioS,etal.EffectsofSupplementationofCoatedCrystallineAminoAcidsonGrowthPerformanceandBodyCompositionofJuvenileKurumaShrimpMarsupenaeusJaponicus[J].AquacultureNutrition,2004,10(5):309-316.[38]YamamotoT,ShimaT,FuruitaH,etal.Self-SelectionofDietswithDifferentAminoAcidProfilesbyRainbowTrout(Oncorhynchusmykiss)[J].Aquaculture,2000,187(3):375-386.[39]GaylordTG,BarrowsFT.MultipleAminoAcidSupplementationstoReduceDietaryProteininPlant-BasedRainbowTrout,OncorhynchusMykiss,Feeds[J].Aquaculture,2009,287(1):180-184.[40]FoxJM,LawrenceAL,Li-ChanE.DietaryRequirementforLysinebyJuvenilePenaeusVannameiUsingIntactandFreeAminoAcidSources[J].Aquaculture,1995,131(1):279-290.[41]XieF,ZengW,ZhouQ,etal.DietaryLysineRequirementofJuvenilePacificWhiteShrimp,LitopenaeusVannamei[J].Aquaculture,2012,358:116-121.[42]ChengZJ,HardyRW,UsryJL.EffectsofLysineSupplementationinPlantProtein-BasedDietsonthePerformanceofRainbowTrout(OncorhynchusMykiss)andApparentDigestibilityCoefficientsofNutrients[J].Aquaculture,2003,215(1):255-265.[43]YamamotoT,SugitaT,FuruitaH.EssentialAminoAcidSupplementationtoFishMeal-BasedDietswithLowProteintoEnergyRatiosImprovestheProteinUtilizationinJuvenileRainbowTroutOncorhynchusMykiss[J].Aquaculture,2005,246(1):379-391.[44]PeresH,Oliva-TelesA.TheEffectofDietaryProteinReplacementbyCrystallineAminoAcidonGrowthandNitrogenUtilizationofTurbotScophthalmusMaximusJuveniles[J].Aquaculture,2005,250(3):755-764.[45]WilliamsK,BarlowC,RodgersL.EfficacyofCrystallineandProtein-BoundAminoAcidsforAminoAcidEnrichmentofDietsforBarramundi/AsianSeabass(LatesCalcariferBloch)[J].AquacultureResearch,2001,32(1):415-429.[46]RodehutscordM,BorchertF,GregusZ,etal.AvailabilityandUtilisationofFreeLysineinRainbowTrout(OncorhynchusMykiss):1.EffectofDietaryCrudeProteinLevel[J].Aquaculture,2000,187(1):163-176.[47]张满隆,邓理.蛋氨酸在鲫鱼饲料中的作用[J].饲料研究,2001(5):26-27.[48]张满隆,冯丽芝.鲤鱼饲料中添加蛋氨酸的应用试验[J].河北渔业,2002(2):32-33.[49]LiMH,RobinsonEH.EffectsofSupplementalLysineandMethionineinLowProteinDietsonWeightGainandBodyCompositionofYoungChannelCatfishIctalurusPunctatus[J].Aquaculture,1998,163(1):295-305.[50]LallSP,KaushikSJ,LeBailPY,etal.QuantitativeArginineRequirementofAtlanticSalmon(SalmoSalar)RearedinSeaWater[J].Aquaculture,1994,124(1):13-25.55 集美大学硕士学位论文基于氨基酸平衡的鸡肉粉代替鱼粉的配合饲料对凡纳滨对虾生长性能的影响[51]MillamenaOM,BautistaMN,ReyesOS,etal.ThreonineRequirementofJuvenileMarineShrimpPenaeusMonodon[J].Aquaculture,1997,151(1):9-14.[52]El-dahharAA,El-shazlyK.EffectofEssentialAminoAcids(MethionineandLysine)andTreatedOilinFishDietonGrowthPerformanceandFeedUtilizationofNileTilipia,TilapiaNilotica(L.)[J].AquacultureandFisheriesManagement,1993,24(1):731-739.[53]ViolaS,AngeoniH,LahavE.PresentLimitsofProteinSparingbyAminoAcidSupplementationofPracticalCarpandTilapiaFeeds[J].IsraeliJournalofAquaculture-Bamidgeh,1994,46(1):203-211.[54]TulliF,VachotC,TibaldiE,FournierV,etal.ContributionofDietaryArgininetoNitrogenUtilizationandExcretioninJuvenileSeaBass(DicentrarchusLabrax)FedDietsDifferinginProteinSource[J].ComparativeBiochemistryandPhysiology,2007,147(1):179-188.[55]WebbKA,GatlinDM.EffectsofDietaryProteinLevelandFormonProductionCharacteristicsandAmmoniaExcretionofRedDrumSciaenopsOcellatus[J].Aquaculture,2003,225(1):17-26.[56]GallagherML.TheUseofSoybeanMealasaReplacementforFishMealinDietsforHybridStripedBass(Moronesaxatilis×M.Chrysops)[J].Aquaculture,1994,126(1):119-127.[57]AlamMS,TeshimaS,KoshioS,etal.EffectsofSupplementationofCoatedCrystallineAminoAcidsonGrowthPerformanceandBodyCompositionofJuvenileKurumaShrimpMarsupenaeusJaponicus[J].AquacultureNutrition,2004,10(5):309-316.[58]朱选,曹俊明,许丰孟,等.饲料中添加赖氨酸及蛋氨酸对罗非鱼生长的影响[J].食品与生物技术学报,2009,28(4):466-473.[59]刘永坚,朱选.实用饲料补充结晶或包膜赖氨酸对草鱼生长、血清游离氨基酸和肌肉蛋白质合成率的影响[J].水产学报,2002,26(3):252-258.[60]陈丙爱,冷向军,李小勤,等.晶体或包膜氨基酸对鲤鱼的作用效果研究[J].水生生物学报,2008,32(5):774-778.[61]迟淑艳.低鱼粉饲料中添加微胶囊蛋氨酸或晶体蛋氨酸对军曹鱼和凡纳滨对虾生长性能的影响[D].青岛:中国海洋大学,2009.[62]ZarateDD,LovellRT,PayneDM.EffectsofFeedingFrequencyandRateofStomachEvacuationonUtilizationofDietaryFreeandProtein-BoundLysineforGrowthbyChannelCatfishIctalurusPunctatus[J].AquacultureNutrition,1999,5(1):17-22.[63]冷向军,王冠,李小勤,等.饲料中添加晶体或包膜氨基酸对异育银鲫生长和血浆游离氨基酸水平的影响[J].水产学报,2007,31(6):743-748.[64]ZhouZ,CuiY,XieS,etal.EffectofFeedingFrequencyonGrowth,FeedUtilization,andSizeVariationofJuvenileGibelCarp(CarassiusAuratusGibelio)[J].JournalofAppliedIchthyology,2003,19(4):244-249.[65]FriedmanM,GumbmannMR.TheUtilizationandSafetyofIsomericSulfur-ContainingAminoAcidsinMice[J].TheJournalofNutrition,1984,114(12):2301-2310.[66]SveierH,NordasH,BergeGE,etal.DietaryInclusionofCrystallineD-andL-Methionine:EffectsonGrowth,FeedandProteinUtilization,andDigestibilityinSmallandLargeAtlanticSalmon(SalmonSalarL.)[J].AquacultureNutrition,2001,7(3):169-181.[67]肖伟伟,冯琳,刘扬,等.日粮中等硫添加DL-蛋氨酸和蛋氨酸羟基类似物游离酸在幼建鲤上饲喂效果的比较研究[J].动物营养学报,2010(4):1122-1130.56 集美大学硕士学位论文基于氨基酸平衡的鸡肉粉代替鱼粉的配合饲料对凡纳滨对虾生长性能的影响[68]梁治齐.微胶囊技术及其应用[M].中国轻工业出版社,1999.[69]王冠,冷向军,李小勤,等.饲料中添加包膜氨基酸对异育银鲫生长和体成分的影响[J].上海水产大学学报,2006,15(3):365-369.[70]ShiptonTA,BritzPJ,WalkerRB.AnAssessmentoftheEfficacyofTwoLysineMicroencapsulationTechniquestoDeterminetheQuantitativeLysineRequirementoftheSouthAfricanAbalone,HaliotisMidaeL[J].AquacultureNutrition,2002,8(3):221-227.[71]邓君明,麦康森,艾庆辉,等.不同氨基酸包被方法对牙鲆生长及血浆生化指标的影响[J].动物营养学报,2007,19(6):706-713.[72]ChenHY,LeuYT,RoelantsI.EffectiveSupplementationofArginineintheDietsofJuvenileMarineShrimp,PenaeusMonodon[J].Aquaculture,1992,108(1):87-95.[73]PeresH,Oliva-TelesA.EffectoftheDietaryEssentialAminoAcidPatternonGrowth,FeedUtilizationandNitrogenMetabolismofEuropeanSeaBass(DicentrarchusLabrax)[J].Aquaculture,2007,267(1):119-128.[74]PeresH,Oliva-TelesA.TheOptimumDietaryEssentialAminoAcidProfileforGiltheadSeabream(SparusAurata)Juveniles[J].Aquaculture,2009,296(1):81-86.[75]ÖnalU,LangdonC.CharacterizationofTwoMicroparticleTypesforDeliveryofFoodtoAltricialFishLarvae[J].AquacultureNutrition,2000,6(3):159-170.[76]ChiuA,LiL,GuoS,etal.FeedandFishmealUseintheProductionofCarpandTilapiainChina[J].Aquaculture,2013,414(1):127-134.[77]HiggsD,DosanjhB,PrendergastA,etal.UseofRapeseed/CanolaProteinProductsinFinfishDiets[J].NutritionandUtilizationTechnologyinAquaculture,1995,1(1):130-156.[78]LimC,BeamesR,EalesJ,etal.NutritiveValuesofLowandHighFibreCanolaMealsforShrimp(PenaeusVannamei)[J].AquacultureNutrition,1997,3(4):269-279.[79]ForsterIP,DominyW,ObaldoL,etal.RenderedMeatandBoneMealsasIngredientsofDietsForShrimpLitopenaeusVannamei(Boone,1931)[J].Aquaculture,2003,219(1):655-670.[80]TanB,MaiK,ZhengS,etal.ReplacementofFishMealbyMeatandBoneMealinPracticalDietsfortheWhiteShrimpLitopenaeusVannamai(Boone)[J].AquacultureResearch,2005,36(5):439-444.[81]LimC,DominyW.EvaluationofSoybeanMealasaReplacementforMarineAnimalProteininDietsforShrimp(PenaeusVannamei)[J].Aquaculture,1990,87(1):53-63.[82]LimC.ReplacementofMarineAnimalProteinwithPeanutMealinDietsforJuvenileWhiteShrimp,PenaeusVannamei[J].JournalofAppliedAquaculture,1997,7(3):67-78.[83]HernándezC,Olvera-NovoaMA,Aguilar-VejarK,etal.PartialReplacementofFishMealbyPorcineMeatMealinPracticalDietsforPacificWhiteShrimp(LitopenaeusVannamei)[J].Aquaculture,2008,277(3):244-250.[84]YangY,XieS,LeiW,etal.EffectofReplacementofFishMealbyMeatandBoneMealandPoultryby-ProductMealinDietsontheGrowthandImmuneResponseofMacrobrachiumNipponense[J].Fish&ShellfishImmunology,2004,17(2):105-114.[85]Goytortúa-BoresE,Civera-CerecedoR,Rocha-MezaS,etal.PartialReplacementofRedCrab(PleuroncodesPlanipes)MealforFishMealinPracticalDietsfortheWhiteShrimpLitopenaeusVannamei.EffectsonGrowthandinVivoDigestibility[J].Aquaculture,2006,256(1):414-422.57 集美大学硕士学位论文基于氨基酸平衡的鸡肉粉代替鱼粉的配合饲料对凡纳滨对虾生长性能的影响[86]AlvarezJS,Hernández-LlamasA,GalindoJ,etal.SubstitutionofFishmealwithSoybeanMealinPracticalDietsforJuvenileWhiteShrimpLitopenaeusSchmitti[J].AquacultureResearch,2007,38(7):689-695.[87]SuárezJ,GaxiolaG,MendozaR,etal.SubstitutionofFishMealwithPlantProteinSourcesandEnergyBudgetforWhiteShrimpLitopenaeusVannamei[J].Aquaculture,2009,289(1):118-123.[88]LimC.SubstitutionofCottonseedMealforMarineAnimalProteininDietsforPenaeusVannamei[J].JournaloftheWorldAquacultureSociety,1996,27(4):402-409.[89]刘立鹤,黄峰,侯永清,等.饲料中用花生粕替代鱼粉对凡纳对虾生长和氨基酸组成的影响[J].大连水产学院学报,2008,23(5):370-375.[90]YeJD,WangK,LiFD,etal.IncorporationofaMixtureofMeatandBoneMeal,Poultryby-ProductMeal,BloodMealandCornGlutenMealasaReplacementforFishMealinPracticalDietsofPacificWhiteShrimpLitopenaeusVannameiatTwoDietaryProteinLevels[J].AquacultureNutrition,2011,17(2):337-347.[91]AkiyamaDM.FutureConsiderationsforShrimpNutritionandtheAquacultureFeedIndustry[C]//ProceedingoftheSpecialSessiononShrimpFarming.WorldAcuacultureSociety.BatonRougeUSA,1992:10-22.[92]WilsonRP.AminoAcidRequirementsofFinfishandCrustaceans[M].AminoAcidsinAnimalNutrition,2003:427-447.[93]王用黎.凡纳滨对虾幼虾对苏氨酸、亮氨酸、色氨酸和缬氨酸需要量的研究[D].湛江:广东海洋大学,2013.[94]蒋琼,王雷.中国对虾血淋巴抗凝剂的筛选[J].水产学报,2001,25(4):359-362.[95]MenteE,CoutteauP,HoulihanD,etal.ProteinTurnover,AminoAcidProfileandAminoAcidFluxinJuvenileShrimpLitopenaeusVannamei:EffectsofDietaryProteinSource[J].JournalofExperimentalBiology,2002,205(20):3107-3122.[96]FindleyAM,StickleWB.EffectsofSalinityFluctuationontheHemolymphCompositionoftheBlueCrabCallinectesSapidus[J].MarineBiology,1978,46(1):9-15.[97]GatlinDM,BarrowsFT,BrownP,etal.ExpandingtheUtilizationofSustainablePlantProductsinAquafeeds:AReview[J].AquacultureResearch,2007,38(6):551-579.[98]GaylordTG,RawlesSD.TheModificationofPoultryby-ProductMealforUseinHybridStripedBassMoroneChrysops×M.SaxatilisDiets[J].JournaloftheWorldAquacultureSociety,2005,36(3):363-374.[99]FragaS,SerraoMP,Soares-da-SilvaP.L-TypeAminoAcidTransportersinTwoIntestinalEpithelialCellLinesFunctionasExchangerswithNeutralAminoAcids[J].TheJournalofNutrition,2002,132(4):733-738.[100]麦康森,李爱杰,尹左芬.对虾对饵料蛋白质及氨基酸吸收利用的研究[J].海洋学报,1987,9(4):489-495.[101]MillamenaOM.ReplacementofFishMealbyAnimalby-ProductMealsinaPracticalDietforGrow-OutCultureofGrouperEpinephelusCoioides[J].Aquaculture,2002,204(1):75-84.[102]SubhadraB,LochmannR,RawlesS,etal.EffectofFish-MealReplacementwithPoultryby-ProductMealontheGrowth,TissueCompositionandHematologicalParametersofLargemouthBass58 集美大学硕士学位论文基于氨基酸平衡的鸡肉粉代替鱼粉的配合饲料对凡纳滨对虾生长性能的影响(MicropterusSalmoides)FedDietsContainingDifferentLipids[J].Aquaculture,2006,260(1):221-231.[103]MuYY,ShimKF,GuoJY.EffectsofProteinLevelinIsocaloricDietsonGrowthPerformanceoftheJuvenileChineseHairyCrab,EriocheirSinensis[J].Aquaculture,1998,165(1):139-148.[104]Segovia-QuinteroMA,ReighRC.CoatingCrystallineMethioninewithTripalmitin-PolyvinylAlcoholSlowsItsAbsorptionintheIntestineofNileTilapia,OreochromisNiloticus[J].Aquaculture,2004,238(1):355-367.[105]曾雯娉.凡纳滨对虾幼虾对赖氨酸、蛋氨酸、精氨酸和苯丙氨酸需要量的研究[D].湛江:广东海洋大学,2012.[106]GunasekeraRM,ShimKF,LamTJ.InfluenceofDietaryProteinContentontheDistributionofAminoAcidsinOocytes,SerumandMuscleofNileTilapia,OreochromisNiloticus(L.)[J].Aquaculture,1997,152(1):205-221.[107]YoungVR,ZamoraJ.EffectsofAlteringtheProportionsofEssentialtoNonessentialAminoAcidsonGrowthandPlasmaAminoAcidLevelsintheRat[J].TheJournalofNutrition,1968,96(1):21-27.[108]邓君明,麦康森.鱼类对晶体氨基酸利用效率的研究进展[J].云南农业大学学报,2008,23(4):552-557.[109]LangdonCJ,BuchalMA.ComparisonofLipid-WalledMicrocapsulesandLipidSprayBeadsfortheDeliveryofWater-Soluble,Low-MolecularWeightMaterialstoAquaticAnimals[J].AquacultureNutrition,1998,4(4):275-284.[110]LangdonCJ.NewTechniquesandTheirApplicationtoStudiesofBivalveNutrition[C]//ProceedingsoftheSecondInternationalConferenceonAquacultureNutrition.UniversityofDelawareLewes,1983:305-320.[111]LangdonCJ,LevineDM,JonesDA.MicroparticulateFeedsforMarineSuspension-Feeders[J].JournalofMicroencapsulation,1985,2(1):1-11.[112]López-AlvaradoJ,LangdonCJ,TeshimaSI,etal.EffectsofCoatingandEncapsulationofCrystallineAminoAcidsonLeachinginLarvalFeeds[J].Aquaculture,1994,122(4):335-346.[113]YamamotoT,SugitaT,FuruitaH.EssentialAminoAcidSupplementationtoFishMeal-BasedDietswithLowProteintoEnergyRatiosImprovestheProteinUtilizationinJuvenileRainbowTroutOncorhynchusMykiss[J].Aquaculture,2005,246(1):379-391.[114]RollinX,MambriniM,AbboudiT,etal.TheOptimumDietaryIndispensableAminoAcidPatternforGrowingAtlanticSalmon(SalmoSalarL.)Fry[J].BritishJournalofNutrition,2003,90(5):865-876.[115]TwibellRG,GriffinME,MartinB,etal.PredictingDietaryEssentialAminoAcidRequirementsforHybridStripedBass[J].AquacultureNutrition,2003,9(6):373-381.[116]MambriniM,KaushikSJ.PartialReplacementofDietaryProteinNitrogenwithDispensableAminoAcidsinDietsofNileTilapia,OreochromisNiloticus[J].ComparativeBiochemistryandPhysiologyPartA:Physiology,1994,109(2):469-477.[117]HegerJ.Essentialtonon-EssentialAminoAcidRatios[C]//AminoAcidsinAnimalNutrition.2003:103-204.[118]叶元土.淡水鱼类营养与饲料配制技术发展趋势与存在问题分析（上）[J].饲料广角,2005,9(1):32-34.[119]ZarateDD,LovellRT,PayneDM.EffectsofFeedingFrequencyandRateofStomachEvacuationon59 集美大学硕士学位论文基于氨基酸平衡的鸡肉粉代替鱼粉的配合饲料对凡纳滨对虾生长性能的影响UtilizationofDietaryFreeandProtein-BoundLysineforGrowthbyChannelCatfishIctalurusPunctatus[J].AquacultureNutrition,1999,5(1):17-22.[120]CoweyCB,WaltonMJ.StudiesontheUptakeof(14c)AminoAcidsDerivedfrombothDietary(14c)ProteinandDietary(14c)AminoAcidsbyRainbowTrout,SalmoGairdneriRichardson[J].JournalofFishBiology,1988,33(2):293-305.[121]AdeolaO,LawrenceBV,ClineTR.AvailabilityofAminoAcidsfor10-20KilogramPigs:LysineandThreonineinSoybeanMeal[J].JournalofAnimalScience,1994,72(8):2061-2067.[122]FernandezSR,ParsonsCM.BioavailabilityoftheDigestibleLysineandValineinCottonseedandSoybeanMealsforChicks[J].PoultryScience,1996,75(2):216-223.[123]González‐FélixML,GatlinDM,LawrenceAL,etal.EffectofVariousDietaryLipidLevelsonQuantitativeEssentialFattyAcidRequirementsofJuvenilePacificWhiteShrimpLitopenaeusVannamei[J].JournaloftheWorldAquacultureSociety,2002,33(3):330-340.[124]牛化欣.微胶囊氨基酸制备及其在饲料加工和虾养殖中的效果研究[D].无锡:江南大学,2011.[125]SchuhmacherA,WaxC,GroppJM.PlasmaAminoAcidsinRainbowTrout(OncorhynchusMykiss)FedIntactProteinoraCrystallineAminoAcidDiet[J].Aquaculture,1997,151(1):15-28.60 集美大学硕士学位论文基于氨基酸平衡的鸡肉粉代替鱼粉的配合饲料对凡纳滨对虾生长性能的影响在学期间发表的学术论文[1]林建伟,张春晓,孙云章,等.鸡肉粉替代鱼粉饲料中补充晶体必需氨基酸和非必需氨基酸对凡纳滨对虾生长性能、体成分、血浆及肌肉游离氨基酸含量的影响[J].动物营养学报,2015,27(6):1709-1721.61
此文档下载收益归作者所有
