利用鱼类胶原蛋白支架体外构建组织工程全层人角膜的研究

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1、尚斯义考儀）寸ｆＯＣＥＡＮＵＮＩＶＥＲＳＩＴＹＯＦＣＨＩＮＡ博壬学位论文ＤＯＣＴＯ民ＤＩＳＳＥＲＴＡＴＩＯＮ利用鱼类胶原重白支架体外构建组织工程全层人论文题目；角膜的研究／打１如化＞ＣｏｎｓｔｒｕｃｔｉｏｎａｎｄＣｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎｏｆ－－ｎｏｒｎｅａｗＴｉｕｅＥｎｉｎｅｅｒｅｄＦｕＵｌａｅｒＨｕｍａＣｉ化ｓｓｇｙＦｓｈ－ｅｎａｆｆｏｄｉＣｏｌｌａＳｃｌ英文题目；ｇ作者：袁晓龙指导教师：樊廷俊教授学位类别：学术学位

2、细胞生物学专业名称；研究方向：组织工程＇＊？■．■—？ｆｔ．１Ｉ＾谨此论文献给精心裁培我的导师１＾及我的家人和一起挥洒着青春的可爱的人们袁晓龙利用鱼类胶原蛋白支架体外构建组织工程全层人角膜的研究学位论文完成。期：年？月？。円指雜师签字：：答辩委员会成员签字馬心＿＿Ｌ换終Ｖ独创声明本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的，论文中不包含研究成果。据我所知，除了文中特别加标注和致谢的地方外其他人已经发表或撰写

3、过的研究成果，也不包含未获得或其他教巧机构的学位或证书使用过的材料一。与我同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。、学位论文作者签名签字円期：Ｘ！ｒ年ｒ月矣円学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，并同意ＷＫ事项：１、学校有权保留并向国家有关部口或机构送交论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅。２、学校可将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可Ｗ＂采用影印。、缩印或扫描等复制手段保存、汇编

4、学位论文同时授权清华大学中＂国学术期刊（光盘版）电子杂志社用于出版和编入ＣＮＫＩ《中国知识资源总库》，授权中国科学技术信息研究所将本学位论文收录到《中国学位论文全文数据库》。（保密的学位论文在解密后适用本授权书）学位论文作者签名：导师若也＊？＇签字口期；）少年ｔ月円签字日期；年月円＾ｊ利用鱼类胶原蛋白支架体外构建组织工程全层人角膳的研究捕要一一角膜是位于眼球最前壁的层透明膜，，具有定的曲率半径在维持视功能和保护眼球方面发挥了不可替代的重要功能。人角膜由上皮层、前弹力层、基质

5、６－８层人角膜上皮层、后弹为层和内皮层构成，其中，厚度约５０叫ｎ的上皮层由５００川£５细细胞（ＨＣＥＰ细胞）构成，厚度约〇１１的基质层由人角膜基质细胞＾ａｍ胞）和主要由胶原蛋白组成的高度有序的细胞外基质构成，厚度约５的内皮ｌ层由单层人角膜内皮细胞（ＨＣＥ细胞）组成。角膜因位于眼表最前端，直接与一，旦发生病变将会引起角膜混浊、视力下降外界接触，故极易受到损伤和感染一甚至致盲，。但遗憾的是，。目前临床上治疗角膜病盲的唯有效手段是角膜移植由于捐献角膜数量的严重不足及捐献角膜老化，致使绝大数角

6、膜病盲患者无法通过角膜巧植重见光明。近年来角膜组织工程技术的快速发展．使组织王程角膜的体外构建成为可能，而组织工程角膜作为捐献角膜的等效替代物，则是目前从根一希望本上解决捐献角膜高度匿乏问题、使众多巧膜病盲患者恢复视功能的唯。如何获得足量正常的种子细胞和生物相容性理想的载体支架一直足制约组织工程角膜规模化体外构建的两大因素，已成为角膜组织工程领域的研究热点和难点，目。在种子细胞方面前的研究主要集中在干细胞、转染组织细胞系和原代组、，织细胞的体外培养上，但由于体外培养条件伦理或潜在致瘤性等多

7、种限制目前仍无法满足组织工程角膜规模化构建对种子细胞的需求，本实验室成。近年来功建立了非转染无致瘤性的ＨＣＥ、ＨＣＳ和ＨＣＥＰ的Ｈ种组织细胞系，并Ｗ其为种子细胞先后进行了组织工程人角膜内皮、基质和上皮的体外构建研究，达到了较为理想的动物移植效果，使利用非转染人角膜組织细胞系规模化构建组织工程角膜成为可能，目前的研究主要集中在天然生物材料、人工合。在载体支架方面成高分子材料和生物大分子复合材料方面。鉴于天然Ａ物村料或多或少地受到其病原体携带风险和来源的限制、人工合成高分子材料还存在有生物相容

8、性不理想。等缺陷，学者们便逐渐将研究重点转移到生物大分子复合材料的研发方面在生，胶原蛋白由于具有来源广泛物大分子复合材料的研究中、在进化上高度保守、Ｉ免疫原性低且生物相容性理想等诸多优势，已被广泛用于各种载体支架材料的制备研究，且利用人胶原蛋白复合支架成功构建出了组织工程角膜，但遗憾的是，所制备出的胶原蛋白复合支架仍然存